Dễ dàng nhận thấy: nếu có chất chuẩn việc sàng lọc và xác nhận sự có mặt của hợp chất asilbin trong mẫu phân tích chỉ cần tiến hành việc phân tích mẫu và chất chuẩn trên cùng một điều kiện phân tích, kết quả là sự so sánh thời gian lưu của chất chuẩn với píc xuất hiện trên sắc ký đồ của mẫu phân tích.
Hình 4.13: Sắc ký đồ của mẫu TPL-As4O và astilbin trên cột Zorbax eclipe XBD C18 (4,6 x 150 mm, 5µm)
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Mẫu Thổ phục linh được tiến hành theo quy trình chiết ổn định khác nhau. Cân chính xác 50 mg mẫu phân tích (dạng bột). Hòa tan cặn chiết bằng MeOH, điều chỉnh thể tích chính xác 10 ml để thu được dung dịch phân tích có nồng độ 5 mg/ml. Dịch chiết trước khi bơm vào hệ thống HPLC được lọc qua màng lọc 0,45 m. Chạy phân tích các mẫu với mô hình phân tích đã xây dựng ở trên.
Thông qua các kết quả so sánh thời gian lưu, kết hợp phương trình xây dựng được từ phương trình đường chuẩn định lượng astilbin và diện tích các píc tại thời gian lưu 19,0 phút có trên các sắc ký đồ của các mẫu phân tích. Kết quả định lượng hàm lượng astilbin trong các mẫu được trình bày trong bảng 4.4.
Bảng 4.4: Kết quả định lƣợng hàm lƣợng của astilbin trong các mẫu STT Ký hiệu mẫu Hàm lƣợng astilbin cao chiết
(mg/g) %
1 TPL- As40 592 59,2
2 TPL -EtOAc 415 41,5
3 TPL- Đường 375 37,5
4 TPL-EtOH 218 21,8
Từ kết quả thu được trên bảng 4.4. Chúng ta thấy hàm lượng astilbin đã được làm giàu lên qua các bước xử lý từ 21% ở mẫu cao chiết tổng TPL- EtOH lên 41,5% mẫu cao chiết TPL-EA (Mẫu này thu được từ dịch chiết EtOAc đem cô quay loại dung môi) và đến 59,2% ở mẫu cao chiết TPL-As40. Các mẫu cao chiết trên được nghiên cứu tiếp hoạt tính sinh học về độc tế bào và hoạt tính chống oxy hóa.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/