men nhiều ống [7]
Coliform bateria là vi khuẩn dạng coli bao gồm các vi khuẩn gram âm, không tạo bào tử hình que. Chúng có khả năng thu nhận năng l−ợng nhờ trao đổi chất hiếu khí hoặc lên men đ−ờng lactoza tạo ra khí trong vòng 48 h ở 350C. Đây là nhóm sinh vật chỉ thị ô nhiễm môi tr−ờng, sự xuất hiện của các loài vi khuẩn này phản ánh sự ô nhiễm nói chung, không chỉ ô nhiễm do vi khuẩn. Số l−ợng của chúng càng nhiều thì mức độ ô nhiễm càng cao.
Chỉ số coliform tổng số là số l−ợng vi khuẩn coliform có trong một đơn vị thể tích hoặc một đơn vị khối l−ợng. Đây là một trong những chỉ số quan trọng để đánh giá độ ô nhiễm môi tr−ờng. Coliform tổng là chỉ số đánh giá mức độ nguy hiểm của môi tr−ờng bởi nhiều loài vi khuẩn trong nhóm này là sinh vật gây bệnh và truyền bệnh. Đối với n−ớc sinh hoạt và n−ớc uống, chỉ số này đ−ợc kiểm soát nghiêm ngặt.
Để xác định chỉ số này có nhiều ph−ơng pháp khác nhau. Trong đó kỹ thuật lên men nhiều ống đã đ−ợc sử dụng với nguyên lý chung là mẫu đ−ợc nuôi trong môi tr−ờng dinh d−ỡng đặc thù, ở nhiệt độ thích hợp và số l−ợng vi khuẩn đ−ợc đếm sau một thời gian nhất định.
Trong kỹ thuật lên men nhiều ống, chỉ số coliform đ−ợc tính theo MPN (most probable number) / Đơn vị thể tích. Coliform đ−ợc xác định bằng một loạt các phép thử: phép thử sơ bộ, phép thử khẳng định và phép thử hoàn thiện.
Nguyễn Kim Thanh ITIMS 2008 -2010 64 Phép thử sơ bộ sử dụng 3 dãy ống nghiệm, mỗi ống chứa nồng độ n−ớc thải và lactose khác nhau. Một dãy gồm 5 ống nghiệm trong chứa các ống Durham đặt ng−ợc để thu khí sinh ra trong quá trình lên men. Ba dãy nói trên lần l−ợt đ−ợc cấy 10, 1 và 0,1 ml mẫu n−ớc. Sau khi giữ 24 giờ, các ống đ−ợc đánh giá theo sự sinh khí. Kết quả d−ơng tính về sự sinh khí sẽ là bằng chứng sơ bộ về sự có mặt của các coliform.
Hình 3.12 . Hình ảnh của E.Coli
Số ống d−ơng tính sẽ đ−ợc đếm và đ−ợc dùng để tính số l−ợng th−ờng gặp của coliform dựa trên một bẳng thống kê. Phép thử khẳng định đ−ợc tiến hành bằng cách cấy mẫu d−ơng tính vào một ống nghiệm khác. Phép thử đ−ợc hoàn thiện nhờ phân lập các loài coliform trên các môi tr−ờng chọn lọc và phân hóa, nhuộm Gram và khẳng định lại việc sinh khí.
Nguyễn Kim Thanh ITIMS 2008 -2010 65 Bảng thống kê dựa theo lý thuyết pha loãng và thống kê để tiến hành tính toán. Đây là một chỉ số gần đúng chứ không phải chính xác l−ợng sinh vật có trong mẫu.
Kết quả phân tích coliform tại viện sinh thái môi tr−ờng Viện khoa học công nghệ Việt Nam
Nguyễn Kim Thanh ITIMS 2008 -2010 66
Ch−ơng IV: Kết quả vμ thảo luận