Hợp chất UGC4 được tách ra dưới dạng bột màu trắng, mp 207–208 oC,
2 0
[]D +91,5 (c 0,1, CHCl3). Phổ UV (MeOH) cho đỉnh hấp thụ cực đại tại λ 242 và 275 nm. Phổ 1H-NMR chỉ ra các tín hiệu sau: 10 proton aromatic tại δH 7,45– 8,07, 2 proton olefin tại δH 5,88 và 6,04, 1 nhĩm oxymethylene tại δH 4,73, 3 nhĩm methine tại δH 4,35, 4,82 và 5,80. Phổ 13C-NMR và DEPT chỉ ra sự cĩ mặt
62
của 1 nhĩm oxymethylene (δC 69,0), 2 nhĩm benzoyloxy (δC 129,5–168,0), 1 liên kết đơi (δC 128,5 và 129,6), 2 nhĩm oxymethine (δC 70,7 và 75,3), 1 nhĩm chloromethine (δC 58,6) và 1 carbon bậc bốn gắn với oxy (δC 76,6). Các dữ kiện phổ trên đề nghị UGC4 là một hợp chất đa oxy hĩa của cyclohexene.
Các tương tác COSY giữa H-2 (δH 4,35)/H-3 (δH 5,80)/H-4 (δH 5,88)/H-5 (δH 6,04)/H-6 (δH 4,82) cho phép thiết lập trật tự liên kết C-2/C-3/C-4/C-5/C-6. Phổ HMBC chỉ ra các tương tác giữa H-2 (δH 4,35) và C-3 (δC 75,3), giữa H-3 (δH 5,80) và C-4 (δC 128,5), giữa H-4 (δH 5,88) và C-2 (δC 70,7)/C-5 (δC
129,6)/C-6 (δC 58,6) chứng tỏ hợp chất UGC4 sở hữu khung trioxycyclohexene
với nối đơi tại C-4/C-5. Ngồi ra, H-7 (δH 4,73) tương tác với C-1 (δC 76,6)/C-6 (δC 58,6)/C-7′ (δC 168,0); 1-OH (δH 4,59) tương tác với C-7 (δC 69,0) trên phổ HMBC đề nghị nhĩm benzoyloxy và vịng cyclohexene cùng liên kết với C-7 (δC
69,0) (Hình 4.19a). Nhĩm benzoyloxy cịn lại được đề nghị tại C-3 dựa vào sự dịch chuyển mạnh về phía trường thấp của C-3 (δC 75,3) so với C-2 (δC 70,7) cũng như tham khảo các giá trị tương ứng ở tài liệu [153]. Cấu hình tương đối của hợp chất UGC4 được thiết lập dựa vào việc phân tích các hằng số tương tác (J). Cụ thể, hằng số tương tác giữa H-2 (δH 4,35) và H-3 (δH 5,80) (J2,3 = 7,5 Hz) (so với các giá trị tham khảo Jaa′ = 8,4 Hz [8]) gợi ý quan hệ trans-axial/pseudo- axial (trans-a/a) giữa chúng. Hơn nữa, hằng số tương tác giữa H-5 (δH 6,04) và H-6 (δH 4,82) (J5,6 = 5,0 Hz) (so với các giá trị tham khảo J5/6a = 1,9 Hz, J5/6e = 5,3 Hz [8]) đề nghị H-6 định hướng pseudo-equatorial (e′) [8, 68] với cấu dạng chính được chỉ ra ở Hình 4.19b [70].
Hình 4.18. Cấu trúc hĩa học của hợp chất UGC4
Hình 4.19. Tương tác HMBC, COSY (a) và cấu dạng (b) chính của hợp chất UGC4
63
Bảng 4.4. Số liệu phổ NMR của hợp chất UGC4 và hợp chất tham khảo
C δC# δCa, b DEPT δHa, c (J, Hz) HMBC (H→C) 1 74,8 76,6 C − 2 68,6 70,7 CH 4,35 d (7,5) 3 3 73,8 75,3 CH 5,80 br.d (7,5) 2, 4 4 127,9 128,5 CH 5,88 dd (10,0, 2,5) 2, 5, 6 5 127,9 129,6 CH 6,04 ddd (10,0, 5,0, 2,0) 4 6 57,5 58,6 CH 4,82 br.d (5,0) 7 67,7 69,0 CH2 4,73* 1, 6, 7′ 1′ 128,9 131,3 C − 2′/6′ 129,6 130,6 CH (x2) 8,06 m 3′/5′ 128,9 129,5 CH (x2) 7,50 m 4′ 133,3 134,3 CH (x2) 7,61 m 7′ 165,7 167,9 C − 1″ 128,9 131,3 C − 2″/6″ 129,6 130,7 CH (x2) 8,06 m 3″/5″ 128,9 129,6 CH (x2) 7,50 m 4″ 133,3 134,3 CH (x2) 7,61 m 7″ 165,7 168,0 C − − 1-OH − − − 4,59 br.s 7 #
C của pipoxide chlorohydrin đo trong DMSO-d6 [153], ađo trong CD3OD, b125 MHz, c500 MHz, *tín hiệu chập.
Kết hợp các dữ kiện phổ, hằng số vật lý và so sánh với chất tham khảo ở tài liệu [153] cho phép kết luận UGC4 là pipoxide chlorohydrin. Hợp chất này
đã được phân lập từ một số lồi thuộc chi Piper như P. hookeri, P. nigrum [69],
P. attenuatum [153] và lồi U. grandiflora [83].