III. Tài liệu tham khảo
TÓM LƯỢC VỀ RNA CAN THIỆP(RNAi) VÀ MỘT SỐ ỨNG DỤNG
VÀ MỘT SỐ ỨNG DỤNG
Kỹ thuật can thiệp RNA (RNAi) không chỉ trở thành một công cụ hữu hiệu cho ngành genomivà cs nói riêng mà còn cho phép tạo ra những loại thuốc chữa trị vừa nhanh vừa hiệu quả và dễ dàng thử nghiệm trên tế bào. Trong tương lai có thể RNAi sẽ trở thành một liệu pháp chữa trị thường xuyên, đặc biệt là ung thư. Chọn lựa gen im lặng bởi RNAi có thể đạt được bởi 2 phương pháp nucleic acid based:
1. Đưa vào tế bào chất một chuỗi ngắn RNA can thiệp (siRNA), lúc này tác động bất hoạt gen chỉ mang tính tạm thời trong tự nhiên và có thể không thích hợp với tất cả các ứng dụng.
2. Đưa vào nhân một đoạn gen mà biểu hiện cấu trúc kẹp tóc RNA (shRNA) được tạo ra như một sự can thiệp RNA nội sinh và dẫn đến sự điều hòa nghịch một cách vững chắc di truyền qua nhiều thế hệ tế bào.
Cả 2 quá trình đều liên quan đến việc sử dụng acid nucleic, vấn đề ở đây là vật mang nó phải đặc hiệu cao và không đi qua màng tế bào bằng cách khuếch tán tự do. Vì thế, những liệu pháp dùng RNAi in vivo phải sử dụng kỹ thuật mà có thể đưa RNAi vượt qua rào cản lớn nhất đó là màng tế bào. Virus và vector đáp ứng được những điều kiện này và có thể trở thành một hệ thống vật mang chính cho shRNA. Bài báo này tóm tắt về RNAi và so sánh những phương pháp hiện đang sử dụng, cho ví dụ và ứng dụngin vivo, và nêu ra khuynh hướng của sự phát triển mới như là sao chép virus cho shRNA hướng đến chữa trị ung thư.
Một số thuật ngữ :
- RNAi : RNA inteference (RNA can thiệp)
- dsDNA : double strand DNA (mạch kép dài) là những đoạn RNA dài mạch kép có trình tự bổ sung với gene đích (target RNA) có 2 đầu chênh lệch là 3’OH.
- miRNA : micro RNA (tiểu RNA)
- RISC : RNA – Incluced Silencing Complex (phức hệ tắt gene tích ứng bởi RNA). Phức hệ này có chứa enzyme helicase và một số protein. Trong đó quan trọng nhất là protein thuộc họ Agronaut (liên kết RNA) hoạt động như một endonuclease và cắt mRNA.
- Dicer : RNase III (Một loại enzyme endonuclease) chịu trách nhiệm hoàn thiện sợi dsRNA.
- siRNA : small interfeing RNA (RNA can thiệp kích thước nhỏ) được tạo ra từ dsRNA