- Các chất điều khiển sinh trưởng.
b) Một số đặc điểm cần chú ý khi sản xuất hormon và các loại protein bằng DNA tái tổ hợp trên tế bào động vật.
bằng DNA tái tổ hợp trên tế bào động vật.
Việc sản xuất protein nói chung và hormon nói riêng trong tế bào động vật có một số ưu điểm hơn so với hệ thống tế bào vi khuẩn hay nấm men. Các tế bào động vật có hệ thống cải biến sau dịch mã như: glycosyl hoá, phosphoryl hoá, amin hoá và sự cắt bỏ từ các preprotein, tập hợp các tiểu đơn vị v.v...Hơn nữa, môi trường khử của vi khuẩn E.coli không dẫn đến hình thành cầu disulfua mà chỉ tìm thấy ở tế bào động vật. Sự thiếu những biến đổi thích hợp là ảnh hưởng sâu sắc đến cấu hình và tính hoà tan của protein. Trong nhiều biến đổi ở một số trường hợp biểu hiện ở
E.coli tích tụ những dạng không hoà tan và mất hoạt tính sinh học (cũng có một số trường hợp sự biến đổi chỉ xẩy ra ở hoạt tính sinh học), chúng có thể làm ảnh hưởng ít nhiều đến bản chất kháng nguyên và lý tính của protein. Trong khi đó một số protein, những biến đổi thứ cấp chính xác thì đòi hỏi một cách tuyệt đối cho chức phận của phân tử.Tóm lại, sự gấp khúc protein, sự tập hợp các tiểu đơn vị và sự bài tiết chúng là những lý do cộng thêm để chúng ta hiểu tại sao phải bắt buộc dùng những tế bào động vật trong sản xuất các hormon và những protein có hoạt tính sinh học.
Một vector tế bào động vật điển hình gồm có ba thành phần chính:
- Thành phần 1: Sự giải mã trình tự DNA của vi khuẩn cho phép truyền bá và sản xuất DNA vector trong vi khuẩn trước khi gây nhiễm vào tế bào động vật.
- Thành phần 2: Vùng vector tế bào động vật chứa những đoạn trình tự, mà những đoạn đó cho phép lựa chọn những tế bào được gây nhiễm dậy lên thường xuyên tư 103-106 . Thêm vào đó, vùng này có thể chứa những đoạn trình tự được đòi hỏi để duy trì và phóng đại một lượng lớn số bản copy của vector.
- Thành phần 3: Vùng thứ ba gồm những đoạn trình tự mã hoá hormon hay protein cần sản xuất cùng với những đoạn điều hoà (promotor), tín hiệu thêm như poly A, introns v.v...
Nhiều vector dùng trong tế bào động vật đòi hỏi để duy trì và phóng đại được mang đến từ các nguồn virus động vật loại DNA như SV 40, polyoma, papiloma bovin (PBV) và Epstein-Barr. Tất cả chúng đều có bản chất làm biến tính di truyền. Thường những đoạn trình tự làm điều hoà gene mong muốn cũng được dẫn ra từ các virus. Song vấn đề đó cũng có thể tập hợp các vector không có yếu tố virus, bởi vì bao gồm những yếu tố kiểm tra tế bào như hệ thống phóng đại được dựa trên emzyme reductase dihydrofolate và các hệ thống khác. Tất cả các vector tế bào động vật được thiêt kế đến nay đều dùng những dòng tế bào xác định làm vật chủ.