Các phương pháp chẩn đoán vi khuẩn hại cây trồng 1 Phương pháp chẩn đoán nhanh ngoài đồng

Một phần của tài liệu BÀI GIẢNG BỆNH CÂY ĐẠI CƯƠNG TS. VÕ THỊ THU OANH ĐHNLTPHCM (Trang 27 - 29)

1. Phương pháp chẩn đoán nhanh ngoài đồng

- Bước 1: cắt xéo vị trí bệnh, cho vào ly nước;

- Bước 2: đánh giá có dịch trắng đục chảy ra từ vết bệnh là vi khuẩn. - Dựa trên màu sắc khuẩn lạc:

+ Màu trắng: Xanthomonas;

+ Màu trắng đục, vàng nhạt: Erwinia;

+ Màu trắng đục: Pseudomonas;

Nguyễn Minh Thắng – 13145174 – DH13BVA Page 28

2. Nhận biết vi khuẩn trong dung dịch KOH 3%

- Bước 1: dùng đầu kim nhọn lấy 1 ít vi khuẩn đặt trên lame; - Bước 2: nhỏ 1 giọt KOH 3% lên vi khuẩn;

- Bước 3: dùng đầu kim nhọn trang đều KOH 3% và vi khuẩn;

- Bước 4: dùng đầu kim nhọn nhắc lên, quan sát độ nhầy và sợi của mẫu; - Bước 5: kết luận vi khuẩn Gram (-):

+ Nhầy;

+ Kéo thành sợi.

3. Phương pháp nhuộm Gram

- Bước 1: làm một phết bệnh phẩm vi khuẩn trên một miếng lame sạch. Để khô tự nhiên và làm cố định bằng cách hơ nóng qua ngọn lửa đèn cồn;

- Bước 2: nhỏ vài giọt (1 – 2 giọt) Crystal Violet cho phủ đều trên bề mặt phết bệnh và để yên trên 1 phút;;

- Bước 3: rửa nhanh bằng nước cất;

- Bước 4: nhỏ vài giọt (1 – 2 giọt) Lugol cho phủ đều trên bề mặt phết nhuộm và để yên trong 1 phút;

- Bước 5: rửa nhanh bằng nước cất;

- Bước 6: tẩy màu bằng cách nghiên lame và nhỏ từ từ alcohol lên phết nhuộm, khi giọt alcohol rời khỏi lame không có màu tím thì ngừng lại;

- Bước 7: rửa nhanh bằng nước cất;

- Bước 8: nhỏ vài giọt (1 – 2 giọt) Safranine cho phủ đều trên bề mặt phết nhuộm và để yên trong 1 phút;

- Bước 9: rửa nhanh bằng nước;

- Bước 10: thấm nhanh phết nhuộm giữa 2 lớp giấy và nhỏ 1 giọt dầu xem kính, quan sát dưới kính hiển vi ở vật kính x100.

- Nhận xét kết quả:

+ Vi khuẩn Gram (+) bắt màu tím; + Vi khuẩn Gram (-) bắt màu hồng; + Kết quả nhuộm Gram bao gồm:

Tính chất Gram (+) và Gram (-) Hình dạng vi khuẩn

Nội dung được lấy từ Bài gi

Nguyễn Minh Thắng – 13145174 - Lưu ý khi nhuộm Gram:

+ Vi khuẩn Gram (+) có thể bắt màu h 24h.

+ Dung dịch Lugol không đạt, tẩ + Vi khuẩn Gram (-) có thể bắt mà alcohol tầy màu bị pha loãng. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

+ Sau khi phủ Crystal Violet, không r nhuộm thì màu Gram thừa sẽ bị t

B. VIRUS I. Giới thiệu I. Giới thiệu

- Hiện có khoảng dưới 2000 loài virus; - Khoảng trên 1000 loài gây bệnh th

1. Lịch sử 1.1 Tài liệu cổ 1.1 Tài liệu cổ

Một phần của tài liệu BÀI GIẢNG BỆNH CÂY ĐẠI CƯƠNG TS. VÕ THỊ THU OANH ĐHNLTPHCM (Trang 27 - 29)