Thí nghiệm được tiến hành với các nhóm chuột nhắt trắng, trọng lượng trung bình là 20 ± 2,0 g. Trước khi cho chuột uống HG1, chuột được chuẩn bị trước 16 giờ. Chế phẩm nghiên cứu HG1 được cho chuột uống với các mức liều tăng dần. Trong số các mức liều đem thử, khoảng cách giữa mức liều cao nhất chưa gây chết một con chuột nào và mức liều thấp nhất gây chết 100% số chuột trong nhóm được sử dụng để tính toán. Sau khi cho uống HG1, chuột được nuôi dưỡng và theo dõi chu đáo, ăn thức ăn tổng hợp do xưởng sản xuất thức ăn động vật thí nghiệm cung cấp, nước uống ad libitum. Thời gian theo dõi liên tục trong 72 giờ. Số chuột chết được đếm theo nhóm.
Tính toán: theo phương pháp cải tiến của Livschitz (1986) theo công thức sau:
Trong đó:
n: số động vật sử dụng trong từng nhóm thí nghiệm k: số nhóm động vật
mi: số động vật chết đếm được theo từng nhóm trong 72 giờ d: khoảng cách giữa các mức liều
xi: liều độ MB ở mức liều cao nhất
zi: hệ số phụ tính từ công thức zi = 2k - 1 - 2i (i lấy các giá trị từ 1, 2, 3, ..., k-1).
67
Căn cứ vào kết quả LD50 dùng phép ngoại suy cho liều dùng trên động vật, chúng tôi sử dụng cho uống chế phẩm bán trường diễn 2 mức liều thấp và cao.
Phương pháp được mô tả bởi Abrham (1978) [13] và theo quy định của WHO (2000) [169] và Bộ Y tế về hiệu lực và an toàn trong nghiên cứu thuốc có nguồn gốc thiên nhiên.
Nghiên cứu ảnh hưởng của HG1 khi cho động vật uống bán trường diễn đối với trọng lượng cơ thể và khối lượng gan, lách, thận
Dùng các nhóm chuột nhắt trắng khỏe mạnh, đủ điều kiện thí nghiệm, có trọng lượng trung bình 20 ± 2,0g. Nhóm chứng cho uống dung môi (không chứa HG1) 0,2mL mỗi con một lần trong ngày. Nhóm HG1 thử cho uống 2 mức liều căn cứ vào LD50 của HG1, liên tục trong 42 ngày. Theo dõi bằng các chỉ tiêu: tập tính động vật, lượng thức ăn tiêu thủ, lượng nước uống được theo dõi theo từng nhóm. Kết thúc đợt uống HG1, chuột được giết, phẫu tích bóc tách các tạng gan, lách, thận, đánh giá các tổn thương đại thể bằng kính lúp.
Khối lượng mỗi tạng được cân bằng cân phân tích. Khối lượng này được so sánh giữa các nhóm bằng tỉ lệ so với trọng lượng cơ thể của chúng (10 g TLCT của CNT). Xử lý số liệu theo nghiệm pháp t-Student; so sánh từng cặp và test trước-sau. Sự khác biệt có ý nghĩa khi p < 0,05.
Nghiên cứu ảnh hưởng của HG1 với các chỉ tiêu huyết học của động vật thí nghiệm cho uống trường diễn (Abrham, 1978 [13]; Turner A.,1965 [156];
WHO, 2000 [169]; Bộ Y tế - Cộng hòa xã hội chủ nghĩa Việt Nam,1996; Samuel Irwin, 1967) [136]
Các lô chuột nhắt trắng khỏe mạnh, trọng lượng 20 ± 2,0 g được dùng cho thí nghiệm này. Cho uống HG1 liều 3,0 g/kg thể trọng, liên tục trong 42 ngày. Trước thí nghiệm và sau khi thí nghiệm, lấy máu xét nghiệm. Số lượng hồng cầu, lượng haemoglobin, số lượng bạch cầu, tiểu cầu được định lượng trên máy xét nghiệm tự động tại lab cận lâm sàng - Viện Bỏng Quốc gia - Học viện Quân y. Đánh giá ảnh hưởng của HG1 đối với các tế bào máu. So sánh
68