M Ở ĐẦU
2.2.4.5. Xác định hàm lượng calci
Nguyên tắc: dùng EDTA xác định calci trong dung dịch với chỉ thị murexid
(C8H5O6N5) trong môi trường có pH 12. Kí hiệu chất chỉ thị murexid là H3I trong môi trường pH 12 H3I có màu tím khi kết hợp với calci tạo thành chất phức tạp có màu hồng.
H3I (tím) + Ca2+<-> CaH3I ( hồng)
Chất phức hợp của Ca2+với murexid không bền bằng phức chất tạo bởi Ca2+ và EDTA. Vì vậy EDTA bị đẩy ra khỏi chất phức tạp dưới dạng tự do có màu tím.
CaH3I + H2Y2- (hồng) <-> CaY2- (tím) + H3I- + 2H+ Hóa chất
Dung dịch NaOH 10%
Dung dịch KCN 3%
Chỉ thị murexid: cân 0,1g murexid + 50g NaCl tinh khiết.Nghiền nhuyễn bằng cối, cho vào chai thủy tinh có nắp đậy kín.
Dung dịch EDTA 0,02N
Xử lý mẫu: cua rửa sạch, hấp chín, xay, tách lấy vỏ, rửa sạch. Sấy khô, đặt vào bình hút ẩm. Cân mẫu, hòa tan mẫu bằng HCl đậm đặc, định mức 100ml.
Hút 10ml mẫu đã xử lý, cho vào bình tam giác 100ml. Thêm 2-4ml dung dịch NaOH 10% cho đến khi đạt pH 12 – 13, nhỏ 5 giọt KCN 3% và khoảng nửa hạt gạo
chỉ thị murexid. Chuẩn độ bằng EDTA 0,02N cho đến khi màu hồng của dung dịch chuyển sang màu tím, cần thực hiện song song thí nghiệm đối chứng (thay mẫu bằng nước cất).
• Xác định hàm lượng calci trong 100g mẫu khô Lượng calci trong 100g mẫu khô tính bằng công thức m=𝑣×𝐶×20,04×100
𝑎
Trong đó: m: hàm lượng calci tính bằng mg v: thể tích EDTA dùng để chuẩn độ
C: độ nguyên chuẩn của EDTA 20,04: đương lượng của calci
a: trọng lượng mẫu khô tương đương với thể tích mẫu lấy đi chuẩn độ • Xác định hàm lượng calci hòa tan (Ca2+
) trong dịch lên men
Hút 1ml dịch lên men đã ly tâm, thêm 20ml nước cất, cho vào bình tam giác
100ml. Thêm 2ml dung dịch NaOH 10%, 5 giọt KCN 3% và khoảng nửa hạt gạo
chỉ thị murexid. Chuẩn độ bằng EDTA 0,02N cho đến khi màu hồng của dung dịch chuyển sang màu tím, cần thực hiện song song một thử không.
Tính kết quả
Hàm lượng (g/l) Ca2+
trong mẫu:CCa2+ = 𝐶×𝑣×20,04 𝑉
Trong đó: CCa2+ hàm lượng calci hòa tan g/l V: thể tích dung dịch mẫu lấy đi chuẩn độ v: thể tích EDTA dùng để chuẩn độ
C: độ nguyên chuẩn của EDTA 20,04: đương lượng của calci