Bã nấm men bia sau tiền xử lý tiến hành thủy phân bã nấm men bia với 3 chế phẩm enzyme Alcalase 260 UI/g, Flavouzym 280 UI/g, Neutrase 290 UI/g của Novozyme ở các điều kiện chung về nồng độ enzyme 232 U (4%) , nồng độ cơ chất 20%, thời gian thủy phân 16h, nhiệt độ 50oC đối với Flavouzym và Neutrase, 55oC với Alcalase. pH 6.5 đối với Flavouzym và Neutrase, pH 8 đối với Alcalase. Kết thúc quá trình, dịch thủy phân được gia nhiệt 95oC trong 5 phút để bất hoạt enzym, tiến hành ly tâm 12000 vịng/ phút trong 20 phút nhiệt độ 4oC. Loại bỏ bã thu dịch nổi lọc qua màng siêu lọc 10Kda. Xác định hoạt tính kìm hãm ACE của dịch peptide được thủy phân bởi 3 chế phẩm Enzym. Kết quả được biểu diễn ở bảng 3.1
Enzym Hoạt tính kìm
hãm ACE (%)
Alcalase 57.6
Flavouzym 54.3
Neutrase 56.2
Bảng 3.1. Kết quả lựa chọn enzym thủy phân
Từ kết quả cho thấy, dịch peptide thủy phân bởi chế phẩm Alcalase cho hoạt tính ức chế ACE cao nhất 57,6% sau đĩ tới chế phẩm Neutrase 56,2% và chế phẩm Flavouzym 54,3% . Tuy nhiên, chúng tơi chọn enzym Neutrase cho các nghiên cứu tiếp theo do bản chất là một endopeptide, phù hợp cho quá trình sản xuất peptide Neutrase cĩ khả năng thủy phân bã nấm men bia thành peptide cao hơn 2 loại enzym cịn lại. Mặt khác Neutrase bản chất là protease trung tính nên việc điều chỉnh pH trước quá trình thủy phân đơn giản hơn, khơng tốn kém hĩa chất trung hịa nguyên liệu pH của bã nấm men thường từ 6.5- 7.0, trong khi đĩ pH của
Luận văn thạc sỹ Cơng nghệ sinh học
Alcalase là 8, nếu sử dụng enzym này sẽ phải sử dụng hĩa chất để điều chỉnh gây tốn kém hĩa chất, giá thành tăng.