chứng
1 2
K16 – Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật 59
Theo các nghiên cứu trước cho biết, với các động vật nhỏ như chuột nhắt trắng trong phòng thí nghiệm, không thể tiêm với lượng lớn dung dịch thử nghiệm vì sẽ làm phù phổi và suy tạng gây chết động vật trước khi đánh giá độc tính, cần phải phối hợp với Actinomycin D để giảm liều và giảm lượng dung dịch thử nghiệm đưa vào cơ thể chuột. Actinomycin D liều 0,5 µg/g cân nặng không gây chết chuột thí nghiệm nhưng giúp làm tăng tính độc và giảm liều của chất thử nghiệm 100 lần so với khi dùng đơn độc chất thử nghiệm (Rose, Bradley, 1971).
Dựa trên các kết quả nghiên cứu tối ưu điều kiện biểu hiện của protein tái tổ hợp SEB ở dạng đột biến (mtSEB), chúng tôi cũng đồng thời tiến hành biểu hiện và tinh sạch protein tái tổ hợp SEB ở dạng tự nhiên (wtSEB) để sử dụng làm mẫu đối chứng trong thí nghiệm đánh giá độc tính của mẫu mtSEB (các kết quả về biểu hiện, tinh sạch wtSEB không trình bày trong luận văn này). Chúng tôi đã sử dụng Actinomycin D kết hợp với dung dịch SEB độc tố và SEB không độc và đã tìm được liều lượng thích hợp đưa vào cơ thể chuột để đánh giá khách quan độc tính của 2 dung dịch trên. Đầu tiên, chúng tôi tiến hành tiêm chuột ở liều 1xLD50 kết hợp với actinomycin D cho các lô số 2 và 5 như cách bố trí thí nghiệm mô tả ở phần phương pháp nghiên cứu. Sau 7 ngày theo dõi, kết quả thí nghiệm được chúng tôi tổng hợp như trong bảng 3.3. Ở liều tiêm 1xLD50 (= 2,5 µg/g) của dung dịch wtSEB khi phối hợp với Actinomycin D liều 0,5 µg/g thì có số chuột chết sau tiêm lần lượt là 50% (lô 2) (hình 3.19). Không xuất hiện chuột chết ở hai lô, lô 1 tiêm Actinomycin D, lô 5 tiêm Actinomycin D và mtSEB ở liều 1xLD50.
Bảng 3.3. So sánh số chuột chết sau tiêm dung dịch wtSEB, mtSEB ở liều tiêm 1xLD50
Lô chuột thí nghiệm Số chuột chết/tổng số chuột Số chuột chết
(%)
Lô 1 (tiêm ActD) 0/10 0
Lô 2 (tiêm ActD và M1 = 1xLD50) 5/10 50
K16 – Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật 60
Hình 3.19. Kết quả tiêm chuột ở lô 2 với liều tiêm 1xLD50 sau 7 ngày theo dõi