G= (100−𝑊) 𝑚
2.3.12 Thí nghiệm 12-13: Khảo sát ảnh hưởng của nguồn nitơ bổ sung vào môi trường nuôi cấy
và một mẫu đối chứng không có bổ sung thêm nguồn khoáng. Sau khi nuôi cấy thu lấy lịch lọc đem đi ly tâm 10.000 v/p ,15 phút, sau đó lọc qua vải lọc. Dịch enzyme thô đem đi xác định hoạt tính cellulase. Dựa vào hoạt tính cellulase để chọn nguồn khoáng và nồng độ khoáng bổ sung phù hợp.
Chỉ tiêu theo dõi: Hoạt tính enzyme cellulase
Kết quả thu nhận: Chọn được loại nguồn khoáng bổ sung phù hợp mà tại đó hoạt
tính cellulase là cao nhất.
2.3.12 Thí nghiệm 12-13: Khảo sát ảnh hưởng của nguồn nitơ bổ sung vào môi trường nuôi cấy trường nuôi cấy
Mục đích: Khảo sát sự thay đổi hoạt tính enzyme cellulase khi thay đổi các loại
nguồn nitơ bổ sung vào môi trường nuôi cấy.
Nuôi cấy trên môi trường lỏng
Khoáng vi lượng G6 G5 G4 G3 G2 G1
Thu nhận dịch enzyme thô Xác định hoạt tính cellulase
56
Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm tiến hành với 1 nhân tố.
Nhân tố I: Các loại nguồn nitơ
I1: NH4NO3 I3: (NH4)2SO4 I5: KNO3
I2: Cao thịt I4: NH3 I6: Đối chứng Số nghiệm thức: 6
Số mẫu thí nghiệm: 8 x 3 lần lặp lại = 18 mẫu. Sơ đồ bố trí thí nghiệm:
Chủng nấm mốc
Hình 2.16 Sơ đồ nghiên cứu sự ảnh hưởng của loại nguồn nitơ bổ sung đến hoạt lực enzyme cellulase
Cách tiến hành: Tiến hành tương tự như thí nghiệm 10-11. Tiếp tục bổ sung vào
môi trường nuôi cấy các loại nguồn nitơ khác nhau: (NH4)2HPO4, (NH4)2SO4, Cao thịt, NH4NO3 và một mẫu đối chứng không có bổ sung thêm nguồn nitơ. Sau khi nuôi cấy thu lấy lịch lọc đem đi ly tâm 10.000 v/p ,15 phút, sau đó lọc qua vải lọc. Dịch enzyme thô đem đi xác định hoạt tính cellulase. Dựa vào hoạt tính cellulase để chọn nguồn nitơ và nồng độ nitơ bổ sung phù hợp.
Chỉ tiêu theo dõi: Hoạt tính enzyme cellulase
Kết quả thu nhận: Chọn được loại nguồn nitơ bổ sung phù hợp mà tại đó hoạt tính
cellulase là cao nhất.
Nuôi cấy trên môi trường lỏng
Nguồn nitơ bổ sung
I6 I5 I4 I3 I2 I1
Thu nhận dịch enzyme thô Xác định hoạt tính cellulase
57