CÁC QUÁ TRÌNH XẢY RA

Một phần của tài liệu Lý thuyết sắc ký và xác định axit béo trong da (Trang 71)

tách.

Xét một quá trình sắc ký, ban đầu một thể tích rất nhỏ mẫu được bơm vào đầu cột tách. Pha động lỏng sẽ đẩy mẫu chuyển dọc theo cột có chất nhồi rắn. Trong quá trình đó, các cấu tử trong mẫu luôn được hấp thụ và giải hấp thụ... Được lặp đi lặp lại nhiều lần trên cột. Vì khả năng bị hấp thụ và giải hấp thụ... Khác nhau của các cấu tử đó nên chúng được tách ra khỏi nhau trong quá trình chuyển dọc cột tách.

Trong quá trình đó, mỗi cấu tử X sẽ được phân bố giữa pha tĩnh (s) và pha động (m) trong suốt cả chiều dài cột. Sự phân bố này phụ thuộc vào cân bằng Xm Xs hay nó phụ thuộc vào hệ số phân bố của cấu tử X giữa hai pha:

KX = [X]s / [X]m

- Nếu KX lớn → X sẽ ưu tiên ở trên pha tĩnh và chuyển động dọc theo cột. - Nếu KX nhỏ → X sẽ chuyển động dọc theo cột nhanh hơn.

Vì những sự khác nhau này giữa các cấu tử mà chúng được tách khỏi nhau khi ta dùng pha động lỏng để rửa giải trên cột. Kết quả của quá trình sắc ký sẽ được các thiết bị (6) và (7) ghi nhận và cho ta một sắc đồ.

Như vậy, mỗi chất sẽ mất một thời gian khác nhau để đi hết chiều dài cột tách cho đến Detector. Thời gian đó được gọi là thời gian lưu của nó trên cột.

Như vậy, mỗi chất sẽ mất một thời gian khác nhau để đi hết chiều dài cột tách cho đến Detector. Thời gian đó được gọi là thời gian lưu của nó trên cột.

Sự lưu giữ của mỗi chất tan trên cột tách là khác nhau đối với các chất nhồi cột khác nhau về diện tích bề mặt riêng. Ngay trong một loại pha tĩnh có cùng diện tích bề mặt riêng, nhưng do hai hãng khác nhau chế tạo thì vẫn có hệ số dung tích Ki khác nhau, mặc dù trong cùng một điều kiện sắc ký.

Cấu trúc xốp pha tĩnh cũng ảnh hưởng đến kết quả sắc ký do khả năng hoạt động bề mặt, cấu trúc và sự phân bố của lỗ xốp trong hạt pha tĩnh khác nhau.

Một phần của tài liệu Lý thuyết sắc ký và xác định axit béo trong da (Trang 71)