Chƣơng 3 : KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.4 .Xác định môi trƣờng nhân nhanh số lƣợng chồi
3.4.2. Ảnh hưởng phối hợp của BAP+ Kinetin (Kn) đến hệ số nhân chồ
tỷ lệ chồi hữu hiệu
Sự có mặt của Kinetin trong môi trường nuôi cấy thường có tác dụng kích thích quá trình tổng hợp diệp lục (Trần Văn Minh và cộng sự, 1998); bên cạnh đó khi sử dụng tổ hợp BAP +Kn có tác dụng làm giảm quá trình lão hóa của chồi (Coke J. E, 1996).
Kn thường được bổ sung với nồng độ thấp 0,1- 5mg/l khi dùng phối hợp với BAP để làm tăng hiệu quả nhân chồi của mẫu nuôi cấy. Đoàn Thị Mai và cộng sự, 2005 đã nhân giống Trầm hương bằng môi trường có bổ sung 1mg/l BAP + 0,5mg/l Kn. Vũ Ngọc Phượng và cộng sự, 2000 sử dụng môi trường nhân chồi cho cây Tre tàu và Tre mạnh tông bổ sung 2mg/l BAP + 1mg/l Kn.
Đề tài tiến hành thí nghiệm môi trường MS* + 1mg/lBAP(với dòng UP54) và môi trường MS* + 1,5mg/lBAP(với dòng UP99) có bổ sung Kn ở các nồng độ 0,25mg/l, 0,5mg/l, 0,75mg/l và 1mg/l với các chỉ tiêu theo dõi là HSNC và TLCHH.
Do đặc điểm về mặt di truyền không đồng nhất nên các dòng khác nhau sẽ có phản ứng khác nhau với môi trường. Chính vì vậy mà hiệu quả phối hợp giữa BAP và Kn cho các dòng là không giống nhau
Đối với dòng UP99 khi tăng nồng độ Kn từ 0 đến 0,5mg/l trong môi trường nuôi cấy làm tăng HSNC (tăng từ 1,95 đến 2,25 lần), chồi sinh trưởng tốt, các đốt dài hơn, lá mở và xanh, song hiệu quả tốt nhất khi sử dụng phối hợp giữa 1,5mg/l BAP + 0,5mg/l Kn cho UP99 (HSNC: 2,25 lần và TLCHH : 21,9%). Nhưng nếu tăng tiếp nồng độ từ 0,75 lên đến 1mg/l thì lại có chiều hướng làm HSNC giảm (giảm từ 2,25 xuống còn 1,9 lần), xuất hiện nhiều cụm chồi nhỏ, mảnh, thân chồi mướt và các đốt rất dài tạo hiệu quả nhân chồi cho các vòng sau thấp (Bảng 3.6 và Hình 3.4).
Bảng 3.6. Ảnh hưởng phối hợp của BAP + Kn đến HSNC và TLCHH Bạch đàn lai UP54 và UP99 (sau 15 ngày nuôi cấy)
Dòng MS* + 1mg/l BAP + HSNC (lần) TLCHH (%) Chất lƣợng chồi Tb Sd Tb Sd UP54 Kn 0 2,33 0,6 22,73 2,0 +++ 0,25 1,93 0,3 21,33 0,3 ++ 0,5 1,88 0,3 20,18 1,0 ++ 0,75 1,85 0,4 19,26 1,3 ++ 1,0 1,82 0,1 18,51 0,5 + Ftính = 89,12 > F05 = 3,47 (HSNC) và Ftính= 12,58 > F05 = 3,47(TLCHH) UP99 MS* + 1,5mg/l BAP + HSNC (lần) TLCHH (%) Chất lƣợng chồi Tb Sd Tb Sd Kn 0 1,95 0,3 18,92 0,3 ++ 0,25 2,11 0,4 19,82 0,7 ++ 0,5 2,25 0,3 21,9 0,8 +++ 0,75 1,91 0,4 19,16 0,8 ++ 1,0 1,9 0,5 18,56 1,8 + Ftính = 40,19 > F05 = 3,47 (HSNC) và Ftính = 4,64 > F05 = 3,47(TLCHH)
Đối với dòng UP54 bổ sung thêm Kn vào môi trường nuôi cấy khi đã có mặt BAP không những không tăng hiệu quả của quá trình nhân chồi mà còn làm tỷ lệ chồi hữu hiệu giảm đi (từ 22,73% xuống còn 18,51%). Như vậy, với một số đối tượng khi bổ sung thêm Cytokinin khác sẽ làm kìm hãm quá trình kích thích tạo chồi, làm cho hiệu quả nhân chồi giảm đi rõ rệt. Do nồng độ Cytokinin quá cao làm ức chế quá trình phát sinh và phát triển của chồi(Bảng 3.6).
Hình 3.4. Ảnh hưởng của BAP và Kn tới khả năng nhân chồi cho bạch đàn lai UP99(sau 15 ngày nuôi cấy)
Qua thí nghiệm ảnh hưởng của BAP và ảnh hưởng phối hợp của BAP + Kinetin (Kn) đến hệ số nhân chồi và tỷ lệ chồi hữu hiệu trên, đề tài rút ra một số nhận xét:
- Khi xét sự ảnh hưởng riêng lẻ của một chất hay phối hợp cả hai chất đến hệ số nhân chồi cho bạch đàn lai UP54 và UP99 thì đầu tiên phải chọn được loại hóa chất thích hợp
- Khi chọn được loại hóa chất thích hợp rồi, thì sự bố trí nghiệm riêng lẻ hay phối hợp ở nồng độ thích hợp là rất quan trọng, bởi vì nó quyết định đến hệ số nhân chồi cao hay thấp. Khi cho nồng độ thấp quá thì hóa chất chưa phát huy được tác dụng, ngược lại khi cho nồng độ quá cao thì lại kìm hãm sự phát sinh của chồi
Kết luận: Qua kết quả thí nghiệm trên, đề tài đã xác định được môi trường nhân nhanh thích hợp nhất cho bạch đàn lai UP54 và UP99 là:
+ Với dòng UP54 là môi trường: MS* + 1mg/l BAP
+ Với dòng UP99 là môi trường: MS* + 1,5mg/l BAP+0,5mg/l Kn