Hợp chất UGLE1 (chất mới): ()-3-O-Debenzoylzeylenone

Hợp chất UGLE1 được tách ra dưới dạng tinh thể khơng màu, mp 123–

124 oC, 2 0

[]D -13,8 (c 0,4, CHCl3). Phổ UV (MeOH) (Hình 4.6) đề nghị sự cĩ mặt của nhân thơm (λmax 268 nm) và enone (λmax 235 nm). Píc ion giả phân tử tại

m/z 301,0679 [M+Na]+ (tính tốn lý thuyết cho cơng thức C14H14O6Na là 301,0688) trên phổ HR-ESI-MS (Hình 4.7) cho phép xác định CTPT của hợp chất UGLE1 là C14H14O6.

Phổ 1H-NMR (CDCl3) (Hình 4.8) của hợp chất này chỉ ra các tín hiệu đặc trưng của 5 proton thơm tại δH 7,41–7,95 (5H), 2 proton olefin [δH 6,14 (dd, J = 10,5, 2,0 Hz, H-5) và 6,91 (dd, J = 10,5, 3,5 Hz, H-4)], 2 proton của nhĩm oxymethylene [δH 4,60 (d, J = 11,5 Hz, H-7a) và 4,78 (d, J = 11,5 Hz, H-7b) và 2 proton của 2 nhĩm oxymethine [δH 3,98 (d, J = 5,5 Hz, H-2) và 4,69 (m, H-3)]. Phổ 13C-NMR (Hình 4.10), DEPT (Hình 4.11) và HSQC (Hình 4.12) chỉ ra 14

54

tín hiệu gồm 2 carbon carbonyl và carboxylic (δC 195,4, 166,9), 6 carbon thơm (δC 128,5, 129,1, 129,9, 133,6), 2 carbon olefin (δC 126,9, 148,2), 1 carbon của nhĩm oxymethylene (δC 64,1), 2 carbon của 2 nhĩm oxymethine (δC 68,1, 74,2) và 1 carbon bậc bốn gắn với oxy (δC 76,3).

Tín hiệu của các proton thơm tại δH 7,41 (t, J = 8,0 Hz, H2-3′/5′), 7,56 (tt,

J = 8,0, 1,0 Hz, H-4′) và 7,95 (dd, J = 8,0, 1,0 Hz, H2-2′/6′) cùng với tương tác HMBC (Hình 4.5) giữa H2-2′/6′ (δH 7,95) và C-7′ (δC 166,9) đề nghị sự hiện diện của hợp phần benzoyl. Mặt khác, tương tác COSY giữa H-3 (δH 4,69) và H-2 (δH

3,98)/H-4 (δH 6,91), giữa H-4 (δH 6,91) và H-5 (δH 6,14) cùng các tương tác HMBC giữa H-2 (δH 3,98) và C-3 (δC 68,1)/C-4 (δC 148,2)/C-6 (δC 195,4), giữa H-4 (δH 6,91) và C-2 (δC 74,2)/C-6 (δC 195,4), giữa H-5 (δH 6,14) và C-1 (δC

76,3)/C-3 (δC 68,1) chứng tỏ hợp chất UGLE1 sở hữu hợp phần

trioxycyclohexenone với nối đơi tại C-4/C-5 và nhĩm ketone tại C-6. Phân tích chi tiết phổ HSQC, HMBC (Hình 4.13) và COSY (Hình 4.14) cho thấy 2 proton của nhĩm oxymethylene H-7a (δH 4,60) và H-7b (δH 4,78) tương tác với C-1 (δC

76,3)/C-2 (δC 74,2)/C-6 (δC 195,4)/C-7′ (δC 166,9). Dữ kiện này chứng tỏ C-1 và nhĩm benzoyloxy cùng liên kết trực tiếp với C-7.

Hình 4.4. Cấu trúc hĩa học của hợp chất UGLE1 và hợp chất tham khảo

55

Bảng 4.2. Số liệu phổ NMR của hợp chất UGLE1 và hợp chất tham khảo

C δC#, a δCa, b DEPT δHa, c (J, Hz) HMBC (H→C) 1 76,3 76,3 C  − 2 74,0 74,2 CH 3,98 d (5,5) 3, 4, 6 3 68,0 68,1 CH 4,69 m 2, 5 4 147,9 148,2 CH 6,91 dd (10,5, 3,5) 2, 6 5 129,0 126,9* CH 6,14 dd (10,5, 2,0) 1, 3 6 195,2 195,4 C  − 7 64,1 64,1 CH2 4,60 d (11,5) 1, 2, 6, 7′ 4,78 d (11,5) 1, 2, 6, 7′ 1′ 126,9 129,1* C  2′/6′ 129,9 129,9 CH 7,95 dd (8,0, 1,0) 3′/5′ 128,5 128,5 CH 7,41 t (8,0) 4′ 133,6 133,6 CH 7,56 tt (8,0, 1,0) 7′ 166,9 166,9 C  #

C của ()-3-O-debenzoylzeylenone [157], *giá trị được gán lại bằng phổ 2D-NMR, ađo trong CDCl3, b125 MHz, c500 MHz.

Hình 4.6. Phổ UV của hợp chất UGLE1

56

Hình 4.8. Phổ 1H-NMR của hợp chất UGLE1

57

Hình 4.10. Phổ 13C-NMR của hợp chất UGLE1

58

Hình 4.12. Phổ HSQC của hợp chất UGLE1

59

Hình 4.14. Phổ COSY của hợp chất UGLE1

60

Cấu hình tương đối của hợp chất UGLE1 được xác định qua phân tích các hằng số tương tác và dữ kiện phổ NOESY (Hình 4.15). Cụ thể, hằng số tương tác giữa H-2 (δH 3,98) và H-3 (δH 4,69) (J2,3 = 5,5 Hz) đề nghị quan hệ axial/pseudo- axial giữa chúng cũng như quan hệ 2,3-anti-dihydroxy [126]. Trên phổ NOESY, tương tác mạnh giữa H-2 (δH 3,98) và H-7a (δH 4,60)/H-7b (δH 4,78) và sự thiếu vắng các tương tác giữa H-2 (δH 3,98) và H-3 (δH 4,69), giữa H-3 (δH 4,69) và H- 7a (δH 4,60)/H-7b (δH 4,78) khẳng định sự cĩ mặt của nhĩm 1,2-syn-dihydroxy.

Các dữ kiện phổ (UV, MS, NMR) xác nhận hợp chất UGLE1 cĩ cấu trúc phẳng và cấu hình tương đối hồn tồn giống với hợp chất ()-3-O- debenzoylzeylenone, được tách ra từ lồi U. purpurea [157]. Mặt khác, năng suất quay cực của hợp chất UGLE1 ( 2 0

[]D -13,8 (c 0,4, CHCl3)) ngược dấu với hợp chất ()-3-O-debenzoylzeylenone ([]D +11,7 (c 0,36, CHCl3) [157], []D +12,5 (c 0,4, CHCl3) [126]). Hơn nữa, phổ CD của hợp chất UGLE1 (Hình 4.16) chỉ ra hiệu ứng Cotton âm tại  233 nm ([] -10433) tương tự hợp chất ()- zeylenone [(1S,2S,3R)-1,2-dihydroxy-3-benzoyloxy-6-oxocyclohex-4-en-1- ylmethyl benzoate] [156], gợi ý hai hợp chất này cĩ cấu hình tuyệt đối giống nhau. Do vậy, hợp chất UGLE1 được xác định là đối quang của ()-3-O- debenzoylzeylenone với danh pháp khoa học là (1S,2S,3R)-1,2,3-trihydroxy-6- oxocyclohex-4-en-1-ylmethyl benzoate. Sau cùng, cấu trúc hĩa học của hợp chất UGLE1 được xác nhận lại một cách chắc chắn bằng phương pháp nhiễu xạ tia X (Hình 4.17) (Phụ lục 2).

Hình 4.16. Phổ CD của hợp chất

UGLE1

Hình 4.17. Cấu trúc nhiễu xạ tia X của hợp chất UGLE1

61

Quá trình nghiên cứu cấu trúc của hợp chất này cũng ghi nhận sự ảnh hưởng mạnh của dung mơi đo mẫu với các dữ kiện phổ NMR của nĩ (Bảng 4.3). Cụ thể, tín hiệu của C-3, C-4 cĩ xu hướng dịch chuyển mạnh về phía trường thấp khi thay CDCl3 bằng CD3OD (Phụ lục 2) trong khi tín hiệu của C-7 thay đổi theo chiều ngược lại. Sự dịch chuyển mạnh nhất được xác định tại C-4 (ΔδC = 4,8 ppm) của vịng cyclohexenone. Hiện tượng này cũng được quan sát trên hợp chất tương tự, ()-3-O-debenzoylzeylenone, trong nghiên cứu trước đây [δC-4 = 147,8 (CDCl3), 152,7 (acetone-d6)] [126]. Ngồi ra, hằng số tương tác giữa H-2 và H-3 cũng phụ thuộc đáng kể vào dung mơi [J2,3 = 5,5 Hz (CDCl3), J2,3 = 7,5 Hz (CD3OD)]. Những đặc điểm vừa nêu cĩ thể được giải thích là do hợp chất UGLE1 tồn tại ở các cấu dạng chính khác nhau trong các dung mơi khác nhau mà mỗi cấu dạng lại sở hữu những đặc trưng riêng về mặt cấu trúc. Đây là điểm cần lưu ý khi nghiên cứu cấu trúc của hợp chất này cũng như các hợp chất tương tự.

Bảng 4.3. Số liệu phổ NMR (CDCl3, CD3OD) của hợp chất UGLE1

C CDCl3 CD3OD δCa δHb (J, Hz) δCa δHb (J, Hz) 1 76,3  77,2 2 74,2 3,98 d (5,5) 75,7 3,99 d (7,5) 3 68,1 4,69 m 70,2 4,62 dt (7,5, 2,5) 4 148,2 6,91 dd (10,5, 3,5) 153,0 7,00 dd (10,5, 2,5) 5 126,9 6,14 dd (10,5, 2,0) 127,6 6,07 dd (10,5, 2,5) 6 195,4  197,5  7 64,1 4,60 d (11,5) 63,3 4,50 d (10,5) 4,78 d (11,5) 4,69 d (10,5) 1′ 129,1  131,1  2′/6′ 129,9 7,95 dd (8,0, 1,0) 130,4 7,94 dd (8,0, 1,0) 3′/5′ 128,5 7,41 t (8,0) 129,5 7,46 t (8,0) 4′ 133,6 7,56 tt (8,0, 1,0) 134,3 7,60 tt (8,0, 1,0) 7′ 166,9  167,2  a 125 MHz, b500 MHz.