- Ria cấy: kiểm tra dung quang của khuẩn lạc THT
4.2.4 Kiểm tra vô trùng canh trùng sau khi vô hoạt bằng formol
Vi khuẩn giống là vi khuẩn tụ huyết trùng trâu bò cường ñộc nên kết thúc quá trình nhân giống và kiểm tra các chỉ tiêu ñạt yêu cầu, canh trùng giống bắt buộc phải ñược vô hoạt bằng formol. Theo quy ñịnh, formol sử dụng có nồng ñộ 36% và bổ sung với tỷ lệ là 0,2% vào trong nồi lên men 100 lít. Lúc này, ở trong nồi lên men không cần ñến sục khí nữa mà chỉ cần khuấy ñể quá trình vô hoạt canh trùng giống ñược triệt ñể. Sau 14 - 16 giờ tính từ khi cho formol, tiến hành lấy mẫu kiểm tra vô trùng. Mục ñích của kiểm tra vô trùng trong giai ñoạn này chính là ñánh giá sự bất hoạt của vi khuẩn tụ huyết trùng cường ñộc.
Tiến hành lấy mẫu kiểm tra theo Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 161 - 92. Mẫu kiểm tra trên các môi trường chia thành 2 bước:
Bước 1: cấy vào 2 lọ nước thịt dinh dưỡng 50ml, mỗi lọ 1ml canh trùng nuôi cấy. Bồi dưỡng ở 370C trong 72 giờ.
Bước 2: từ lọ nước thịt dinh dưỡng ñã kiểm tra ở bước 1, tiếp tục cấy vào các môi trường nuôi cấy cơ bản: 2 ống thạch máu, 2 ống thạch thường, 2 ống nước thịt, 2 ống nước thịt gan yếm khí và 2 ống thạch nấm. Theo dõi trong
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………53 ñiều kiện 370C/7 ngày. Riêng thạch nấm theo dõi ở nhiệt ñộ phòng. ðọc kết quả: nếu không có bất cứ vi khuẩn nào mọc trên môi trường kiểm tra thì lô vacxin ñược coi là vô trùng.
Kết quả kiểm tra vô trùng sau khi xử lý formol của 5 lô canh trùng tụ
huyết trùng trâu bò nghiên cứu ñược trình bày trong bảng 4.8.
Bảng 4.8: Kết quả kiểm tra vô trùng canh trùng sau khi vô hoạt bằng formol
Môi trường kiểm tra/kết quả vô trùng Lô vacxin Thạch máu Thạch thường Nước thịt ống Nước thịt gan yếm khí Nước thịt lọ (50ml) Thạch nấm TB 1 - - - - - - TB 2 - - - - - - TB 3 - - - - - - TB 4 - - - - - - TB 5 - - - - - - Ghi chú: ”-” = vô trùng
Như vậy, với tỷ lệ 0,2% formol dùng ñể vô hoạt canh trùng, cả 5 lô canh trùng ñều cho kết quả âm tính trên các môi trường nuôi cấy. Kết luận, vi trùng trong 5 lô canh trùng tụ huyết trùng ñã ñược vô hoạt hoàn toàn.