3. ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.4.5 Phương pháp ñ ánh giá ñộ dài miễn dịch của vacxin vô hoạt tụ huyết trùng trâu bò s ản xuất bằng công nghệ lên men sục khí
trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí
Vacxin ñược bảo quản trong ñiều kiện nhiệt ñộ 2 - 80C, lấy mẫu ở các thời ñiểm 1, 3, 6, 9, 12 tháng, sau khi nhập kho bảo quản ñể kiểm tra khả năng bảo hộ của vacxin ñối với ñộng vật thí nghiệm (thỏ). Mẫu ñược lấy ở các thời
ñiểm này ñem tiêm miễn dịch cho ñộng vật thí nghiệm. Sau 21 ngày sau khi gây miễn dịch, kiểm tra hiệu lực của vacxin ở các thời ñiểm bằng phương pháp công cường ñộc ñối với ñộng vật thí nghiệm (thỏ) ñã ñược gây miễn dịch, ñể xác ñịnh ñộ dài bảo quản của vacxin.
3.4.5 Phương pháp ñánh giá ñộ dài miễn dịch của vacxin vô hoạt tụ huyết trùng trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí trùng trâu bò sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí
Kiểm tra ñộ dài miễn dịch trong phòng thí nghiệm ñối với vacxin vô hoạt Tụ huyết trùng trâu bò, bằng cách gây miễn dịch cho thỏ. Mỗi lô vacxin tiêm cho 12 thỏ khoẻ mạnh, mỗi con có trọng lượng 1,5 - 2kg. Mỗi thỏ ñược tiêm vào dưới da 1/4 liều vacxin sử dụng cho trâu bò. ðịnh kỳ kiểm tra khả năng bảo hộ của vacxin ñối với thỏở các mốc thời gian 3, 6 và 9 tháng.
Cụ thể tiến hành như sau:
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………40
trùng trâu bò, lấy 4 thỏ thí nghiệm cùng với 2 thỏñối chứng không ñược tiêm vacxin, ñem thử thách bằng vi khuẩn cường ñộc P.multocida. Mỗi thỏ ñược tiêm 10MLD vào dưới da. Sau khi tiêm, theo dõi liên tục 10 ngày. 8 thỏ còn lại vẫn tiếp tục ñược nuôi dưỡng trong ñiều kiện của phòng thí nghiệm.
Sau 6 tháng tính từ khi thỏñược gây miễn dịch bằng vacxin, lại lấy tiếp 4 thỏ thí nghiệm cùng với 2 thỏ ñối chứng không ñược tiêm vacxin, tiếp tục thử
thách với vi khuẩn cường ñộc P.multocida. Liều lượng tiêm không ñổi (10MLD). 4 thỏ thí nghiệm còn lại chưa dùng ñến, tiếp tục nuôi dưỡng.
Sau 9 tháng, phương pháp tiến hành giống như lúc 3 và 6 tháng ñối với 4 thỏ thí nghiệm còn lại.
Từ kết quả kiểm tra hiệu lực tại các thời ñiểm công cường ñộc có thể ñánh giá ñược ñộ dài miễn dịch của vacxin ñối với ñộng vật thí nghiệm.