Thái Nguyên và Bắc Giang
2.4.2.1. Phương pháp điều tra thực trạng phòng chống bệnh ký sinh trùng cho gà
- Xây dựng các tiêu chí đánh giá.
- Trực tiếp quan sát thực trạng chăn nuôi gà ở các địa phương nghiên cứu. - Phỏng vấn và phát phiếu điều tra về một số tiêu chí đã xây dựng.
2.4.2.2. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh đầu đen ở gà a) Xác định dung lượng mẫu cần thu thập tại các địa phương
Lấy mẫu gà mổ khám tại hai tỉnh Thái Nguyên và Bắc Giang theo phương pháp lấy mẫu chùm nhiều bậc.
Dung lượng mẫu thu thập được tính toán bằng phần mềm Win Episcope 2.0, với độ tin cậy 95 %.
Theo phần mềm trên, số gà đã mổ khám cụ thể như sau:
Thái Nguyên - Phú Bình: 265 Con - Võ Nhai: 174 Con - Phổ Yên: 176 Con
Σ: 615 Con
Bắc Giang - Tân Yên: 215 Con - Yên Thế: 264 Con - Hiệp Hòa: 182 Con
Σ: 661 Con
b) Dung lượng mẫu đã thu thập theo các yếu tố liên quan đến tình hình mắc bệnh đầu đen ở gà
* Tuổi gà. Mổ khám gà ở 4 lứa tuổi với số lượng sau:
≤ 1 tháng: 280 Con
> 1 - 3 tháng: 372 Con > 3 - 5 tháng: 345 Con > 5 tháng: 279 Con
Tổng: 1276 Con
* Mùa. Mổ khám gà ở 4 mùa với số lượng sau:
- Mùa Xuân (từ tháng 2 – tháng 4): 287 con
- Mùa Hè (từ tháng 5 - tháng 7): 341 con
- Mùa Thu (từ tháng 8 - tháng 10): 350 con - Mùa Đông (từ tháng 11 – tháng 1 năm sau): 298 con
Tổng: 1276 con
* Phương thức chăn nuôi. Số gà mổ khám theo 3 phương thức chăn nuôi như sau: - Chăn thả hoàn toàn: 239 Con
- Bán chăn thả: 351 Con
- Nuôi nhốt hoàn toàn: 686 con, gồm 3 loại: + Gà thịt nuôi nền: 202 Con
+ Gà sinh sản nuôi lồng: 126 Con + Gà sinh sản nuôi nền: 358 Con
Tổng: 1276 Con
* Kiểu nền chuồng. Mổ khám số gà nuôi ở 2 kiểu nền chuồng:
- Nền đất: 540 con
- Nền lát gạch hoặc xi măng : 371 con
* Tình trạng vệ sinh thú y. Tiêu chí đánh giá tình trạng VSTY tự quy định như sau: - Tình trạng VSTY tốt: chuồng trại cao ráo, thoáng mát, sạch sẽ, 1 tuần/ lần vệ sinh chuồng nuôi gà và khu vực xung quanh chuồng, thu gom phân và chất độn chuồng để ủ, 1 tháng/ lần khử trùng, tiêu độc chuồng trại, dụng cụ chăn nuôi, phát quang cây cỏ, khơi thông cống rãnh. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Tình trạng VSTY trung bình: 3 – 4 tuần/ lần vệ sinh chuồng nuôi và khu vực xung quanh chuồng nuôi; xung quanh chuồng gà có những vũng nước đọng; 2 – 3 tháng/ lần tiêu độc chuồng trại, dụng cụ chăn nuôi và phát quang cây cỏ, khơi thông cống rãnh.
- Tình trạng VSTY kém: 2 – 3 tháng/ lần vệ sinh chuồng nuôi và khu vực xung quanh chuồng; chuồng gà làm ở chỗ đất trũng, trong chuồng và khu vực xung quanh chuồng rất ẩm thấp, có nhiều vũng nước đọng, có nhiều cỏ cây um tùm, không sát trùng tiêu độc chuồng trại, dụng cụ chăn nuôi, không khơi thông cống rãnh.
Số gà mổ khám theo tình trạng vệ sinh thú y như sau:
- Tình trạng VSTY tốt: 415 Con
- Tình trạng VSTY trung bình: 362 Con
- Tình trạng VSTY kém: 499 Con
Tổng: 1276 Con
c) Phương pháp xác định tỷ lệ nhiễm H. meleagridis ở gà tại các địa phương
Tỷ lệ nhiễm đơn bào H. meleagridis ở gà được xác định bằng sự kết hợp giữa các phương pháp sau:
* Quan sát triệu chứng lâm sàng * Mổ khám kiểm tra bệnh tích
* Làm tiêu bản gan, manh tràng và các nội quan khác, nhuộm Giemsa và quan sát dưới kính hiển vi.
* Làm tiêu bản tổ chức học theo quy trình tẩm đúc parafin, nhuộm Hematoxilin – Eosin manh tràng, gan và các nội quan khác của gà.
Các phƣơng pháp cụ thể nhƣ sau:
* Quan sát triệu chứng lâm sàng
Trước khi mổ khám gà tại các địa phương, sử dụng các phương pháp chẩn đoán bệnh cơ bản như: quan sát, sờ nắn, đo thân nhiệt để xác định những biến đổi lâm sàng của gà bệnh: thân nhiệt; màu sắc của mào, tích; thể trạng; ăn uống; vận động; da vùng đầu và mép; màu sắc và trạng thái phân...
* Mổ khám kiểm tra bệnh tích
- Phương pháp mổ khám gà: mổ khám gà theo phương pháp mổ khám toàn diện của Skrjabin K. I. (1928), quan sát bằng mắt thường và kính lúp các nội quan như thận, lách, tim, phổi,..., đặc biệt là gan và manh tràng để xác định những biến đổi đại thể, chụp ảnh vùng có bệnh tích điển hình. Ghi nhật ký thí nghiệm kết quả biến đổi của gà mổ khám.
* Phương pháp nhuộm Giemsa tiêu bản gan, manh tràng và các nội quan khác của gà
Chuẩn bị những phiến kính mới đã được tẩy mỡ bằng cách rửa xà phòng, sau đó ngâm trong cồn 960 trong 3 giờ rồi lau khô bằng khăn mềm không có xơ. Dùng dao bisturi khoét nốt hoại tử ở gan hoặc nạo nhẹ niêm mạc manh tràng, lấy nốt hoại tử gan hoặc niêm dịch và chất chứa trong manh tràng đặt lên phiến kính đã có sẵn 1 giọt nước cất (cách đầu phiến kính khoảng 1 cm); nghiền nát rồi đặt cạnh của một lamen nghiêng 450 so với phiến kính, đẩy nhẹ lamen để gạt cặn sang 1 đầu phiến kính, tạo thành một lớp mỏng và đều trên phiến kính, để khô tiêu bản rồi cố định bằng cồn methanol trong 2 phút. Mỗi gà làm 3 tiêu bản và đánh số thứ tự các tiêu bản. Nhuộm giemsa trong 25 phút (pha dung dịch giemsa gốc với nước cất theo tỷ lệ 1:9). Để nghiêng tiêu bản dưới vòi nước chảy nhẹ cho trôi hết thuốc nhuộm thừa, để khô tiêu bản, soi dưới kính hiển vi với vật kính dầu, độ phóng đại x 1000 lần. Những mẫu tìm thấy đơn bào H. meleagridis được xác định là có nhiễm, ngược lại là không nhiễm. * Phương pháp làm tiêu bản tổ chức học theo quy trình tẩm đúc parafin, nhuộm Hematoxilin – Eosin.
Các bước tiến hành:
+ Lấy mẫu bệnh phẩm: cắt phần bệnh phẩm có nhiều tổn thương. + Cố định bệnh phẩm bằng dung dịch formon 10 %.
+ Khử nước: dùng cồn tuyệt đối để rút nước từ trong bệnh phẩm ra
+ Làm trong bệnh phẩm: ngâm bệnh phẩm qua hệ thống xylen để làm trong bệnh phẩm
+ Tẩm parafin: ngâm bệnh phẩm đã làm trong vào các cốc đựng parafin nóng chảy, để ở tủ ấm nhiệt độ 500C.
+ Đổ Block: rót parafin nóng chảy vào khuôn giấy rồi đặt miếng tổ chức (bệnh phẩm) đã tẩm parafin vào. Khi parafin đông đặc hoàn toàn thì bóc khuôn. Sửa lại block cho vuông vắn.
+ Cắt và dán mảnh: cắt bệnh phẩm trên máy cắt Microtom, độ dày mảnh cắt khoảng 3 - 4 µm. Dán mảnh cắt lên phiến kính bằng dung dịch Mayer (lòng trắng trứng 1 phần, glyxerin 1 phần; 1 ml hỗn hợp trên pha trong 19 ml nước cất).
+ Nhuộm tiêu bản bằng thuốc nhuộm Hematoxilin – Eosin
+ Gắn lamen bằng Baume canada, dán nhãn và đọc kết quả dưới kính hiển vi quang học, độ phóng đại 150 - 400 lần.
2.4.3. Phương pháp nghiên cứu sự liên quan giữa bệnh đầu đen và bệnh giun kim ở gà
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});