Chƣơng 3 : KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.4 .Xác định môi trƣờng nhân nhanh số lƣợng chồi
3.4.1. Ảnh hưởng của BAP đến hệ số nhân chồi (HSNC) và tỷ lệ chồi hữu
hiệu (TLCHH)
Theo Vuglteke (1989) môi trường nuôi cấy mô bổ sung Cytokinin có tác dụng kích thích tạo chồi. Trong đó BAP và Kinetin là những Cytokinin có hoạt tính sinh học cao nên thường được sử dụng để thúc đẩy sự phân chia tế bào và phát triển chồi của các mô nuôi cấy.
Thí nghiệm xác định ảnh hưởng riêng rẽ của BAP ở 4 thang nồng độ khác nhau: 0,5; 1,0; 1,5 và 2,0 mg/l, được bổ sung vào môi trường nuôi cấy MS* với các chỉ tiêu theo dõi là hệ số nhân chồi, tỷ lệ chồi hữu hiệu và chất lượng chồi.
Kết quả thí nghiệm cho thấy: Nồng độ BAP ảnh hưởng không đồng đều đến HSNC và TLCHH (Ftính> F05 ). Ở công thức không có BAP (đối chứng) thì dòng UP54 có HSNC và TLCHH là 1,18 lần và 15,11%, dòng UP99 có HSNC và TLCHH là 1,31 lần và 14,51%. Trong khi, với môi trường nồng độ BAP là 0,5 mg/l dòng UP54 có HSNC và TLCHH bắt đầu tăng lên, lần lượt là 1,59 lần và 18,12%, dòng UP99 có HSNC và TLCHH là 1,72 lần và 17,89%. Ở nồng độ BAP 1,0 mg/l chỉ tiêu theo dõi này đạt cao nhất cho dòng UP54 có HSNC 1,61 lần và TLCHH 22,35%, còn dòng UP99 ở nồng độ 1,5mg/l mới cho hiệu quả cao nhất có HSNC 2,24 lần và TLCHH 21,36% . Nhưng khi tăng nồng độ từ 1,5 - 2,0 mg/l thì HSNC và TLCHH của cả hai dòng đều giảm giảm mạnh, đồng thời xuất hiện những chồi nhỏ, mảnh, chồi hình thành không rõ rệt về thân, lá, ngọn, những chồi này không có tác dụng cho những
lần nhân chồi tiếp theo cũng như cấy chuyển sang môi trường tạo rễ do vậy không được đo đếm, nhiều chồi cấy hình thành khối mô sẹo to ở gốc(Bảng 3.5).
Bảng 3.5. Ảnh hưởng của BAP đến hệ số nhân chồi và tỷ lệ chồi hữu hiệu Bạch đàn lai UP54 và UP99 (sau 15 ngày nuôi cấy)
Dòng MS* + nồng độ BAP (mg/l) Hệ số nhân chồi (lần) Tỷ lệ chồi hữu hiệu (%) Chất lƣợng chồi Tb Sd Tb Sd UP54 0 1,18 0,1 15,11 1,3 + 0,5 1,59 0,2 18,12 2,2 ++ 1,0 1,61 0,1 22,35 0,9 +++ 1,5 1,51 0,2 21,14 0,8 ++ 2,0 1,55 0,2 15,39 0,6 ++ Ftính = 112,32 > F05 = 3,47 (HSNC) UP99 0 1,31 0,1 14,51 2,8 + 0,5 1,72 0,3 17,89 2,4 ++ 1,0 2,11 0,2 19,69 0,6 ++ 1,5 2,24 0,2 21,36 1,3 +++ 2,0 1,69 1,3 16,33 0,8 ++ Ftính = 198,76 > F05 = 3,47 (HSNC) Ghi chú:
+ : Chồi sinh trưởng kém
++ : Chồi sinh trưởng ở mức độ trung bình +++: Chồi sinh trưởng tốt
Như vậy các dòng khác nhau thì cũng cho phản ứng khác nhau với cùng một môi trường khi có bổ sung BAP ở các nồng độ khác nhau và nếu sử dụng nồng độ BAP cao sẽ gây ức chế sinh trưởng và phát triển của chồi