Công nghệ tế bào trong tạo giống lily

Một phần của tài liệu Ứng dụng công nghệ tế bào và công nghệ gen trong đánh giá, chọn và tạo dòng Lilium có khả năng chịu nóng (Trang 30 - 31)

Ở lily, tạo giống lily mới phổ biến hiện nay vẫn bằng phương pháp lai tạo giữa các giống trong loài hoặc lai xa. Tuy nhiên, các hạt của tổ hợp lai xa dễ chết sớm do phôi không thể tồn tại trong cơ thể hoặc không này mầm khi ở điều kiện in vivo. Chính vì vậy, công nghệ nuôi cấy in vitro mô phôi nguyên vẹn hay các phôi được tách ra đã khắc phục được khó khăn trên (VanTuyl et al., 1991; Maesato et al., 1994; Barba - Gonzalez et al., 2004). Có hai phương pháp cứu phôi cụ thể như sau:

a. Nuôi cấy lát cắt bầu nhụy (Ovary-slice culture)

Nuôi cấy lát cắt bầu nhụy sau thụ tinh được ứng dụng cho việc tạo ra các con lai khác loài. Bầu nhụy được thu hoạch 7 ngày - 10 ngày sau thụ phấn, cắt

thành các lát cắt có độ dày 2 mm - 5 mm và được đặt trên môi trường MS bổ sung sucrose. Số điểm phồng lên của noãn trong nuôi cấy bầu nhụy được dùng để ước lượng hiệu quả trung bình về sự phát triển noãn. Trong vòng 30 ngày, noãn và phôi có thể được chia tách từ các lát cắt và nuôi cấy riêng biệt cho tới khi nảy mầm (Lim & VanTuyl, 2006).

Phương pháp nuôi cấy noãn phải được ứng dụng trong suốt quá trình sinh trưởng của phôi và trước khi phôi bị thoái hóa. Thời gian cho nuôi cấy noãn phụ thuộc vào sự kết hợp của phép lai (kiểu gen con lai) và nằm trong phạm vi từ 30 ngày - 45 ngày sau thụ phấn. Do phương pháp cứu phôi tốn kém, phức tạp nên phương pháp nuôi cấy noãn có thể được thực hiện trong một thời gian ngắn. Tuy nhiên, tỷ lệ nảy mầm của phôi ở phương pháp nuôi cấy noãn là thấp hơn so với phương pháp nuôi cấy phôi (Lim & VanTuyl, 2006).

b. Nuôi cấy phôi (Embryo culture)

Nuôi cấy phôi từ hạt không có nội nhũ và có nguồn gốc từ phép lai xa liên quan đến L. lankongense đã thu được thành công. Nuôi cấy phôi có thể được ứng dụng thành công trong các phép lai mà sự thoái hóa của phôi diễn ra một cách chậm chạp. Điều này thường xảy ra với các phép lai giữa các loài có quan hệ gần gũi một cách tương đối. Trong hầu hết các trường hợp, phôi có thể được cứu khi chúng đạt đến giai đoạn hình cầu. Kỹ thuật này rất đáng tin cậy và các phôi sinh trưởng nhanh mà không có bất kỳ sự phát triển khác thường nào. Thời gian tốt nhất cho phương pháp cứu phôi là khoảng 40 ngày - 60 ngày sau thụ phấn (Lim & VanTuyl, 2006). Với việc sử dụng các kỹ thuật trên, trên thế giới cũng như ở Việt nam đã có rất nhiều giống lily được tạo ra từ lai xa (Đặng Văn Đông và cs., 2010).

Một phần của tài liệu Ứng dụng công nghệ tế bào và công nghệ gen trong đánh giá, chọn và tạo dòng Lilium có khả năng chịu nóng (Trang 30 - 31)