Để khảo sỏt khả năng tạo liờn kết húa trị giữa phõn tử FITC và APTES, FITC được pha trước với ethanol với cỏc tỷ lệ thể tớch thay đổi: FITC: Ethanol = 1:1, 1:3, 1:5, 1:7 và 1:10. Sau đú cho cỏc dung dịch trờn phản ứng với APTES trong 24 giờ theo tỷ lệ mol: FITC:APTES = 1:1,2 để đảm bảo phản ứng giữa FITC và APTES xảy ra hoàn toàn.
Hỡnh 2.11. Phản ứng giữa FITC và APTES
2.1.2.2. Chế tạo hạt nano silica chứa tõm màu FITC
Trong thớ nghiệm này, hợp chất FITC@APTES được chế tạo với tỷ lệ mol FITC:APTES = 1:23. Cỏc phõn tử APTES cũn dư trong dung dịch này sẽ tạo cỏc nhúm chức năng amine NH2trờn bề mặt hạt nhận được.
Cỏc tỷ lệ chất hoạt động bề mặt, dung mụi, TEOS, NH4OH là thừa kế của cỏc nghiờn cứu khỏc trong phũng thớ nghiệm nhằm chế tạo hạt cú kớch thước khoảng 80 nm.
Thớ nghiệm: Dung dịch hợp chất FITC@APTES sẽ được trộn với chất hoạt động bề mặt Triton X-100 và Hexanol-1 để tạo micelle chứa màu trước, rung siờu õm 30 phỳt, sau đú thờm cyclohexan và khuấy từ trong 1 giờ. Tiếp theo, H2O và TEOS được đưa vào hỗn hợp trờn và khuấy từ trong 20 phỳt. Cuối cựng, dung dịch NH4OH 28% được cho vào và khuấy từ trong 20 giờ. Mẫu được rửa bằng ly tõm 3
lần. Sơ đồ chế tạo và phương trỡnh phản ứng đồng trựng hợp FITC@APTES với precursor TEOS được trỡnh bày trờn Hỡnh 2.12 và Hỡnh 2.13.
Bảng 2.4. Thớ nghiệm chế tạo hạt silica chứa tõm màu FITC bằng phương phỏp
micelle đảo Mẫu Triton X-100 (ml) Hexanol-1 (ml) Cyclohexan (ml) TEOS (àl) NH4OH (àl) FITC@ APTES (àl) SiO2@FITC 1,17 1,6 7,5 200 60 30
Hỡnh 2.12. Sơ đồ chế tạo hạt silica chứa tõm màu FITC bằng phương phỏp micelle đảo
Triton X-100 Hexanol-1
Cỏc hệ micelle chứa
tõm màu, TEOS, H2O
Cỏc micelle chứa tõm màu ổn định trong dung mụi dầu
FITC@APTES Cỏc hạt nano SiO2 chứa tõm màu FITC H2O, TEOS NH4OH Cyclohexan
Hỡnh 2.13. Phản ứng đồng trựng hợp của FITC@APTES với TEOS để tạo liờn kết húa trị của chất màu trong hạt silica
2.1.3. Chế tạo cỏc hạt nano silica chứa tõm màu FITC bằng phương phỏp Stober Stober
Phương phỏp Stober là phương phỏp chế tạo hạt nano silica đơn giản, rẻ tiền. Vỡ vậy, sau khi đó chế tạo thành cụng hợp chất FITC@APTES, chỳng tụi sẽ sử dụng phương phỏp này để chế tạo cỏc hạt silica chứa FITC với mục đớch phục vụ cho cỏc ứng dụng đỏnh dấu sinh hoc trong thực tế. Cỏc nguyờn vật liệu và húa chất được sử dụng như trong phần 2.1.2.