... đoạn gen mã hóa vỏ virus TMV vàothuốc thu 58 thuốcchuyểngen Lây nhiễm thành công vàothuốc C9-1 chuyểngen nhằm thử tính kháng virus TMV, kết thu có 20/ 58 kháng tốt Kết kiểm tra 20 thuốcchuyển ... Nam, tiến hành nghiên cứu qui trình tái sinh chuyểngenvào giống thuốc C9-1 Gen thị gus thường sử dụng để đánh giá hiệu quy trình chuyểngen trước tiến hànhchuyểngen đích mong muốn Đây gen mã ... 3.1 XÂY DỰNG HỆ THỐNG TÁI SINH VÀ CHUYỂN GENVÀO GIỐNG THUỐCLÁ C9-1 THÔNG QUA AGROBACTERIUM TUMAFACIENS Hiện nay, chuyểngenvàothực vật thông qua vi khuẩn Agrobacterium biện pháp hữu hiệu để...
... dụng để chuyểngen thông qua A.rhizogenes Khi nhiễm A.rhizogenes với thực vật làm chuyển T-DNA từ vector chuyểngen với T-DNA A.rhizogenes vào genome thực vật Sự tái sinh thành chuyểngen thông ... mang genchuyển nên thiết phải tiến hành sàng lọc tế bào chuyểngen Dựa vàogen chọn lọc thiết kế vector chuyểngen mà người ta sử dụng kháng sinh phù hợp để thu tế bào, mẫu mang genchuyểnGen ... dòng rễ tơ chuyểngenthuốclá Mục tiêu đề tài - Thiết kế vector chuyểngen mang cấu trúc gen mã hóa protein vỏ virus H5N1 - Bước đầu chuyển vector tái tổ hợp mang cấu trúc gen HA1 vàothuốc tạo...
... pháp chuyểngen gián tiếp - Chuyểngen nhờ virus - Chuyểngen nhờ vi khuẩn Agrobacteriumtumefaciens 22 Chuyểngen nhờ Agrobacterium nghiên cứu từ năm 1960 – 1970 Việc phát Agrobacteriumtumefaciens ... số lượng gen, nghĩa số lượng genchuyển gắn vào genome chuyển gen, Trong đề tài này, phương pháp Southern Blot sử dụng để xác định có mặt gắn gen nguyên vẹn gen arsC genome thuốcchuyểngen sau ... pCAMBIA1301 – arsC vào vi khuẩn A tumefaciens 53 3.3 Tạo thuốcchuyểngen arsC 54 3.4 Kiểm tra thuốcchuyểngen đƣợc trồng tự nhiên 64 3.4.1 Kiểm tra thuốcchuyểngen kỹ thuật PCR...
... mô thuốc N.tabacum K326, tái sinh thành hoàn chỉnh Kiểm tra có mặt genchuyểnthuốc tái sinh cho thấy 32/44 dòng mang gen GmEXP1 Qua thấy, gen GmEXP1 vector tái tổ hợp thiết kế sử dụng để chuyển ... kế thành công vector tái tổ hợp pCB301 mang promoter CaMV35S cấu trúc chứa gen đích (GmEXP1_cmyc_KDEL_polyA) xác định protein expansin kéo giãn thành tế bào Thựcchuyển thành công cấu trúc vào ... thiết kế vector mang cấu trúc gen GmEXP1 lai với đoạn mã hoá peptide c-myc KDEL, điều khiển CaMV35S promoter; chuyển cấu trúc thuốc mô hình (Nicotinana tabacum) nhờ A .tumefaciens Tên trình tự...
... Thành t bào ngăn c n s xâm nh p c a DNA ngo i lai Vì th , cho ñ n ch có th chuy n genvào t bào có thành cellulose thông qua Agrobacterium, virus b n gen ho c ph i phá b thành t bào ñ chuy n gen ... tumefaciens Chuy n n p gen thành công tr ng ñã ñư c ghi nh n b ng cách s d ng vectơ Ti-plasmid, thông qua vi khu n Agrobacteriumtumefaciens ñ ñưa gen mong mu n vào b gen tr ng Chi Agrobacterium ñư ... nhi u genvào tr ng có nhi u ưu ñi m so v i phương pháp chuy n n p gen khác: gen ñư c chuy n n p g n vào h gen m t cách ñơn gi n, hi n tư ng tái s p x p l i c a gen x y ra, có b n b n c a gen ñư...
... thị Phát genchuyểnvào qua phân tích ADN đánh giá thể gen qua biotest Quy trình chuyểngenvàothực vật kỹ thuật đĩa nhờ vi khuẩn A .tumefaciens Quy trình chuyểngen nhờ vi khuẩn A .tumefaciens ... vector hoạt động theo chế chuyểngen vi khuẩn đất Agrobacterium cách hữu hiệu Cơ chế chuyểngenvào tế bào thực vật Kỹ thuật đĩa (Leaf disk technique) Để thực việc chuyểngen nhờ vi khuẩn người ... T-DNA; bao bọc vận chuyển T-DNA vào tế bào thực vật tiếp cận với gen chủ cách an toàn Như vậy, thực chất có hệ thống chuyểngen vi khuẩn đất vào trồng tồn tự nhiên acetosyingone Bộ gen vi khuẩn Ti...
... NGHIấN CU V THO LUN 3.1 Nhúm thớ nghim tin chuyn gen Trong quy trỡnh chuyn gen nh vi khun A .tumefaciens, vic b sung khỏng sinh tin hnh dit vi khun A .tumefaciens cú th nh hng n kh nng tỏi sinh [Purnima, ... l sng ca mu cy (%) Ngõm + Xut hin vi khun Khụng Cú 100 + 100 + + Khả chuyểngen nhờ vi khuẩn A .tumefaciens phụ thuộc nhiều vào đối tợng trồng, nguồn mẫu lây nhiễm Một số trình sinh trởng sản sinh ... nh chọn lọc sau khó khăn để loại bỏ đợc vi khuẩn 3.3 Biểu gen gus biểu gen kháng PPT Các kết chọn lọc tái sinh đồng tiền sau chuyểngen đợc thể bảng Bng Kt qu chn lc trờn i tng hoa ng tin ging...
... LIỆU: 1.1 Khái niệm thực vật chuyểngenCâychuyểngenthực vật mang nhiều gen đưa vào nhân toạ thay thông qua lai tạo Những gen tạo đưa vào (gen chuyển) phân lập từ loài thực vật có quan hệ ... đoạn chuyểnvào tế bào thực vật gắn vào NST gây bệnh khối u T-DNA vi khuẩn chuyểnvào tế bào thực vật hợp với gen nhân (tế bào thực vật) T-DNA ổn định gen nhân.Vị trí hợp T-DNA vào DNA thực vật ... phôi, chuyểngen gián tiếp nhờ vi khuẩn Agrobacterium, chuyểngen súng bắn gen Phương pháp để đưa genvào tế bào thực vật việc sử dụng Agrobaterium Phát kiến việc Agrobaterium tumefaciens có khả chuyển...
... cứu chuyểngen nhà khoa học thƣờng chọn thuốc mô hình Vì nghiên cứu chuyểngenthuốc đƣợc tiến hành sớm Câythuốcchuyểngen kháng diệt cỏ đƣợc tiến hành Mỹ Pháp năm 1986 Câythuốc đối tƣợng chuyển ... Sƣ phạm – Đại học Thái thuốc Nguyên 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Phƣơng pháp chuyểngenvàothuốc thông qua Agrobacteriumtumefaciens Quy trình chuyểngenvào giống thuốc Nicotania tabacum ... tuần tiến hành thu để thực phản ứng PCR kiểm tra có mặt genchuyển 3.3 Kết kiểm tra có mặt genchuyển dòng thuốcchuyểngen kỹ thuật PCR Các mẫu non 20 dòng thuốcchuyểngen hệ T0 trồng nhà lƣới...
... chuyển gen, biểu protein tái tổ hợp HIV-1 p24 Tính đề tài - Xây dựng quy trình chuyểngenvào lục lạp phương pháp bắn gen giống thuốc Virginia hóa Việt Nam - Chuyển thành công gen HIV-1 p24 vào ... thấp gen biểu độc lập, gen phiên mã dạng monocistron, khó kiểm soát để biểu đồng thời mức độ genchuyển [95, 111] Nhược điểm - Chuyểngenvào lạp thể thường có tần số chuyểngen thấp, chuyểngen ... kết từ gen trnfM đến gen trnG 87 Hình 4.5.1 Phân tích Southern blot dòng thuốc V2 chuyểngen 89 Bảng 4.7.1 Các dòng thuốc nguyên chuyểngen in vitro 92 Hình 4.7.2 Cây dòng thuốc V2...
... (terminator) * Vùng g n gen chuy n vào (MCS) * Vùng ch a gen ch n l c (ñ tách t bào chuy n gen) * Vùng ch a gen báo cáo ñ bi t ñư c gen chuy n vào có thành công không (gus, gfp - gen phát huỳnh quang) ... chuy n gen gián ti p - Chuy n gen nh virus - Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium ñư c nghiên c u t nh ng năm 1960 - 1970 Vi c phát ki n Agobacterium tumefaciens ... mang gen m t s v trí ð c bi t c ñi m c a A tumerfaciens ch chuy n gen hai m m ñư c kh c ph c, vi c chuy n genvào m t m m tr thành hi n th c ñư c ng d ng thành công phương pháp chuy n gen nh...
... (terminator) * Vùng g n gen chuy n vào (MCS) * Vùng ch a gen ch n l c (ñ tách t bào chuy n gen) * Vùng ch a gen báo cáo ñ bi t ñư c gen chuy n vào có thành công không (gus, gfp - gen phát huỳnh quang) ... chuy n gen gián ti p - Chuy n gen nh virus - Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium ñư c nghiên c u t nh ng năm 1960 - 1970 Vi c phát ki n Agobacterium tumefaciens ... mang gen m t s v trí ð c bi t c ñi m c a A tumerfaciens ch chuy n gen hai m m ñư c kh c ph c, vi c chuy n genvào m t m m tr thành hi n th c ñư c ng d ng thành công phương pháp chuy n gen nh...
... (terminator) * Vùng g n gen chuy n vào (MCS) * Vùng ch a gen ch n l c (ñ tách t bào chuy n gen) * Vùng ch a gen báo cáo ñ bi t ñư c gen chuy n vào có thành công không (gus, gfp - gen phát huỳnh quang) ... chuy n gen gián ti p - Chuy n gen nh virus - Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium ñư c nghiên c u t nh ng năm 1960 - 1970 Vi c phát ki n Agobacterium tumefaciens ... mang gen m t s v trí ð c bi t c ñi m c a A tumerfaciens ch chuy n gen hai m m ñư c kh c ph c, vi c chuy n genvào m t m m tr thành hi n th c ñư c ng d ng thành công phương pháp chuy n gen nh...
... Gateway Gateway® LR Clonase^*^ II Enzyme mix Kit (Invifrogen), Chung vi khudn E coli One Shot® TOP 10 (Invifrogen), chiing Agrobacteriumtumefaciens CV58C1 mang plasmid gay dgc pGV2260 Nguon thuoc ... trinh tu gen CP da co, chiing toi dua vao cac tritih tu gen CP cua TMV va CMV da dugc dang ky vao Ngan hang dii lieu gen de tim nhiing viing co bao thu cao nhat Thiet ke vector chuyengenthuc ... thuoclachuyengen c6 bieu hien khang TMV va CMV hoan toan da dugc xac dinh su C mat cua genchuyen tiong caychuyengenbang O phan ling PCR va su hoat dgng phien ma RNA cua genchuyen bang...
... RNAi TMV-CPi TMV2.6: Câythuốcchuyểngen T1 môi trường có Kan 50mg/l; WT-1: Câythuốc không chuyểngen môi trường có Kan 50mg/l; WT-2: Câythuốc không chuyểngen môi trường Kan Mũi tên hình ảnh ... thực vật, kiểu hình thường thấy mẫn cảm với kanamycine vàng lá, rễ không phát triển chết (hình 3.2) WT-2 TMV2.6 WT-1 Hình 3.2: Sàng lọc thuốcchuyểngen T1 RNAi TMV-CPi TMV2.6: Câythuốcchuyển ... chứng tỏ, cấu trúc chuyển gen RNAi TMV-CPi có mặt chuyển gen T1 Hình 3.4 Kiểm tra có mặt gen TMV-CPi số dòng thuốcchuyểngen T1 phương pháp PCR WT1, WT2: không chuyển gen; (+): đối chứng dương;...
... triển phấn hoa Gen gus đợc biểu mạnh chuyểngen Các phân tích gen đợc tiến hành 2.4 kỹ thuật chuyểngenvàothực vật 2.4.1 khái niệm chuyểngen kỹ thuật chuyểngen kỹ thuật đa hay nhiều genlạ đợc ... hớng tạo chuyểngen 2.5.1 Tình hình chung chuyểngen Ngời ta bắt đầu tiến hànhchuyểngenvào đối tựơng thực vật từ năm 1982, nhiều giống trồng đợc tạo phơng pháp chuyểngen phổ biến vào sản xuất ... hiển vi, DNA plasmid đợc tiêm vào tế bào vi sinh vật protoplast tế bào thực vật dới áp lực cao để tiến hànhchuyểngen Ngời ta thựcchuyểngen thành công nhiều đối tợng thực vật, vi sinh vật nh động...
... phương pháp chuyểngenvào tế bào thuốc BY-2 thông qua Agrobacterium với kết thí nghiệm bổ sung, đề quy trình chuyểngenvào tế bào thuốc BY2 sau: - Thiết lập tế bào thuốc BY-2 cách chuyển ml tế ... tế bào chuyểngen có biểu màu xanh đặc trưng gus Hình Hình Biểu gen gus tế bào BY-2 Các tế bào chuyểngen mang màu xanh đặc trưng gus Như vậy, với quy trình chuyểngen thu tế bào chuyểngen với ... sử dụng cho thí nghiệm 3.2 Chuyểngenvào tế bào BY-2 Thí nghiệm chuyểngen gus vào tế bào lặp lại lần, lần thu 15 cụm tế bào/đĩa petri Song song với thí nghiệm chuyển gen, thí nghiệm đối chứng...