thực hành chuyển gen vào cây thuốc lá bằng agrobacterium tumefaciens

... gen mã hóa vỏ virus TMV vào thuốc thu đƣợc 58 thuốc chuyển gen Lây nhiễm thành công vào thuốc C9-1 chuyển gen nhằm thử tính kháng virus TMV, kết thu đƣợc có 20/ 58 kháng tốt Kết kiểm tra 20 thuốc ... tạo thuốc chuyển gen kháng bệnh khảm lá với nội dung mục đích nghiên cứu: (1) Chuẩn hóa phƣơng pháp chuyển gen vào giống thuốc C9-1 thông qua cấu trúc mang thị gus; (2) Tạo thuốc chuyển gen ... gân thuốc lá) tobacco mottle virus( virus gây đốm thuốc lá) Kỵ axit thuốc Tobacco etch virus (virus gây bệnh kỵ axit thuốc lá) Xoăn thuốc Tobacco leaf curl virus (Virus gây xoăn thuốc lá) Khảm thuốc...

Ngày tải lên: 31/10/2012, 10:44

... đoạn gen mã hóa vỏ virus TMV vào thuốc thu 58 thuốc chuyển gen Lây nhiễm thành công vào thuốc C9-1 chuyển gen nhằm thử tính kháng virus TMV, kết thu có 20/ 58 kháng tốt Kết kiểm tra 20 thuốc chuyển ... Nam, tiến hành nghiên cứu qui trình tái sinh chuyển gen vào giống thuốc C9-1 Gen thị gus thường sử dụng để đánh giá hiệu quy trình chuyển gen trước tiến hành chuyển gen đích mong muốn Đây gen mã ... 3.1 XÂY DỰNG HỆ THỐNG TÁI SINH VÀ CHUYỂN GENVÀO GIỐNG THUỐC LÁ C9-1 THÔNG QUA AGROBACTERIUM TUMAFACIENS Hiện nay, chuyển gen vào thực vật thông qua vi khuẩn Agrobacterium biện pháp hữu hiệu để...

Ngày tải lên: 26/10/2014, 18:00

... dụng để chuyển gen thông qua A.rhizogenes Khi nhiễm A.rhizogenes với thực vật làm chuyển T-DNA từ vector chuyển gen với T-DNA A.rhizogenes vào genome thực vật Sự tái sinh thành chuyển gen thông ... mang gen chuyển nên thiết phải tiến hành sàng lọc tế bào chuyển gen Dựa vào gen chọn lọc thiết kế vector chuyển gen mà người ta sử dụng kháng sinh phù hợp để thu tế bào, mẫu mang gen chuyển Gen ... dòng rễ tơ chuyển gen thuốc lá Mục tiêu đề tài - Thiết kế vector chuyển gen mang cấu trúc gen mã hóa protein vỏ virus H5N1 - Bước đầu chuyển vector tái tổ hợp mang cấu trúc gen HA1 vào thuốc tạo...

Ngày tải lên: 04/04/2013, 13:44

... pháp chuyển gen gián tiếp - Chuyển gen nhờ virus - Chuyển gen nhờ vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens 22 Chuyển gen nhờ Agrobacterium nghiên cứu từ năm 1960 – 1970 Việc phát Agrobacterium tumefaciens ... số lượng gen, nghĩa số lượng gen chuyển gắn vào genome chuyển gen, Trong đề tài này, phương pháp Southern Blot sử dụng để xác định có mặt gắn gen nguyên vẹn gen arsC genome thuốc chuyển gen sau ... pCAMBIA1301 – arsC vào vi khuẩn A tumefaciens 53 3.3 Tạo thuốc chuyển gen arsC 54 3.4 Kiểm tra thuốc chuyển gen đƣợc trồng tự nhiên 64 3.4.1 Kiểm tra thuốc chuyển gen kỹ thuật PCR...

Ngày tải lên: 05/07/2015, 14:02

... mô thuốc N.tabacum K326, tái sinh thành hoàn chỉnh Kiểm tra có mặt gen chuyển thuốc tái sinh cho thấy 32/44 dòng mang gen GmEXP1 Qua thấy, gen GmEXP1 vector tái tổ hợp thiết kế sử dụng để chuyển ... kế thành công vector tái tổ hợp pCB301 mang promoter CaMV35S cấu trúc chứa gen đích (GmEXP1_cmyc_KDEL_polyA) xác định protein expansin kéo giãn thành tế bào Thực chuyển thành công cấu trúc vào ... thiết kế vector mang cấu trúc gen GmEXP1 lai với đoạn mã hoá peptide c-myc KDEL, điều khiển CaMV35S promoter; chuyển cấu trúc thuốc mô hình (Nicotinana tabacum) nhờ A .tumefaciens  Tên trình tự...

Ngày tải lên: 18/05/2016, 21:06

... Thành t bào ngăn c n s xâm nh p c a DNA ngo i lai Vì th , cho ñ n ch có th chuy n gen vào t bào có thành cellulose thông qua Agrobacterium, virus b n gen ho c ph i phá b thành t bào ñ chuy n gen ... tumefaciens Chuy n n p gen thành công tr ng ñã ñư c ghi nh n b ng cách s d ng vectơ Ti-plasmid, thông qua vi khu n Agrobacterium tumefaciens ñ ñưa gen mong mu n vào b gen tr ng Chi Agrobacterium ñư ... nhi u gen vào tr ng có nhi u ưu ñi m so v i phương pháp chuy n n p gen khác: gen ñư c chuy n n p g n vào h gen m t cách ñơn gi n, hi n tư ng tái s p x p l i c a gen x y ra, có b n b n c a gen ñư...

Ngày tải lên: 08/08/2013, 20:54

... thị Phát gen chuyển vào qua phân tích ADN đánh giá thể gen qua biotest Quy trình chuyển gen vào thực vật kỹ thuật đĩa nhờ vi khuẩn A .tumefaciens Quy trình chuyển gen nhờ vi khuẩn A .tumefaciens ... vector hoạt động theo chế chuyển gen vi khuẩn đất Agrobacterium cách hữu hiệu Cơ chế chuyển gen vào tế bào thực vật Kỹ thuật đĩa (Leaf disk technique) Để thực việc chuyển gen nhờ vi khuẩn người ... T-DNA; bao bọc vận chuyển T-DNA vào tế bào thực vật tiếp cận với gen chủ cách an toàn Như vậy, thực chất có hệ thống chuyển gen vi khuẩn đất vào trồng tồn tự nhiên acetosyingone Bộ gen vi khuẩn Ti...

Ngày tải lên: 30/09/2013, 10:20

Ngày tải lên: 14/02/2014, 22:23

... NGHIấN CU V THO LUN 3.1 Nhúm thớ nghim tin chuyn gen Trong quy trỡnh chuyn gen nh vi khun A .tumefaciens, vic b sung khỏng sinh tin hnh dit vi khun A .tumefaciens cú th nh hng n kh nng tỏi sinh [Purnima, ... l sng ca mu cy (%) Ngõm + Xut hin vi khun Khụng Cú 100 + 100 + + Khả chuyển gen nhờ vi khuẩn A .tumefaciens phụ thuộc nhiều vào đối tợng trồng, nguồn mẫu lây nhiễm Một số trình sinh trởng sản sinh ... nh chọn lọc sau khó khăn để loại bỏ đợc vi khuẩn 3.3 Biểu gen gus biểu gen kháng PPT Các kết chọn lọc tái sinh đồng tiền sau chuyển gen đợc thể bảng Bng Kt qu chn lc trờn i tng hoa ng tin ging...

Ngày tải lên: 02/04/2014, 20:20

... LIỆU: 1.1 Khái niệm thực vật chuyển gen Cây chuyển gen thực vật mang nhiều gen đưa vào nhân toạ thay thông qua lai tạo Những gen tạo đưa vào (gen chuyển) phân lập từ loài thực vật có quan hệ ... đoạn chuyển vào tế bào thực vật gắn vào NST gây bệnh khối u T-DNA vi khuẩn chuyển vào tế bào thực vật hợp với gen nhân (tế bào thực vật) T-DNA ổn định gen nhân.Vị trí hợp T-DNA vào DNA thực vật ... phôi, chuyển gen gián tiếp nhờ vi khuẩn Agrobacterium, chuyển gen súng bắn gen Phương pháp để đưa gen vào tế bào thực vật việc sử dụng Agrobaterium Phát kiến việc Agrobaterium tumefaciens có khả chuyển...

Ngày tải lên: 18/05/2015, 08:13

... cứu chuyển gen nhà khoa học thƣờng chọn thuốc mô hình Vì nghiên cứu chuyển gen thuốc đƣợc tiến hành sớm Cây thuốc chuyển gen kháng diệt cỏ đƣợc tiến hành Mỹ Pháp năm 1986 Cây thuốc đối tƣợng chuyển ... Sƣ phạm – Đại học Thái thuốc Nguyên 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Phƣơng pháp chuyển gen vào thuốc thông qua Agrobacterium tumefaciens Quy trình chuyển gen vào giống thuốc Nicotania tabacum ... tuần tiến hành thu để thực phản ứng PCR kiểm tra có mặt gen chuyển 3.3 Kết kiểm tra có mặt gen chuyển dòng thuốc chuyển gen kỹ thuật PCR Các mẫu non 20 dòng thuốc chuyển gen hệ T0 trồng nhà lƣới...

Ngày tải lên: 08/01/2015, 11:07

... chuyển gen, biểu protein tái tổ hợp HIV-1 p24 Tính đề tài - Xây dựng quy trình chuyển gen vào lục lạp phương pháp bắn gen giống thuốc Virginia hóa Việt Nam - Chuyển thành công gen HIV-1 p24 vào ... thấp gen biểu độc lập, gen phiên mã dạng monocistron, khó kiểm soát để biểu đồng thời mức độ gen chuyển [95, 111] Nhược điểm - Chuyển gen vào lạp thể thường có tần số chuyển gen thấp, chuyển gen ... kết từ gen trnfM đến gen trnG 87 Hình 4.5.1 Phân tích Southern blot dòng thuốc V2 chuyển gen 89 Bảng 4.7.1 Các dòng thuốc nguyên chuyển gen in vitro 92 Hình 4.7.2 Cây dòng thuốc V2...

Ngày tải lên: 28/02/2016, 20:49

... (terminator) * Vùng g n gen chuy n vào (MCS) * Vùng ch a gen ch n l c (ñ tách t bào chuy n gen) * Vùng ch a gen báo cáo ñ bi t ñư c gen chuy n vào có thành công không (gus, gfp - gen phát huỳnh quang) ... chuy n gen gián ti p - Chuy n gen nh virus - Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium ñư c nghiên c u t nh ng năm 1960 - 1970 Vi c phát ki n Agobacterium tumefaciens ... mang gen m t s v trí ð c bi t c ñi m c a A tumerfaciens ch chuy n gen hai m m ñư c kh c ph c, vi c chuy n gen vào m t m m tr thành hi n th c ñư c ng d ng thành công phương pháp chuy n gen nh...

Ngày tải lên: 06/11/2012, 13:59

... (terminator) * Vùng g n gen chuy n vào (MCS) * Vùng ch a gen ch n l c (ñ tách t bào chuy n gen) * Vùng ch a gen báo cáo ñ bi t ñư c gen chuy n vào có thành công không (gus, gfp - gen phát huỳnh quang) ... chuy n gen gián ti p - Chuy n gen nh virus - Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium ñư c nghiên c u t nh ng năm 1960 - 1970 Vi c phát ki n Agobacterium tumefaciens ... mang gen m t s v trí ð c bi t c ñi m c a A tumerfaciens ch chuy n gen hai m m ñư c kh c ph c, vi c chuy n gen vào m t m m tr thành hi n th c ñư c ng d ng thành công phương pháp chuy n gen nh...

Ngày tải lên: 10/12/2012, 11:34

... (terminator) * Vùng g n gen chuy n vào (MCS) * Vùng ch a gen ch n l c (ñ tách t bào chuy n gen) * Vùng ch a gen báo cáo ñ bi t ñư c gen chuy n vào có thành công không (gus, gfp - gen phát huỳnh quang) ... chuy n gen gián ti p - Chuy n gen nh virus - Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium Chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium ñư c nghiên c u t nh ng năm 1960 - 1970 Vi c phát ki n Agobacterium tumefaciens ... mang gen m t s v trí ð c bi t c ñi m c a A tumerfaciens ch chuy n gen hai m m ñư c kh c ph c, vi c chuy n gen vào m t m m tr thành hi n th c ñư c ng d ng thành công phương pháp chuy n gen nh...

Ngày tải lên: 16/04/2013, 19:11

... Gateway Gateway® LR Clonase^*^ II Enzyme mix Kit (Invifrogen), Chung vi khudn E coli One Shot® TOP 10 (Invifrogen), chiing Agrobacterium tumefaciens CV58C1 mang plasmid gay dgc pGV2260 Nguon thuoc ... trinh tu gen CP da co, chiing toi dua vao cac tritih tu gen CP cua TMV va CMV da dugc dang ky vao Ngan hang dii lieu gen de tim nhiing viing co bao thu cao nhat Thiet ke vector chuyen gen thuc ... thuoc la chuyen gen c6 bieu hien khang TMV va CMV hoan toan da dugc xac dinh su C mat cua gen chuyen tiong cay chuyen gen bang O phan ling PCR va su hoat dgng phien ma RNA cua gen chuyen bang...

Ngày tải lên: 11/03/2014, 08:20

... RNAi TMV-CPi TMV2.6: Cây thuốc chuyển gen T1 môi trường có Kan 50mg/l; WT-1: Cây thuốc không chuyển gen môi trường có Kan 50mg/l; WT-2: Cây thuốc không chuyển gen môi trường Kan Mũi tên hình ảnh ... thực vật, kiểu hình thường thấy mẫn cảm với kanamycine vàng lá, rễ không phát triển chết (hình 3.2) WT-2 TMV2.6 WT-1 Hình 3.2: Sàng lọc thuốc chuyển gen T1 RNAi TMV-CPi TMV2.6: Cây thuốc chuyển ... chứng tỏ, cấu trúc chuyển gen RNAi TMV-CPi có mặt chuyển gen T1 Hình 3.4 Kiểm tra có mặt gen TMV-CPi số dòng thuốc chuyển gen T1 phương pháp PCR WT1, WT2: không chuyển gen; (+): đối chứng dương;...

Ngày tải lên: 31/03/2014, 00:16

... triển phấn hoa Gen gus đợc biểu mạnh chuyển gen Các phân tích gen đợc tiến hành 2.4 kỹ thuật chuyển gen vào thực vật 2.4.1 khái niệm chuyển gen kỹ thuật chuyển gen kỹ thuật đa hay nhiều gen lạ đợc ... hớng tạo chuyển gen 2.5.1 Tình hình chung chuyển gen Ngời ta bắt đầu tiến hành chuyển gen vào đối tựơng thực vật từ năm 1982, nhiều giống trồng đợc tạo phơng pháp chuyển gen phổ biến vào sản xuất ... hiển vi, DNA plasmid đợc tiêm vào tế bào vi sinh vật protoplast tế bào thực vật dới áp lực cao để tiến hành chuyển gen Ngời ta thực chuyển gen thành công nhiều đối tợng thực vật, vi sinh vật nh động...

Ngày tải lên: 24/08/2014, 12:54

... phương pháp chuyển gen vào tế bào thuốc BY-2 thông qua Agrobacterium với kết thí nghiệm bổ sung, đề quy trình chuyển gen vào tế bào thuốc BY2 sau: - Thiết lập tế bào thuốc BY-2 cách chuyển ml tế ... tế bào chuyển gen có biểu màu xanh đặc trưng gus Hình Hình Biểu gen gus tế bào BY-2 Các tế bào chuyển gen mang màu xanh đặc trưng gus Như vậy, với quy trình chuyển gen thu tế bào chuyển gen với ... sử dụng cho thí nghiệm 3.2 Chuyển gen vào tế bào BY-2 Thí nghiệm chuyển gen gus vào tế bào lặp lại lần, lần thu 15 cụm tế bào/đĩa petri Song song với thí nghiệm chuyển gen, thí nghiệm đối chứng...

Ngày tải lên: 29/10/2014, 14:00

... mảnh thuốc 40 3.3.2 Ảnh hƣởng mannose tới phát triển chồi /cây thuốc 41 3.4 Chuyển gen tái sinh vào thuốc 42 3.4.1 Chuyển cấu trúc RNAi TMV-M-CPi vào giống thuốc C9-1 K326 thông qua Agrobacterium ... vector RNAi chuyển gen mang gen đặc thù virus khảm thuốc - Tạo chủng Agrobacterium mang vector chuyển gen - Tạo thuốc mang gen chọn lọc mannose NỘI DUNG NGHIÊN CỨU - Nghiên cứu phân lập gen mã hóa ... bệnh đốm thuốc lá) ốc Tobacco etch virus (Virus gây bệ ốc lá) ốc lá) Xoăn thuốc Tobacco leaf curl virus (Virus gây xoăn thuốc lá) Khảm thuốc Tobacco mosaic virus (Virus gây bệnh khảm thuốc lá) Satellite...

Ngày tải lên: 01/12/2015, 18:24