Phỏt hiện khỏng thể virus gõy suy giảm miễn dịch SIV trong huyết thanh khỉ bằng phương phỏp huỳnh quang:

Một phần của tài liệu Nhiên cứu sản xuất kháng thể bại liệt trên thỏ và đánh giá tính an toàn của vắc xin bại liệt trong phòng thí nghiệm (Trang 44 - 45)

khỉ bằng phương phỏp huỳnh quang:

Tiến hành:

- Cho 75àl dung dịch B vào giếng #1 của phiến 96 giếng, 25àl dung dịch B vào cỏc giếng #2 và #3.

- Thờm 25àl huyết thanh mẫu vào giếng #1, trộn bằng cỏch hỳt lờn xuống 5 – 6 lần. Chuyển 25àl từ giếng #1 - giếng #2. Trộn (giống mụ tả trộn ở giếng #1), chuyển 25àl từ giếng #2 - giếng #3, loại bỏ 25àl ở giếng #3 sau khi trộn.

- Nhỏ 25àl dung dịch D (sau khi ủó hồi chỉnh) vào tất cả cỏc giếng #2. Nhỏ

25àl dung dịch C (sau khi ủó hồi chỉnh) vào tất cả cỏc giếng #3.

- Vỗ nhẹ vào cỏc gúc phiến nhẹ nhàng 5 - 6 lần, ủ ở nhiệt ủộ phũng (15 - 300C) / 120 phỳt.

ðọc kết quả:

Quan sỏt hiện tượng ngưng kết bằng mắt thường, dựa vào cỏc tiờu chớ ủỏnh giỏ như bảng duới ủõy :

Bảng tiờu chớ ủỏnh giỏ và nhận ủịnh kết quả

Tiờu chuẩn xỏc ủịnh hiện tượng ngưng kết ðọc Kết luận Cỏc hạt lắng xuống ủỏy giếng, viền xung quanh lắng cặn

nhẵn, gọn (-) õm tớnh

Cỏc hạt tập trung xuống ủỏy giếng thành hỡnh vũng nhẫn,

phớa ngoài xung quanh vũng nhẫn nhẵn. (±)

Khụng xỏc

ủịnh Cỏc hạt tập trung xuống ủỏy giếng thành hỡnh vũng nhẫn

rộng, phớa ngoài xung quanh vũng nhẫn xự xỡ ủa hỡnh dạng. Cú hiện tượng ngưng kết ở ngoại vi vũng nhẫn.

(+) Cỏc hạt kết dớnh vững chắc phủ kớn ủỏy giếng một cỏch

ủồng nhất (++)

Nhận ủịnh kết quả:

+ Mẫu cho kết quả (-) với control particles ở nồng ủộ pha loóng cuối cựng 1:16, nhưng lại cho kết quả (+) với sensitized particles ở nồng ủộ pha loóng cuối cựng 1:32 hoặc hơn nữa, xỏc ủịnh mẫu ủú cú phản ứng (+) SIV.

+ Mẫu cho kết quả (+) với control particles, nhưng lại cho kết quả (-) với sensitized particles, xỏc ủịnh mẫu ủú khụng cú phản ứng SIV, kết quả (-)

3.4.2.2. Kim tra tế bào dựng trong sn xut văcxin

Một phần của tài liệu Nhiên cứu sản xuất kháng thể bại liệt trên thỏ và đánh giá tính an toàn của vắc xin bại liệt trong phòng thí nghiệm (Trang 44 - 45)