2) Tổ chức sưu tầ m muỗi tr ê n từ ng vị tr í cụ th ể. 3) Sưu tầ m bọ gậy. 4) Đ án h giá tr ê n k ế t quả cụ th ẹ. KỸ THUẬT MỔ MUỖI I. MỤC TIÊU HỌC TẬP
Sau k h i học xong b ài n ày, a n h (chị) có k h ả năng: 1) C huẩn bị được dụng cụ, h óa c h ấ t để làm x é t nghiệm . 2) Đ ịnh loại sơ bộ (A nophelinae, Culicinae...).
3) Đ ịnh hệ Sella.
4) Mổ tá c h dược tu y ến nước bọt, buồng trứ n g và dạ d ày của muỗi th eo quy trìn h .
5) Quan s á t được đặc điểm của tu y ến nước bọt, sự p h á t triể n của trứ n g và dạ dày của muỗi.
II. NỘI DUNG
Mổ muỗi n h ằ m m ục dích tìm ký sin h v ậ t số t r é t ở giai đoạn trứ n g (oocyste) ở th à n h dạ dày của muỗi, tìm ký sin h v ậ t số t r é t ở giai đoạn th o a trù n g ở tu y ến nước bọt và tìm chỉ số tuổi sin h lý của muỗi qua các sẹo ỏ d ây d ẫ n trứ n g , m uỗi để mổ p h ải là muỗi A nopheles cái vì chỉ có con cái m ới h ú t m áu, tru y ề n b ện h .
1. CHUẨN Bị PHƯƠNG TIỆN
1.1. D ụ n g cụ
+ Kim côn trù n g : dùng kim b ằ n g th u ỷ tin h hoặc kim k h â u được nôi với m ộ t que tre. + Lam kính. + La men. + Bông thấm . + K ính lúp 2 m ắt. 215
1.2. H ó a ch ấ t:
+ E th e r gây mê muỗi. + Cồn etylic 70°. + Nước muối sin h lý. 2. QUY TRÌNH KỸ THUẬT
2.1. Đ ịnh loại sơ bộ
2.2. K iểm tra lạ i hệ Sella. N hớ lạ i cách p h â n ch ia h ệ S e lla chọn m uỗi có hệ
S ella I V đ ến S ella V II có th ể m ổ được. Nếu m uỗi có hệ S e lla II, I I I thì nuôi tiếp
đ ến khi mổ được.
2.3. Gây m ê m uỗi bằng m ộ t m ẩ u bông tẩ m ether. 2.4. Loại bỏ h ế t chân cánh.
2.5. N hỏ lên lam k ín h 3 g iọ t nước m u ố i sin h lý, g iọ t ở g iữ a to 2 g iọ t b ên nhỏ han.
2.6. D ùng k im côn tru n g n h ú n g n h a n h m u ỗ i vào cồn 70°, cho n h a n h v ào g iọ t nước muối sin h lý ở giữa lam .
2.7. S ử a tư thế, đ ể đ ầ u m u ỗ i quay về p h ía tay trá i người mổ, lư ng q u a y về p h ía người mổ.
2.8. M ổ tách tuyến nước bọt:
+ C ắm kim b ê n ta y p h ả i vào cơ ngực m uỗi, giữ cố địn h . + Kim b ê n ta y tr á i cắm vào đầu muỗi.
+ Kéo từ từ dầu m uỗi sa n g g iọt nước b ê n ta y tr á i.
(Nếu đầu m uỗi bị đứt, ấ n n h ẹ ngực m uỗi, tu y ến nước b ọ t sẽ được bộc lộ, kéo n h ẹ n h à n g tu y ến nước b ọ t ra kh ỏ i ngực muỗi).
2.9. M ổ tách buồng trứng:
+ C huyển kim b ê n p h ả i ở cơ ngực m uỗi san g ta y t r á i giữ cố địn h . + Tay p h ả i cắm kim vào đ ố t cuối của b ụ n g m uỗi, xé rá c h đ ố t b ụ n g cuối.
2.10. M ổ tách d ạ dày:
+ D ùng kim côn trù n g xé rá c h p h ầ n cơ ngực của muỗi. + Tách dạ d ày ra kh ỏ i các ống M alpighi.
3. QUAN SÁT TRÊN KÍNH HIEN VI
3.1. Q u a n s á t t u y ế n n ư ớ c b ọ t. N ếu có th o a trù n g , th o a trù n g có h ìn h lá nhỏ. Trường hợp cần th iế t làm tiê u b ả n tu y ến nước bọt đem nhuộm giem sa sẽ th ấ y th o a trù n g n h â n b ắ t m àu đỏ, nguyên sin h c h ấ t m àu xanh.
3.2. Q u a n s á t b u ồ n g tr ứ n g
+ Quan s á t sự p h á t tr iể n của trứ ng.
+ Quan s á t sẹo ở dây d ẫ n trứ n g để tín h tuổi sinh lý của muỗi.
Mỗi sẹo là m ộ t tuổi sin h lý.
Xé rá c h buồng trứ n g , quan s á t từ n g d ây đ ẫ n trứng.
3.3. Q u a n s á t d ạ d à y c ủ a m u ỗ i
+ D ùng kim côn trù n g tá c h d ạ d ày ra khỏi các ống M alpighi.
+ Đậy lá k ín h lên dạ dày. + D ùng kim côn trù n g day n h ẹ.
+ N ếu có oocyste: X uất h iệ n các h ạ t trò n , tr á n g tr ê n th à n h dạ d ày của muỗi.