Nghiệm thức Newcastle (LaSota) IB (H120)
Nghiệm thức 1 1 1 Nghiệm thức 2 1 2 Nghiệm thức 3 2 1 Nghiệm thức 4 2 2 Nghiệm thức 5 1 3 Nghiệm thức 6 3 1 Nghiệm thức 7 2 3 Nghiệm thức 8 3 2 Nghiệm thức 9 3 3
3.4.3.3. Đánh giá 9 nghiệm thức phối trộn vắc xin và lựa chọn công thức tối ưu nhất
Mỗi nghiệm thức tiến hành kiểm tra các chỉ tiêu vô trùng, chỉ tiêu hóa lý, đánh giá an toàn và đáp ứng miễn dịch trên gà thí nghiệm;
Phân tích đáp ứng miễn dịch thông qua phản ứng huyết thanh học;
Trên cơ sở các chỉ tiêu được đánh giá, tiến hành lựa chọn nghiệm thức tối ưu nhất.
3.4.4. Sản xuất thử nghiệm
Sản xuất thử nghiệm 03 lô vắc xin vô hoạt nhị giá quy mô phòng thí nghiệm với nghiệm thức được lựa chọn.
3.4.5. Kiểm nghiệm vắc xin
Kiểm nghiệm theo tiêu chuẩn cơ sở ban hành tại công ty gồm: + Kiểm tra các chỉ tiêu hóa lý;
+ Kiểm tra vô trùng; + Kiểm tra an toàn; + Kiểm tra hiệu lực.
3.4.6. Thử nghiệm vắc xin
Thử nghiệm vắc xin trên gà ở quy mô nhỏ (100 con), đánh giá hiệu quả vắc xin thông qua đánh giá hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle (HI) và hiệu giá kháng thể kháng virus IB (ELISA) 21-28 ngày sau tiêm vắc xin.
3.5. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.1. Phương pháp xác định hiệu giá virus ND (LaSota) bằng phản ứng HA
(Haemagglutination)
-Dùng đĩa nhựa 96 giếng, đáy chữ V hoặc U;
-Nhỏ 50µl/giếng dung dịch PBS 1X hoặc NaCl 0.9% từ giếng 1 đến giếng 12;
-Nhỏ 50 µl mẫu cần kiểm tra vào giếng 1;
-Pha loãng theo cơ số 2: Trộn đều ở giếng 1, hút 50µl chuyển sang giếng 2 và trộn đều, hút 50µl từ giếng 2 chuyển sang giếng 3 và trộn đều, tiếp tục làm như vậy đến giếng 11, hút bỏ 50µl. Giếng 12 là đối chứng hồng cầu;