c) Phương pháp 3.
7.2.4.4. Sản xuất vaccine tái tổ hợp (Recombinant Vaccines).
Vaccine tái tổ hợp gene hay còn gọi là vaccine dưới đơn vị, đây là loại vaccine thế hệ mới được tạo ra nhờ kỹ thuật di truyền. Vaccine tái tổ hợp gene được sản xuất dựa trên nguyên tắc chuyển gene kháng nguyên của đối tượng gây bệnh vào một vi sinh vật nào đó. Vi sinh vật này sinh sôi nẩy nở nhanh chóng và sản xuất ra các phân tử kháng nguyên. Tách chiết , tinh sạch các kháng nguyên làm vaccine dưới đơn vị.
Quy trình sản xuất vaccine tái tổ hợp gene nhìn chung phức tạp, nhưng nguyên tắc chung đều trải qua các bước sau đây:
- Tuyển chọn nguồn gene có biểu hiện kháng nguyên chính của virus (kháng nguyên bề mặt hoặc kháng nguyên lõi), thao tác cắt gene.
- Chọn vector thích hợp (plasmide), cắt plasmide và gắn gene kháng nguyên vào để tạo vector tái tổ hợp.
- Chọn vật chủ thích hợp để đưa vector vào. Vật chủ có nhiều loại như vi khuẩn, nấm men, virus (chẳng hạn E. coli, S. cerevisae, adenovirus, virus đậu,
baculovirus v.v...).
- Nuôi cấy, lên men.
+ Nếu vi khuẩn, nấm men thì nuôi cấy trong môi trường để nhân lên lượng lớn kháng nguyên.
+ Nếu là virus thì phải nhân lên trong tế bào động vật hay thực vật thích hợp. - Tách chiết và làm sạch các protein kháng nguyên bằng phương pháp hoá sinh thông thường.
- Tạo vaccine phân tử dạng chủng, dạng tiêm.
- Tiến hành thử hiệu lực trên động vật và trên lâm sàng.
Hiệu lực của vaccine phụ thuộc vào nhiều yếu tố. Bên cạnh bản chất kháng nguyên mạnh, yếu thì con đường đưa vaccine vào cơ thể cũng rất quan trọng: da hay niêm mạc, tiêm hay chủng, thời gian sử dụng vaccine, lần số tiêm chủng và khoảng cách giữa các lần, liều lượng dùng, tuổi dùng và theo dõi độ dài miễn dịch. Nếu là
miễn dịch dịch thể thử vaccine bằng phản ứng trung hoà kháng nguyên kháng thể, ELISA, miễn dịch huỳnh quang, miễn dịch phóng xạ. Nếu là miễn dich tế bào thì phát hiện đo lường các tế bào T, B và phát hiện các yếu tố T và B.