D anh mục bảng
2.4.1. Yêu cầu Chủng giống sản xuất
Đối với vắc xin, sự phù hợp của chủng là yếu tố đầu tiên ảnh hưởng đến chất lượng của vắc xin sau này. Nguồn chủng sử dụng để sản xuất vắc xin sẽ được lựa chọn dựa trên sự tương đồng kháng nguyên với các chủng thực địa.
Trong nghiên cứu này, để thiết lập quy trình công nghệ sản xuất vắc xin nhị giá sử dụng hai loại virus ND chủng LaSota, virus IB chủng H120 với lý do như sau:
- Virus Newcastle được biết đến là virus thuộc Avian paramyxovirus 1, trong đó, virus có thể được phân loại dựa trên độc lực của virus gây ra cho gà.
+ Dựa vào trình tự gen của virus Newcastle, có 9 genotype được xác định thông qua phân tích cây phả hệ của các trình tự gên virus Newcastle. Trong đó, các chủng nhược độc như Ulster, LaSota, B1 thuộc genotype I và II. Tuy có sự khác biệt về genotype, nhưng tất cả các chủng virus Newcastle hiện tại đều được công nhận thuộc 1 serotype duy nhất, điều đó có nghĩa, kháng thể đặc hiệu cho chủng virus Newcastle này có thể trung hòa (bảo hộ cho gia cầm) virus Newcastle khác xâm nhiễm vào cơ thể. Kháng thể trung hòa sinh ra do kích thích trực tiếp từ 2 loại protein cấu trúc chính của vỏ virus Newcastle là HN và F protein, do vậy tất cả các chủng virus Newcastle độc lực cao và độc lực thấp đều mang 2 protein trên và đều kích thích cơ thể sản sinh kháng thể trung hòa.
+ Những nghiên cứu vắc xin nhược độc Newcastle (sử dụng chủng LaSota) kích thích cơ thể tạo ra đồng bộ cả miễn dịch cục bộ (IgA) tại tế bào và miễn dịch dịch thể (IgA/IgM/IgG) trong huyết thanh. Trong khi đó, vắc xin vô hoạt sử dụng chủng nhược độc tự nhiên kích thích tạo miễn dịch dịch thể trong huyết thanh (IgM/IgG) (Al-Garib & cs., 2003).
+ Theo khuyến cáo của OIE, sử dụng chủng nhược độc như LaSota, Ulster, Hitcher B1, … hay các chủng độc lực vừa như: Mustekwar để chế vắc xin nhược độc cho gia cầm. Đối với sản xuất vắc xin vô hoạt, việc chọn chủng có thể tạo lượng kháng nguyên lớn trên phôi trứng điều quan trọng nhất. Các chủng độc lực cao và chủng độc lực thấp đều có thể được lựa chọn làm vắc xin vô hoạt, tuy nhiên không nhất thiết chọn các chủng có độc lực cao khi nguy cơ trong sản xuất cao hơn chủng độc lực thấp.
+ Theo Quyết định 93/152/EEC của Hội đồng chung Châu Âu, tất cả các chủng virus Newcastle sử dụng để làm vắc xin lưu hành tại các nước thành viên của tổ chức này phải có chỉ số độc lực ICPI < 0.7. Những chủng virus sử dụng làm vắc xin phổ biến là: Hitchner B1, LaSota, F, Ulster.
Từ các cơ sở trên, chủng LaSota được sử dụng để sản xuất vắc xin vô hoạt. Chủng LaSota vẫn đảm bảo kích thích cơ thể sản sinh kháng thể trung hòa được tất cả các chủng virus Newcastle cường độc. Đặc biệt, virus Newcastle chủng LaSota có thể dễ dàng nhân lên trên trứng gà có phôi và cho hiệu giá virus cao (11-12Log2 HA, > 109 EID50), điều này đem đến hiệu quả lớn trong thực tiễn sản
xuất do giảm được giá thành sản phẩm để mở rộng được đối tượng người dân tiếp cận được sản phẩm. Tuy nhiên, cần phải xác định hàm lượng kháng nguyên có trong mỗi liều vắc xin để đảm bảo tạo kháng thể bảo hộ và thời gian bảo hộ gia cầm khỏi sự tác động của virus Newcastle.
- Đối với Virus IB, có rất nhiều (>100 chủng) chủng được xác định thuộc các serotype khác nhau của virus IB đang lưu hành trên thực địa. Điều đó dẫn đến khó khăn trong công tác phòng bệnh bằng vắc xin. Virus IB thuộc chủng Massachusetts có tác dụng tốt và được sử dụng phổ biến. Do virus IB - H120 có thể dễ dàng nhân lên trứng gà có phôi thu được lượng lớn kháng nguyên và có được hiệu giá virus cao nên virus IB chủng H120 được dùng làm chủng giống vắc xin trong nghiên cứu này.