Phỏt hiện khỏng thể Polio trong huyết thanh khỉ:

Một phần của tài liệu Nhiên cứu sản xuất kháng thể bại liệt trên thỏ và đánh giá tính an toàn của vắc xin bại liệt trong phòng thí nghiệm (Trang 41 - 42)

- Bất hoạt huyết thanh khỉủó pha loóng 4 lần bằng NaCl 0,9% ở 560C / 30 phỳt bằng bểủiều nhiệt.

- Pha loóng bậc 10 virut Sabin chuẩn typ I, II và III (khỏng nguyờn typ I, II và III) ủểủược nồng ủộ sử dụng là 1000 CCID50/0,1ml

• Nhỏ khỏng nguyờn

- Nhỏ khỏng nguyờn týp I : 0,05 ml / giếng : A1 - A12 ; B1 - B12 và H1 - H3 - Nhỏ khỏng nguyờn týp II : 0,05 ml / giếng : C1 - C12 ; D1 - D12 và H4 - H6

- Nhỏ khỏng nguyờn týp III : 0,05 ml / giếng : E1 - E12 ; F1 - F12 và H7 - H9

• Nhỏ huyết thanh khỉ (1 phiến nhỏủược 12 mẫu) - Nhỏ 0,05 ml / giếng ì 7 giếng / 1 mẫu

- Nhỏ dọc theo cột : 1A - 1G (mẫu 1) ; 2A - 2G (mẫu 2) ...

• Nhỏ mụi trường MEM 2% FBS

- Nhỏ mụi trường : 0,05 ml / giếng : G1 - G12 và H1 - H9 - Nhỏ mụi trường : 0,1 ml / giếng : H10 - H12 - Ủ 370C / 3 giờ • Nhỏ tế bào - Sử dụng hỗn dịch tế bào 100.000 tế bào / 1 ml - Nhỏ 0,1ml hỗn dịch tế bào trờn cho tất cả cỏc giếng. - Ủở 360C / 7 ngày ðọc và nhận ủịnh kết quả:

- Mu dương tớnh týp I : (cú khỏng huyết thanh bại liệt týp I) + Tại cỏc giếng hàng A và B (nhỏ khỏng nguyờn týp I)

+ Cú 2 giếng trờn tổng số 2 giếng gõy nhiễm týp tế bào vẫn phỏt triển bỡnh thường. - Mu dương tớnh týp II : (cú khỏng huyết thanh bại liệt týp II)

+ Tại cỏc giếng hàng C và D (nhỏ khỏng nguyờn týp II)

+ Cú 2 giếng trờn tổng số 2 giếng gõy nhiễm týp tế bào vẫn phỏt triển bỡnh thường. - Mu dương tớnh týp III : (cú khỏng huyết thanh bại liệt týp III)

+ Tại cỏc giếng hàng E và F (nhỏ khỏng nguyờn týp III)

+ Cú 2 giếng trờn tổng số 2 giếng gõy nhiễm týp tế bào vẫn phỏt triển bỡnh thường.

Một phần của tài liệu Nhiên cứu sản xuất kháng thể bại liệt trên thỏ và đánh giá tính an toàn của vắc xin bại liệt trong phòng thí nghiệm (Trang 41 - 42)