... 0,5µl dH2O 2.5µl Tổng thể tích 10µl 2.3.8 Phương pháp xácđịnhtrìnhtự nucleotid đoạn gentáchdòngTrìnhtự nucleotid đoạn gentáchdòngxácđịnh theo phương pháp tổng hợp Sanger cs [1], [12], ... đại gen cry1C chủng Bacillus thuringiensis subsp aizawai phương pháp PCR 43 3.2 Táchdòng đọc trìnhtựgen cry1C .44 3.2.1 Táchdònggen cry1C 44 3.2.2 Xácđịnhtrìnhtự ... để khuếch đại gen cry1C 31 2.3.7 Phương pháp táchdònggen cry1C 31 2.3.8 Phương pháp xácđịnhtrìnhtự nucleotid đoạn gentáchdòng 34 2.4 Địa điểm nghiên cứu 35 Chƣơng...
... đại gen cry1C chủng Bacillus thuringiensis subsp aizawai phương pháp PCR 43 3.2 Táchdòng đọc trìnhtựgen cry1C .44 3.2.1 Táchdònggen cry1C 44 3.2.2 Xácđịnhtrìnhtự ... để khuếch đại gen cry1C 31 2.3.7 Phương pháp táchdònggen cry1C 31 2.3.8 Phương pháp xácđịnhtrìnhtự nucleotid đoạn gentáchdòng 34 2.4 Địa điểm nghiên cứu 35 Chƣơng ... HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM LÊ THỊ NGỌC THƢƠNG TUYỂN CHỌN, TÁCH DÒNG VÀ XÁC ĐỊNHTRÌNHTỰGEN cry1C MÃ HÓA PROTEIN TINH THỂ DIỆT CÔN TRÙNG BỘ CÁNH VẢY TỪ VI KHUẨN Bacillus thuringiensis...
... điện di gen EBNA-1 61 Hình 3.11 Hình ảnh giản đồ (chromatogram) phần trìnhtựgen EBNA-1 63 Hình 3.12 Kết chuỗi gen EBNA-1 EB17 thu nhận sau giải trìnhtự 63 Hình 3.13 So sánh phần trìnhtự acid ... Kết táchdòng giải trìnhtự sản phẩm HPV-16 HPV-18 từ mẫu kiểm tra 53 3.1.4 Kết giải trìnhtự thu nhận chuỗi gen E6 HPV-16 chuỗi gen L1 HPV-18 54 3.1.5 Kết truy cập Ngân hàng gen ... giải trìnhtrìnhtựxácđịnhgen EBNA – EBV 60 3.2.1 Kết kiểm tra DNA tổng số từ mẫu bệnh phẩm 60 3.2.2 Kết thực phản ứng PCR 61 3.2.3 Kết giải trìnhtự thu nhận chuỗi gen...
... lượng lớn gentrìnhtự DNA cần thiết Táchdònggen gọi phân lập gen, có nhiều phương pháp táchdònggen khác Táchdòng invitro (in vitro gene cloning), táchdòng silico (in silico gene cloning) ... http://www.lrc-tnu.edu.vn 26 1.6 Tổng quan táchdònggen 1.6.1 Khái niệm táchdònggen Thực chất việc táchdònggen gắn gen, trìnhtự DNA cần thiết (DNA insert) vào vectơ tách dòng, tạo vectơ tái tổ hợp đưa ... gen cry1Ab gen cry1Ac phương pháp PCR; - Sàng lọc chủng Bt var kurstaki có hoạt tính diệt sâu tơ; - Táchdònggen cry1Ab gen cry1Ac; - Xácđịnhtrìnhtự đoạn gen cry1Ab đoạn gen cry1Ac tách dòng...
... đại, chọn dòngxácđịnhtrìnhtựgen IFS1 giống đậu tương nghiên cứu - So sánh trìnhtựgen IFS1 phân lập giống đậu tương nghiên cứu với trìnhtự cơng bố ngân hàng GenBank - So sánh trìnhtự amino ... mang gen IFS1 đạt kết tốt, đảm bảo chất lượng số lượng để tiến hành đọc trìnhtự nucleotide gen IFS1 3.4 KẾT QUẢ GIẢI TRÌNHTỰGENTrìnhtự nucleotide gen IFS1 táchdòng đọc thiết bị giải trìnhtự ... giải trìnhtự cho thấy xáctrìnhtựgen IFS1 đậu tương Như vậy, khuếch đại, táchdòng giải trìnhtự nucleotide thành công đoạn gen IFS1 giống đậu tương DT84 DT2008 Kết nghiên cứu cho thấy gen...
... điện di gen EBNA-1 61 Hình 3.11 Hình ảnh giản đồ (chromatogram) phần trìnhtựgen EBNA-1 63 Hình 3.12 Kết chuỗi gen EBNA-1 EB17 thu nhận sau giải trìnhtự 63 Hình 3.13 So sánh phần trìnhtự acid ... Kết táchdòng giải trìnhtự sản phẩm HPV-16 HPV-18 từ mẫu kiểm tra 53 3.1.4 Kết giải trìnhtự thu nhận chuỗi gen E6 HPV-16 chuỗi gen L1 HPV-18 54 3.1.5 Kết truy cập Ngân hàng gen ... giải trìnhtrìnhtựxácđịnhgen EBNA – EBV 60 3.2.1 Kết kiểm tra DNA tổng số từ mẫu bệnh phẩm 60 3.2.2 Kết thực phản ứng PCR 61 3.2.3 Kết giải trìnhtự thu nhận chuỗi gen...
... táchdòng đọc trìnhtựgenxácđịnh gem ngân hàng gen quốc tế 40 3.3 Táchdòng và đọc trìnhtựgen bceT, nhe hblA 3.3.1 Táchdònggen bceT, nhe và hblA */ Gắn sản phẩm PCR vào vector táchdòng ... 2.2.8 Phương pháp xácđịnhtrìnhtự nucleotit đoạn gentáchdòng Tiến hành xácđịnhtrìnhtự theo phương pháp Sanger cộng sự, dựa vào tổng hợp mạch bổ sung cho mạch đơn DNA cần xácđịnh Dưới xúc ... điện di gel agarose 36 2.2.7 Phương pháp táchdònggen nhe, hblA, bcet 36 2.2.8 Phương pháp xácđịnhtrìnhtự nucleotit đoạn gentáchdòng 37 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 Phân...
... trìnhtựgen CP, tách tinh plasmit từ 12 dòng khuẩn lạc trắng Các plasmit nguyên liệu cho phản ứng PCR xácđịnhtrìnhtựTrìnhtựgen đợc xácđịnh máy xácđịnhtrìnhtự nucleotit tựđộng ABI PRISMđ3100 ... đợc trình bày hình 14 Kết điện di hình 14 cho thấy sản phẩm tách plasmit sạch, đảm bảo chất lợng số lợng để tiến hành xácđịnhtrìnhtự 3.4 Kết xácđịnhtrìnhtự nucleotit Để xácđịnhtrìnhtựgen ... phút, li tâm 13.000 v/p phút 2.2.9 Xácđịnhtrìnhtựgen máy phân tích trìnhtự nucleotid tựđộngGen đợc xácđịnhtrìnhtự máy tựđộng ABI PRIMS đ 3100 Avant Genetic Analyzer, b»ng c¸ch sư dơng...
... sánh trìnhtựgen thu đợc Các bớc tiến hành nh sau: + So sánh trìnhtựgen đợc đọc từ hai đầu xuôi đầu ngợc để xácđịnhtrìnhtự đầy đủ gen + Xácđịnh đợc vị trí, số lợng enzym hạn chế trìnhtự ... subclone xácđình đầy đủ trìnhtự đoạn gen Muốn tiến hành subclone trớc hết phải xácđịnhtrìnhtự chiều trìnhtự gen, sau xácđịnh vị trí cắt enzym giới hạn Chọn vị trí cắt enzym giới hạn gen PCS ... máy xácđịnhtrìnhtự nucleotit tựđộng trang thiết bị khác 2.2 Phơng pháp nghiên cứu Thu thập mẫu PRSV Khai thác trìnhtự NCBI Tách ARN tổng số Thiết kế mồi Nhân gen NIb RT-PCR Táchdònggen Xác...
... phút, li tâm 13.000 v/p phút 2.2.9 Xácđịnhtrìnhtựgen máy phân tích trìnhtự nucleotid tựđộngGen đợc xácđịnhtrìnhtự máy tựđộng ABI PRIMS đ 3100 Avant Genetic Analyzer, b»ng c¸ch sư dơng ... đợc trình bày hình 14 Kết điện di hình 14 cho thấy sản phẩm tách plasmit sạch, đảm bảo chất lợng số lợng để tiến hành xácđịnhtrìnhtự 3.4 Kết xácđịnhtrìnhtự nucleotit Để xácđịnhtrìnhtựgen ... địnhtrìnhtựgen CP, tách tinh plasmit từ 12 dòng khuẩn lạc trắng Các plasmit nguyên liệu cho phản ứng PCR xácđịnhtrìnhtựTrìnhtựgen đợc xácđịnh máy xácđịnhtrìnhtự nucleotit tù ®éng...
... chúng tơi trình bày phần táchdòngxácđịnhtrìnhtự nucleotid gene mã hố kháng thể tái tổ hợp kháng lại lympho bào táchtừ bệnh nhân ung thư vú Để táchdòngxácđịnhtrìnhtự gene mã hóa kháng thể ... vector táchdòng pCR ™ 2.1 Mục đích: sau nhân đoạn gene kiểm tra điện di gel agarose 1% cần tách đoạn gene Q trìnhtáchdòng thực cách gắn trực tiếp sản phẩm phản ứng PCR vào vector táchdòng pCR ... vị trí ( trìnhtự ) xácđịnh Do đặc tính RE khả nhận biết cắt trìnhtựxácđịnh phân tử DNA nên dựa vào khả này, người ta chia chúng làm ba loại: - Loại I: Khi enzyme nhận biết trình tự, di chuyển...
... thể tích 10µl 2.3.10 Xácđịnhtrìnhtự so sánh trìnhtựgen thu đƣợc với trìnhtự tƣơng ứng GenBank Táchdòngxácđịnhtrìnhtự gen: Sản phẩm PCR đƣợc gắn vào vector táchdòng pBT [4] biến nạp ... gen quan tâm i) Thu thập trìnhtựgen quan tâm từ GenBank: Trƣớc thiết kế đoạn mồi đặc hiệu cho gentrìnhtự cần phân lập chủng virut nghiên cứu (Ví dụ: trìnhtựgen CP RGSV), trìnhtự đoạn gen ... (RGSV) Nội dung nghiên cứu 1> Tách dòng, xácđịnhtrìnhtự số đoạn genome chủng RGSV 2> So sánh trìnhtự nucleotit gen CP- RGSV thu đƣợc với trìnhtự tƣơng ứng GenBank để đánh giá độ tƣơng đồng...
... nhóm gen cry gây độc với số lồi trùng định Để sàng lọc chủng B thuringiensis có chứa gen cry mong muốn, tạo dòngxácđịnhtrìnhtựgen độc tố vấn đề cần thiết, làm sở cho nghiên cứu sâu gen cry ... II.4 Xácđịnhtrìnhtự nucleotid đoạn ADN đặc hiệu gen cry 1Ab Kết hình cho thấy: trìnhtự đoạn ADN đặc hiệu gen cry1Ab tạo dòngtừ chủng B thuringiensis var kurstaki H15 phân lập xácđịnh có ... loại RNaza nồng độ 100g/ml I.4 Phân tích trìnhtự đoạn ADN đặc hiệu gen cry1Ab Sau tách chiết tinh vectơ tái tổ hợp từ tế bào chủ, genxácđịnhtrìnhtự theo phương pháp enzim học Sanger nhờ...
... dung 3: Xácđịnhtrìnhtự gene gltA táchdòng - Giải trìnhtự gene gltA táchdòng máy giải trìnhtựtựđộng Applied Biosystems - So sánh thành phần thiết yếu trìnhtự gene gltA giải trìnhtự với ... đoạn gene giải trìnhtự - So sánh trìnhtự gene gltA táchdòng với trìnhtự công bố ngân hàng gene NCBI (Gene bank) thơng qua chương trình Blast 37 3.4 Phương pháp nghiên cứu 3.4.1 Quy trìnhtách ... dương tính PCR Chọn lọc lập đồ giới hạn Các dòng khuẩn lạc đích Giải trìnhtự gene Trìnhtự gene gltA Hình 8: Quy trìnhtáchdòngxácđịnhtrìnhtự gene gltA từ vi khuẩn E coli 38 3.4.2 Phương...
... tích kết 3.4.8 Phương pháp xácđịnhtrìnhtự gene crtY máy tựđộngTrìnhtự nucleotide gene crtY xácđịnh phương pháp xácđịnhtrìnhtự gene tựđộng máy xácđịnhtrìnhtự gene hãng Applied Biosystems ... với trìnhtự cơng bố ngân hàng gene quốc tế + Xácđịnhtrìnhtự gene phương pháp giải trìnhtựtựđộng + So sánh trìnhtự gene crtY với trìnhtự công bố ngân hàng gene quốc tế thơng qua chương trình ... pháp so sánh trìnhtự gene crtY với trìnhtự công bố ngân hàng gene quốc tế 27 Gene crtY sau xácđịnhtrìnhtự so sánh với trìnhtự cơng bố ngân hàng gene quốc tế thơng qua chương trình BLAST...
... thể tích 10µl 2.3.10 Xácđịnhtrìnhtự so sánh trìnhtựgen thu đƣợc với trìnhtự tƣơng ứng GenBank Táchdòngxácđịnhtrìnhtự gen: Sản phẩm PCR đƣợc gắn vào vector táchdòng pBT [4] biến nạp ... gen quan tâm i) Thu thập trìnhtựgen quan tâm từ GenBank: Trƣớc thiết kế đoạn mồi đặc hiệu cho gentrìnhtự cần phân lập chủng virut nghiên cứu (Ví dụ: trìnhtựgen CP RGSV), trìnhtự đoạn gen ... USD [22] Nội dung nghiên cứu 1> Tách dòng, xácđịnhtrìnhtự số đoạn genome chủng RGSV 2> So sánh trìnhtự nucleotit gen CP- RGSV thu đƣợc với trìnhtự tƣơng ứng GenBank để đánh giá độ tƣơng đồng...