Sau khi tiến hành nhuộm với khỏng thể phự hợp theo bố trớ thớ nghiệm, chỳng tụi tiến hành đếm tế bào trờn mỏy flow cytometer FACS Canto (BD).
Đầu tiờn, chỳng tụi tiến hành chạy mẫu đối chứng chứa hai loại tế bào HeLa và KPL4 với tỷ lệ 1:1 khụng ủ hoặc ủ với hạt nano silica SiO2RB@BSA, khụng cú khỏng thể. Kết quả trờn Hỡnh 4.10 cho thấy hỡnh dạng hai đồ thị giống nhau và cú đỉnh phổ huỳnh quang ở khoảng 2,5.103, đõy được coi là đường nền.
Hỡnh 4.10. Đối chứng tế bào HeLa:KPL4= 1:1
A: Khụng ủ với hạt nano silica
B: Ủ với hạt nano silica SiO2RB@BSA
Tiếp theo chỳng tụi tiến hành thớ nghiệm đếm tế bào với mẫu chứa hai loại tế bào HeLa và KPL4 với tỷ lệ 1:1 cú gắn kết với SiO2RB@HER2 và M546@HER2. Kết quả được thể hiện ở Hỡnh 4.11.
Hỡnh 4.11. Đối chứng tế bào HeLa:KPL4= 1:1
A) Ủ với phức hệ M546@HER2 B) Ủ với phức hệ SiO2RB@HER2
A Fluorescence Intensity B FluorescenceIntensity
Fluorescence Intensity
Đối với cỏc tế bào gắn kết với M546@HER2 theo nồng độ của nhà cung cấp (Invitrogen) đưa ra, cú thể nhận thấy cường độ tớn hiệu thu được (Hỡnh 4.11.A) cỡ 3,5.103, nghĩa làcường độ này tương tự như nền, chỉ cao hơn nền một chỳt. Điều đú cú nghĩa khỏng thể M546@HER2 với nồng độ này khụng cú khả năng phỏt hiện tế bào KPL4. Ngược lại, với mẫu tế bào gắn kết với SiO2RB@HER2 (Hỡnh 4.11.B) chỉ ra kết quả phản ỏnh khỏ chớnh xỏc tỷ lệ tế bào, chỳng ta cú thể thấy cú 2 quần thể tế bào khỏc nhau. Quần thể thứ nhất là cỏc tế bào khụng phỏt huỳnh quang (HeLa) được thể hiện bằng đỉnh cú cường độ ở khoảng 3,0.103. Quần thể thứ 2 gồm cỏc tế bào phỏt huỳnh quang (KPL4) thể hiện qua đỉnh cú cường độ ở khoảng 2,0.104.
Tiếp đến, chỳng tụi tiến hành mẫu thớ nghiệm gồm hỗn hợp HeLa và KPL4 với tỷ lệ 5:1 ủ với phức hệ SiO2RB@HER2 hoặc M546@HER2. Kết quả được thể hiện trờn Hỡnh 4.12.
Hỡnh 4.12. Đối chứng tế bào HeLa:KPL4 = 5:1
A) Ủ với phức hệ M546@HER2 B) Ủ với phức hệ SiO2RB@HER2
Với mẫu khỏng thể M546@HER2 (Hỡnh 4.12.A), khỏng thể ở nồng độ này khụng cú khả năng phỏt hiện tế bào KPL4, thể hiện cường độ tớn hiệu thu được (Hỡnh 4.12.A) cỡ 3,0.103, nghĩa là tớn hiệu gần như nền.
Điều đỏng ngạc nhiờn ở đõy là, mặc dự lượng tế bào KPL4 đó giảm xuống 3,5 lần so với thớ nghiệm trước, tuy nhiờn kết quả vẫn phản ỏnh tỷ lệ tế bào khỏ chớnh xỏc. Chỳng ta thấy cú 2 quần thể tế bào khỏc nhau với tỷ lệ xấp xỉ 5:1. Quần thể thứ nhất là cỏc tế bào HeLa khụng phỏt quang chiếm tỉ lệ 81%, cú đỉnh huỳnh
Fluorescence Intensity
quang ở khoảng 2,5.103. Quần thể thứ 2 gồm cỏc tế bào KPL4 phỏt quang chiếm tỉ lệ 19%, cú đỉnh huỳnh quang ở 6,0.103
.
Từ những kết quả thu được, chỳng ta cú thể khẳng định phức hệ SiO2RB@HER2 cú khả năng nhận biết đặc hiệu tế bào KPL4 trong hỗn hợp với tế bào HeLa dự với tỉ lệ tế bào KPL4 thấp.