3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2.2. Thăm dò ngưỡng phát hiện của kắt ELISA
Ngưỡng phát hiện của phương pháp ựược xác ựịnh trên cơ sở phân tắch thăm dò mẫu trắng ựược củng cố Clenbuterol ở nồng ựộ lớn hơn hoặc bằng nồng ựộ giới hạn phát hiện (LOD) theo công bố của kắt là 0,025 ppb (ựối với nền mẫu thịt) và 0,2 ppb (ựối với mẫu thức ăn chăn nuôi theo qui trình tách chiết mới ựược thay ựổi) ựúng bằng giá trị giới hạn phát hiện tối thiểu theo yêu cầu của Thông tư 57/2012/BNNPTNT.
Trong nghiên cứu này, giải nồng ựộ thăm dò ựược củng cố vào từng nền mẫu trắng (thức ăn chăn nuôi và thịt lợn) là 0,05; 0,075; 0,1; 0,15 và 0,2 ppb. Từ
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 43 kết quả phân tắch thử thấy phương pháp có khả năng phát hiện ổn ựịnh ở mức 0,05 và 0,075 ppb (ựối với mẫu thịt lợn) và 0,15 và 0,2 pp ựối với thức ăn chăn nuôị
Bảng 3.4. Kết quả xác ựịnh giới hạn phát hiện của phương pháp
Chỉ tiêu Mẫu thức ăn Mẫu thịt lợn
Nồng ựộ củng cố (ppb) 0,15 2,0 0,05 0,075
Số mẫu phân tắch 20 20 20 20
Số mẫu phát hiện 19 20 17 20
Số mẫu không phát hiện 1 0 3 0
Tỷ lệ mẫu không phát hiện (%) 5 0 15 0
LOD (ppb) 0,15 0,05
để khẳng ựịnh chắnh xác giới hạn phát hiện (LOD) và khẳng ựịnh khả năng ứng dụng của phương pháp theo qui ựịnh của Thông tư 57, trên cơ sở kết quả thăm dò, nghiên cứu này ựã tiến hành phân tắch 20 mẫu trắng thịt lợn ựược củng cố Clenbuterol ở mỗi mức nồng ựộ tại hai mức nồng ựộ khác nhau là 0,075 và 1,0 ppb. Tương tự phân tắch 20 mẫu trắng củng cổ 20 mẫu trắng ở hai mức nồng ựộ là 0,15 và 0,2 ppb. Kết quả cho thấy:
Giới hạn phát hiện của phương pháp trong ựiều kiện hiện có của kắt thử nghiệm là 0,15 ppb (ựối với thức ăn) và 0,075 ppb (ựối với thịt lợn).
Kết quả cho thấy, ựối với thức ăn ở hai nồng ựộ củng cố phương pháp ựều có khả năng phát hiện 95 ựến 100% số mẫu phân tắch (19 hoặc 20 dương tắnh trong số 20 mẫu phân tắch). Còn mẫu thịt lợn phương pháp chỉ có thể phát hiện 100% số mẫu phân tắch ở cố ở nồng ựộ củng cố 0,075 ppb (Bảng 3.4).
đối chiếu với qui ựịnh EC 657/2002 của Ủy ban Châu âu qui ựịnh về phương pháp phân tắch tồn dư có thể kết luận Phương pháp có khả năng phát hiện Clenbuterol ở nồng ựộ nhỏ nhất là 0,15 pp (ựối với mẫu thức ăn chăn nuôi và 0,075 ppb ựối với thịt lợn. Kết quả này khẳng ựịnh giới hạn phát hiện của phương pháp ựáp ứng qui ựịnh của thông tư 57/2012/BNNPTNT.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 44