a) Phương pháp xác định tỷ lệ và cường độ nhiễm giun kim gà qua mổ khám
- Mổ khám gà theo phương pháp mổ khám không toàn di ện cơ quan tiêu hoá. Gạt toàn bộ chất chứa, niêm dịch trong manh tràng và ruột già để xét nghiệm bằng phương pháp lắng cặn Benedek (1943), thu thập toàn bộ số giun kim có trong mỗi gà. Những mẫu có giun kim được đánh giá là có nhiễm, ngược lại là không nhiễm.
- Cường độ nhiễm giun kim: được xác định bằng đếm số lượng giun kim ký sinh/ gà.
Quy định 3 mức cường độ nhiễm căn cứ vào kết quả xác định cường độ nhiễm của toàn bộ số gà mổ khám:
≤ 150 giun/ gà là nhiễm nhẹ (ký hiệu +)
> 150 – 300 giun/ gà là nhiễm trung bình (ký hiệu ++) > 300 giun/ gà là nhiễm nặng (ký hiệu +++)
* Phương pháp xác định tỷ lệ nhiễm H. meleagridis của những gà nhiễm giun kim và gà không nhiễm giun kim
Khi mổ khám gà phát hiện giun kim cũng đồng thời quan sát triệu chứng lâm sàng, kiểm tra bệnh tích, nhuộm Giemsa, làm tiêu bản tổ chức học theo quy trình tẩm đúc parafin, nhuộm Hematoxilin – Eosin manh tràng, gan và các nội quan khác của gà để xác định gà nhiễm H. meleagridis. Từ đó tính tỷ lệ nhiễm H. meleagridis trong số gà nhiễm giun kim và gà không bị nhiễm giun kim.
b) Phương pháp nghiên cứu sự ô nhiễm trứng giun kim ở khu vực xung quanh chuồng nuôi, nền chuồng và vườn chăn thả gà.
- Phương pháp thu thập mẫu
+ Mẫu nền chuồng: tại mỗi ô chuồng lấy mẫu ở 4 góc và ở giữa ô chuồng, trộn đều được một mẫu xét nghiệm (khoảng 100 g/mẫu). Mỗi mẫu được để riêng trong túi nilon có nhãn ghi tên chủ hộ, địa điểm và thời gian lấy mẫu.
+ Mẫu đất bề mặt xung quanh chuồng nuôi: trong khoảng bán kính 5 m xung quanh chuồng nuôi, cứ khoảng 10 m2 lấy một mẫu đất bề mặt. Một mẫu có khối lượng khoảng 100 g, được trộn đều bởi 4 mẫu ở 4 góc và 1 mẫu ở giữa. Mỗi mẫu được để riêng trong túi nilon có nhãn ghi tên chủ hộ, địa điểm và thời gian lấy mẫu.
+ Mẫu đất ở vườn chăn thả gà: cứ khoảng 10 m2 lấy một mẫu đất bề mặt ở 4 góc và ở giữa, phối hợp thành 1 mẫu có khối lượng khoảng 100 g, ghi nhãn giống như mẫu cặn nền chuồng và mẫu đất bề mặt xung quanh chuồng nuôi.
Các loại mẫu trên được xét nghiệm ngay trong ngày hoặc bảo quản theo quy trình bảo quản mẫu trong nghiên cứu ký sinh trùng thú y.
- Phương pháp xét nghiệm mẫu: sử dụng phương pháp Gefter để phát hiện trứng giun kim.
Cách làm: cho dung dịch NaOH 5% vào mẫu đất (tỉ lệ 1,5 NaOH : 1 đất), đưa vào máy lắc 3 – 5 phút để tách trứng giun ra khỏi đất, sau đó đưa vào máy ly tâm tốc độ 3000 vòng/phút trong 2 - 3 phút. Gạn bỏ nước phía trên, giữ lại cặn, cho dung dịch NaNO3 bão hòa vào, trứng giun tròn có tỉ trọng nhỏ hơn sẽ nổi lên trên. Dùng vòng thép vớt trứng hoặc đặt lam kính cho tiếp xúc với bề mặt của dung dịch để thu trứng giun. Soi tiêu bản dưới kính hiển vi độ phóng đại x 100 để tìm trứng giun kim, những mẫu có trứng giun kim được đánh giá là có nhiễm, ngược lại là không nhiễm.