III. TỔ CHỨC THựC TẬP ĐÁNH GIÁ
1. CHUẨN BỊ PHƯƠNG TIỆN D ụ n g c ụ : G iá nhuộm
Lam k ín h Que cấy B ình rử a 1.2. H ó a c h ấ t + Dung dịch cố d ịn h carnoy gồm: - Acid acetic 10 ml. - Clorofor 30 ml. - Cồn tu y ệ t dối 60 ml.
+ Thuốc nhuộm : tuỳ th eo kỹ th u ậ t chu ẩn bị. Thuốc nhuộm : - G ram
- G iem sa
- X anh coton acid.
1.3. B ệ n h p h ẩ m
Ghi sô th ứ tự phù hợp với p h iếu x é t nghiệm . 2. QUY TRÌNH KỸ THUẬT
2.1. K ỹ t h u ậ t n h u ộ m G ram - e o s in
2.1.1. D àn tiê u b ả n nấm . 2.1.2. L àm khô ở n h iệ t độ 37°.
2.1.3. Cố địn h tiêu b ả n b ằ n g dung dịch carnoy tro n g 5 phút. 2.1.4. P hủ dung dịch tím g e n tia n có acid fenic 1% tro n g 1 phút. 2.1.5. Rửa nước.
2.1.6. P hủ dung dịch lugol k ép tro n g 30 giây. 2.1.7. Rửa nước.
2.1.8. Phủ dung dịch eosin 1% tro n g v ài giây. 2.1.9. Rửa nước, để khô.
2.1.10. Soi k ín h h iể n vi.
Với kỹ th u ậ t n ày các sợi n ấ m và bào tử n ấ m b ắ t m ầu G ram dương.
2.2. Kỹ th u ậ t n h u ộ m g ie m s a
2.2.1. D àn tiêu bản.
2.2.2. L àm khô tiê u b ả n â n h iệ t độ 37°.
2.2.3. Cố địn h tiêu b ả n b ằ n g dung dịch carnoy tro n g 5 ph ú t.
2.2.4. P h a loãng dung dịch giem sa theo tỷ lệ 1 g iọ t g iem sa đ ậ m đặc tro n g lm l nước tru n g tín h .
2.2.5. Phủ dung dịch giem sa p h a loãng tro n g 5 ph ú t. 2.2.6. Rửa tiêu b ả n b ằn g nước sạch.
2.2.7. L àm k iệ t nước b ằn g cồn tu y ệ t đối và xylol. 2.2.8. Để khô.
2.2.9. Soi k ín h h iể n vi.
2.3. K ỹ th u ậ t n h u ộ m x a n h c o t o n a c id
2.3.1. D àn tiê u b ản.
2.3.2. L àm khô tiêu b ả n ở n h iệ t độ 37°.
2.3.3. Cố địn h tiêu b ả n b àn g cồn 90° hoặc dung dịch carnoy tro n g 5 p h ú t. 2.3.4. Phủ dung dịch x an h coton acid tro n g 5 ph ú t.
2.3.5. Rửa tiêu b ả n b ằ n g nước thường. 2.3.6. Khử nước b ằn g cồn tu y ệ t đối và xylol. 2.3.7. Để khô.
2.3.8. Soi k ín h h iể n vi.
Với kỹ th u ậ t n à y sợi n ấ m và bào tử n ấ m có m àu x a n h , c h iế t quang.