5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
2.4.4.1. Coliform phân và coliform tổng số
( Multiple tube tests ) TCVN 6187-2 phần 2.
Nguyên tắc: Cấy các phần mẫu thử được pha lỗng hoặc khơng được pha lỗng vào
một dãy ống nghiệm chứa một mơi trường nuơi cấy chọn lọc dạng lỏng cĩ lactozơ. - Xác định coliform tổng số: Dựa trên cơ sở lên men đường lactoza và sinh hơi ở 35-370C trong mơi trường BGBL (Briliant Green Lactose Bile Salt) trong khoảng thời gian 48h để phát hiện coliform tổng số.
- Xác định coliform phân(coliform chịu nhiệt): Các mẫu được cấy vào mơi trường EC (Escherichia coli) lỏng cĩ khả năng lên men lactose sinh hơi trong khoảng thời gian 24h sau khi ủ ở 440C.
Bằng các bảng thống kê, tính tốn số xác suất cao nhất của các dạng coliform, coliform chịu nhiệt và Ẹ coli giả định cĩ thể cĩ mặt trong 100ml mẫu thử, từ các ống thử cho kết quả xác nhận dương tính.
Đối với mẫu nước mặt tại xã Ea Bar, chúng tơi ghi nhận nguồn nước bị ơ nhiễm vi sinh vật cao nên chúng tơi pha lỗng đến nồng độ 10-5 sau khi làm thí nghiệm thử. Cuối cùng chúng tơi chọn 3 nồng độ pha lỗng là 10-3, 10-4, 10-5 để tiến hành đánh giá các mẫu thí nghiệm. Vì vậy, kết quả sau khi phân tích 2 chỉ tiêu
coliform phân và coliform tổng số được tra bảng MPN và nhân với 1000 (10-3). Chuẩn bị mơi trường và dụng cụ; Phương pháp phân tích được trình bày trong phụ lục 5.7
2.4.4.2. Clostridium perfringens
Clostridium perfringens là trực khuẩn kỵ khí, gram dương, hình que, kỵ khí, sinh bào tử, bào tử của các chủng Clostridium perfringens cĩ mặt ở khắp mọi nơi trong thiên nhiên và dễ nhiễm vào thực phẩm, cĩ thể thủy giải saccharide và prơtêin trong các hoạt động thu năng lượng.
Clostridium perfringens cĩ nhiệt độ sống tối ưu ở nhiệt độ 37-450C, mật độ được xác định bằng cách nuơi cấy trong mơi trường đặc hiệu cĩ chứa Ferri amonium citrate và disodium sulphite như mơi trường yếm khí Wilson’s Blair cải tiến, Tryptose Sulfide Cycloserin (TSC) ….
Nguyên lý: Trong mơi trường TSC Clostridium perfringens lên men glucogens sẽ biến sulfua tạo ra khí H2S, với phèn sắt được cho thêm vào mơi trường sẽ tạo ra sulfua sắt làm khuẩn lạc cĩ màu đen.
2.4.4.3. Salmonella: Theo phương pháp màng lọc.
Salmonella là trực trùng gram âm, kích thước khoảng 0,6x2µm, hiếu khí, cĩ khả năng di động, khơng tạo bào tử, khơng sinh indol hoặc acetoin, khơng lên mem sucrose, lactose, khơng phân giải ureạ
Chuẩn bị mơi trường và dụng cụ; Phương pháp phân tích được trình bày trong phụ lục 5.7