III. Tài liệu tham khảo
CHUYỂNGEN VÀOTẾ BÀO SOMA CÁC VẤN ĐỀ VỀ TIM MẠCH
CÁC VẤN ĐỀ VỀ TIM MẠCH
Đây là phương pháp kết hợp giữa sinh lý học và sinh học phân tử, nó được gọi chung lại với tên là sinh lý học phân tử. Việc dùng chuyển gene trongin vivocó thể phá vỡ vấn đề áp đặt bởi sự thiếu hụt của một enzyme block có tác dụng dược lý đặc biệt, enzyme tổng hợp nitric oxide nội mô. Có rất nhiều lý luận chống lại và ủng hộ việc dùng adenoviral làm vector. Trong bài báo này tác giả đã kết luận rằng việc dùng adenoviruses trong thao tác gene đã mở ra một con đường mới trong việc nghiên cứu cơ chế sinh lý học của nơron bằng những phương pháp hiện đại.
1.1. Chuyển gene là một công cụ nghiên cứu mới của ngành sinh lý học
Cuối thế kỉ trước chúng ta chứng kiến 1 tiếng nổ lớn được tạo ra bởi các thành tựu rực rỡ của ngành sinh học phân tử, mở ra khả năng hứa hẹn đưa các gene vào trong tế bào của động vật trưởng thành.
Tại phòng nghiên cứu của chúng tôi tập trung vào cơ chế trung tâm kiểm soát tim mạch và sinh lý đặc biệt và dược học của nhân tế bào tế bào bó đơn lẻ (NTS). Các NTS nằm ở dorso- vùng trung gian của tủy não và đóng một vai trò quan trọng trong việc kiểm soát phản xạ của nội cân bằng tự điều khiển.
Nó không phải chỉ là 1 hạt nhân “relay” đơn giản, đúng hơn nó thực hiện một sự kết hợp của phức hợp các thông tin từ nhiều đầu tiếp hợp ở cả gốc ngoại biên và trung ương.
Phản xạ là quá trình quan trọng, chẳng hạn như bắt nguồn từ receptor cảm áp, hóa thụ thể ngoại vi, cũng như phản xạ đường tiêu hóa mà điều tiết nhu động và tất cả phụ thuộc vào chức năng kết hợp của NTS.
Nghiên cứu này đã giải quyết vấn đề khó khăn bằng cách sử dụng virus làm vector chuyển gen. Bài báo này là một tổng quan ngắn của kỹ thuật này và sự hữu ích của nó đối với sinh lý học kết hợp.
1.2. Tại sao lại sử dụng các vector virus?
Động vật gặm nhấm là lòai thích hợp nhất để làm mô hình thử nghiệm trong sinh lý học kết hợp.Một cách được tạo ra để thao tác các biểu hiện gene là transgenesis (chuyển gene).Phương pháp tiếp cận này được sử dụng rộng rãi ở trên chuột, nhưng chúng cũng có thể được sử dụng trên con bọ. Một số yếu tố giới hạn của phương pháp này: thứ nhất- tương đối chậm- đặc biệt là ở chuột và tốn kém. Thứ hai, tất cả các tế bào trong động vật biến đổi gene sẽ mang gene chuyển và do đó sẽ khó để hạn chế hoạt động của nó. Và trường hợp này gene chuyển sẽ được đặt dưới sự kiểm soát của promoter của 1 mô đặc biệt. Ví dụ, trong 1 mô hình bọ biến đổi gene chống bệnh dại với RNA chống lại mRNA angiotensinogen được biểu hiện cụ thể trong tế bào hình sao của não bằng cách sử dụng 1 promoter cụ thể- những sợi protein thần kinh đệm có tính acid (Schinke và cs, 1999). Tuy nhiên điều đó khó
có 1 vài promoter đặc biệt đã được tìm ra. Một vấn đề vốn có để chuyển gene là nó có thể dẫn đến một kết quả không thể dự đoán được do sự thay đổi xảy ra trong quá trình phát triển, do sự can thiệp về mặt di truyền.
Một phương pháp hiệu quả và hiệu quả cho việc chọn lựa gene biểu hiện và giới hạn khu vực của não bộ ở động vật trưởng thành sẽ là một công cụ nghiên cứu xuất sắc.Tuy nhiên, chuyển gene vào trong não nguyên vẹn của cơ thể là một nhiệm vụ thách thức. Trong khi chuyển dòng tế bào, bao gồm cả gốc thần kinh, tương đối ít sử dụng phosphate canxi hoặc có thuốc thử chuyển đặc biệt , và những neurone trưởng thành ở trong não có thể chịu được các phương pháp chuyển này hoặc sẽ trở nên hư hỏng. Đây là 2 lý do tại sao vector virus lại được dùng, có thể mang lại hiệu quả đưa gene vào trong tế bào não. Một số loại vector virus được sử dụng và có 1 số loại đang được thảo luận.Chúng tôi đã chọn adenovirus để chuyển gene vào cơ thể và phần còn lại của bài báo này sẽ minh hoạ một số thí nghiêm, liên quan đến các thí nghiệm sinh lý học.