Thí nghiệm 1: Lựa chọn chủng vi khuẩn thích hợp cho việc chuyển gen vào Wolffia globosa nguyên cây.
CTTN 1 2 3 4 5 6
Chủng VK ðC (*) GV3101 LBA4404 C58 EHA105 AGL-1
Thí nghiệm 2: ðánh giá ảnh hưởng của mật ñộ vi khuẩn (OD600nm) lên tỷ lệ
biểu hiện của gen gus ở bèo tấm Wolffia globosa chuyển gen.
CTTN 1 2 3 4 5 6 7
OD ðC (*) 0,3 0,5 0,7 1,0 1,3 1,5
Thí nghiệm 3: ðánh giá ảnh hưởng của phương thức lây nhiễm ñến tỷ lệ biểu hiện của gen gus ở bèo tấm Wolffia globosa chuyển gen.
CTTN Phương thức lây nhiễm
1 Lây nhiễm trong ñiều kiện bình thường (dùng máy votex)
2 Lây nhiễm bằng máy ly tâm thường
Thí nghiệm 4: ðánh giá ảnh hưởng của thời gian lây nhiễm ñến tỷ lệ biểu hiện của gen gus ở bèo tấm Wolffia globosa chuyển gen.
CTTN 1 2 3 4 5 6
Thời gian (phút) ðC (*) 5 10 15 20 25
Thí nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hưởng của hàm lượng Acetosyringone (AS) lên tỷ lệ biểu hiện của gen gus ở bèo tấm Wolffia globosa chuyển gen.
CTTN 1 2 3 4 5 6
Nồng ñộ (mg/l) 0 (ðC) 100 150 200 250 300
Thí nghiệm 6: Xác ñịnh môi trường ñồng nuôi cấy bèo tấm – vi khuẩn thích hợp.
* SH ñặc: Nền khoáng SH + 10g/l sucrose + 8g/l Agar, pH=5,8 * SH lỏng: Nền khoáng SH + 10g/l sucrose, pH=5,8
Thí nghiệm 7: ðánh giá ảnh hưởng của thời gian ñồng nuôi cấy lên tỷ lệ biểu hiện của gen gus ở bèo tấm Wolffia globosa chuyển gen.
CTTN 1 2 3 4 5 6
b) Nghiên cứu xác ñịnh nồng ñộ chất kháng sinh (cefotaxim, timentin) thích hợp ñể loại bỏ vi khuẩn A. tumefaciens sau biến nạp