Sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng quát quá trình thu nhận enzyme cellulase từ nấm mốc

G= (100−𝑊) 𝑚

2.3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng quát quá trình thu nhận enzyme cellulase từ nấm mốc

nấm mốc

Đất, quả cà phê, thân cành mục

Cắt nhỏ

Hòa tan với nước muối sinh lý

Vortex

Cấy sang đĩa petri

Làm thuần khuẩn lạc Ủ ở 300C, 72 giờ

Thí nghiệm 1: Ký hiệu các chủng vi nấm có đặc điểm giống Aspergillus và Trichoderma

Thí nghiệm 2: Định loại chủng vi nấm dựa trên hình thái đại thể và vi thể

Ủ ở 300C, 7 ngày

Cấy chấm 3 điểm trên môi trường CZ

Tạo huyền phù bào tử nấm Đổ vào lỗ giữa thạch agar-CMC

Ủ ở 300C, 48 giờ

Đo đường kính vòng phân giải CMC và hoạt tính enzyme cellulase

46

Hình 2.8 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng quát quá trình thu nhận cellulase từ nấm mốc Định danh các chủng nấm mốc phân lập được và chọn 1 chủng nấm mốc để tối ưu môi trường nuôi cấy

Nuôi cấy trên môi trường lỏng cơ bản

Thí nghiệm 4-13: Xác định các điều kiện nuôi cấy nấm mốc tuyển chọn được

Khảo sát cơ chất cảm ứng và nồng độ cơ chất (TN 8-9)

Khảo sát nguồn nitơ và nồng độ nitơ bổ sung (TN 10-11)

Khảo sát nguồn khoáng và nồng độ khoáng bổ sung (TN 12-13)

Khảo sát thời gian và nhiệt độ nuôi cấy (TN 4-5)

Khảo sát pH môi trường nuôi cấy (TN 6) Khảo sát nồng độ dịch chiết khoai tây (TN 7)

Chọn được môi trường nuôi cấy tối ưu

Nuôi cấy trong môi trường đã tối ưu

Thí nghiệm 14-17: Tinh sạch sơ bộ enzyme cellulase

Khảo sát tác nhân tủa enzyme acetone (TN 17) Khảo sát tác nhân tủa

enzyme (NH4)2SO4 và NaCl (TN 14-15)

Khảo sát tác nhân tủa enzyme Etanol (TN 16)

47