Phổ khối MALDI-TOF/MS và ESI-MS của fucoidan oligosacarit

Một phần của tài liệu Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của fucoidan có hoạt tính sinh học từ một số loài rong nâu ở vịnh nha trang (full) (Trang 49)

Phổ MALDI-TOF/MS và ESI-MS được đo tại Viện Hĩa sinh Hữu cơ Thái Bình Dương, Viện Hàn lâm Khoa học Nga chi nhánh Viễn Đơng, Liên Bang Nga.

Phổ MALDI-TOF/MS được đo theo chế độ ion âm sử dụng chất nền là arabioosazone. Dung dịch nền được điều chế theo phương pháp của Chen và cộng sự [32] bằng cách trộn dung dịch arabioosazone 10 mg/ml trong ethanol và 10mg/ml L-fucose trong nước để làm giảm sự phân mảnh trong nguồn ion hĩa [18]. Dung dịch mẫu (0,01 mg/ml trong nước cất) được chuẩn bị từ mẫu đã đơng khơ. Kỹ thuật “lớp mỏng” được sử dụng để điều chế mẫu đo. Cụ thể như sau: 1μl dung dịch nền được phủ lên một mặt thép khơng rỉ và để cho khơ. Sau đĩ, 11μl dung dịch mẫu được phủ lên lớp thứ 2 và làm khơ trong khơng khí. Thiết bị được hiệu chỉnh trước sử dụng nền và các tín hiệu angiotensin-II (Sigma, Mỹ).

Phổ ESI-MS được đo theo cả hai chế độ ion âm và ion dương và việc hiệu chỉnh trước được tiến hành sử dụng chuẩn “HP-mix”. Thế mao dẫn được đặt tới

4000 v, và nhiệt độ khi sấy khơ là 325 oC. Thế buồng phân đoạn được đặt ở 160V. Cửa sổ phân lập cho các thí nghiệm MS/MS được đặt đến 1,3 đơn vị khối lượng cho các ion điện tích đơn và 4 đơn vị khối lượng cho các ion nhiều điện tích. Năng lượng va chạm được tối ưu hĩa giữa 10 và 45V để đạt tới cường độ nhiều nhất của các ion mảnh. Các mẫu sấy khơ được hịa tan trong 1:1 acetonitrile-nước (nồng độ mẫu là gần bằng 0.01 mg/ml) và nĩ được đưa vào phổ khối ở tốc độ dịng 5 μl/phút sử dụng bơm syringe (KD Scientific, USA).

Một phần của tài liệu Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của fucoidan có hoạt tính sinh học từ một số loài rong nâu ở vịnh nha trang (full) (Trang 49)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(120 trang)