phương pháp tinh sạch protein tái tổ hợp bằng cột ái lực ni2
Tinh sạch protein tái tổ hợp SEB 534 dạng đột biến
Ngày tải lên :
27/09/2016, 10:33
... PGS.TS.NGHIÊM NGỌC MINH Cột tinh Ni-NTA Máy điện di protein Máy chụp ảnh điện di 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp tinh protein Nguyên lý: Protein tái tổ hợp thu dạng dung hợp có đuôi His-tag ... mạnh Trên sở đó, protein tái tổ hợp gen seb mã hóa liên kết đặc hiệu với ion niken Các phân tử protein tế bào tổng hợp đuôi His - tag không gắn với ion niken Protein tái tổ hợp giữ lại Sinh viên: ... Các bước tinh Phần dịch có chứa protein tái tổ hợp đưa lên cột Nickel-Chelating Resin chuẩn bị trước Bước 1: Loại bỏ dịch qua đêm cột tinh Bước 2: Cho ml dịch sau siêu âm vào cột tinh sạch, đảo...
- 23
- 639
- 1
Nghiên cứu biểu hiện và tinh sạch protein tái tổ hợp glycoprotein (GP5) của virus gây hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn (PRRSV)
Ngày tải lên :
30/11/2016, 08:31
... phân lập dòng tế bào nhận có khả sản xuất nhiều protein tái tổ hợp Trong tế bào chủ, đoạn gen tái tổ hợp biểu thành protein mong muốn (protein tái tổ hợp) 1.2.5 Vector biểu pET 32a(+) chủng biểu ... để tinh chế protein tái tổ hợp Cột tinh chế protein đƣợc thiết kế có giá thể gắn với ion kim loại Ni2+ nhờ phức hợp cua, ion có lực lớn với vòng imidazol histidine Khi cho protein tổng số qua cột, ... biểu tinh protein tái tổ hợp glycoprotein (GP5) vius gây hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (PRRSV)” Mục đích nghiên cứu: - Thiết kế đƣợc vector biểu protein tái tổ hợp GP5 - Biểu tinh đƣợc protein...
- 58
- 572
- 2
TINH CHẾ PROTEIN TÁI TỔ HỢP GNRH-TBK Ở E. COLI
Ngày tải lên :
23/04/2013, 09:34
... vào, protein khác chảy xuống cột Bằng cách thay đổi pH lực ion phù hợp cách thêm chất ức chế cạnh tranh hòa tan vào tách protein enzyme khỏi cột trạng thái 4.2.6 Kết tinh protein Đây phương pháp ... phản ứng, phương pháp cho kết xác xác định protein tinh - Định lượng protein phương pháp quang phổ: Phương pháp đơn giản để đo nồng độ protein dung dịch độ hấp thụ tia cực tím Nếu protein tinh nồng ... axit amin protein tái tổ hợp Meth, axit amin Glu, His, Trp, Ser, Tyr, Gly, Leu… Trình tự với kết Western blotting khẳng định protein thu protein lai GnRH-TBK KẾT LUẬN Immunotoxin tái tổ hợp GnRH-TBK...
- 88
- 502
- 1
Nhân dòng, biểu hiện và tinh sạch streptokinase tái tổ hợp từ chủng streptococcus pyogenes trong e coli
Ngày tải lên :
10/02/2014, 20:39
... dạng tiêm đòi hỏi phải có độ tinh khiết cao Các enzyme tái tổ hợp thông thƣờng thƣờng dung hợp đuôi 6xhistidine để thuận tiện cho trình tinh sạch, nhƣng việc dung hợp đuôi 6xhistidine đƣợc xem ... sản xuất chế phẩm enzyme tái tổ hợp streptokinase yếu tố hoạt hóa plasminogen mô (tPA) sử dụng điều trị” thực đề tài luận văn “Nhân dòng, biểu tinh streptokinase tái tổ hợp Escherichia coli” tiến ... đạt 15% protein tổng số (thấp Estrada) Tuy nhiên SK tái tổ hợp dạng hòa tan nên tinh dễ dàng Năm 2007, Reza et al sử dụng vector pGEX để biểu SK E coli với suất biểu đạt 50% protein tổng số Nhóm...
- 10
- 729
- 0
Tổng quan về phương pháp tinh sạch Protein
Ngày tải lên :
15/03/2014, 13:38
... kết tinh protein Sau bước tinh sạch, thông số sau cần ghi nhận để đánh giá trình tinh protein: - Protein tổng số: lượng protein có phân đoạn Thông số tính cách nhân nồng độ phần phân đoạn với tổng ... kết tinh protein Sau bước tinh sạch, thông số sau cần ghi nhận để đánh giá trình tinh protein: - Protein tổng số: lượng protein có phân đoạn Thông số tính cách nhân nồng độ phần phân đoạn với tổng ... việc tinh thể hóa protein thực với protein tinh từ tinh thể biết cấu trúc bậc đơn vị chức protein thông qua liệu chiếu xạ tia X Vì vậy, trình tinh protein không ngừng cải tiến để đạt độ tinh...
- 24
- 3.5K
- 10
bài giảng công nghệ protein enzyme chương 4 các phương pháp tinh sạch protein enzym
Ngày tải lên :
27/05/2014, 15:16
... Sử dụng phương pháp ứng dụng cho hầu hết quy mô hoạt động 41 Kết tinh protein Đây phương pháp đặc hiệu tốt để tách phần protein enzyme giai đoạn tinh chế cuối Khi protein enzyme làm tinh khiết ... phẩm protein Tuy nhiên, nhiều protein không chịu cách xử lý Vì vậy, người ta sử dụng phương pháp làm đông khô phương pháp làm khô protein thận trọng nhất, phương pháp sử dụng cho hầu hết protein ... dịch protein điều kiện ôn hòa Phương pháp sử dụng trường hợp thẩm tách lọc gel để khử muối trao đổi đệm Bằng cách dùng chất kết tủa lực để tăng khối lượng phân tử protein mong muốn, phương pháp...
- 46
- 598
- 1
Nghiên cứu thu nhận và tinh sạch phytase tái tổ hợp từ nấm men pichia pastoris gs115
Ngày tải lên :
08/10/2014, 18:31
... cho việc tinh protein sau phần lớn protein tiết môi trường protein tái tổ hợp HVTH: Lê Thị Ngọc Sương CBHD: TS Hoàng Quốc Khánh Luận Văn Thạc Sĩ Tổng quan tài liệu Trang 32 Việc tiết protein bước ... phosphate inositol tổng hợp hóa học tổng hợp enzyme Tuy nhiên, chế tổng hợp hóa học inositol phosphate (Billington, 1993) phức tạp, đòi hỏi nhiệt độ áp suất cao Trái lại, tổng hợp enzyme phytase ... 42 2.2 Các phương pháp sử dụng 43 2.2.1 Phương pháp xác định hàm lượng protein: 43 2.2.2 Phương pháp xác định hoạt tính phytase 45 2.2.3 Phương pháp chạy điện di SDS-PAGE...
- 177
- 1.3K
- 3
Nhân dòng, biểu hiện và tinh sạch Streptonkinase tái tổ hợp từ chủng Streptococus pyogenes trong Echerichia coli165946
Ngày tải lên :
31/03/2015, 16:19
... enzyme tái tổ hợp streptokinase yếu tố hoạt hóa plasminogen mô (tPA) sử dụng điều trị” thực đề tài luận văn “Nhân dòng, biểu tinh streptokinase tái tổ hợp E coli” với dạng streptokinase tái tổ hợp ... dòng pJET1.2/bunt, hình thành plasmid tái tổ hợp pJmSK biến nạp vào E coli DH5α phương pháp sốc nhiệt Các khuẩn lạc nuôi cấy để tách plasmid Plasmid tái tổ hợp có kích thước lớn pJET1.2 có khả ... tra khung đọc, plasmid tái tổ hợp pEmSK biến nạp vào E coli JM109 DE3 tạo thành chủng JMpEmSK tái tổ hợp Cặn tế bào JMpEmSK sau cảm ứng biểu với mM IPTG thu kiểm tra protein tổng số SDS-PAGE M kDa...
- 61
- 728
- 0
Biểu hiện, tinh sạch thrombin tái tổ hợp và đánh giá hoạt tính kháng khuẩn của băng gạc có gắn thrombin kết hợp với nano bạc
Ngày tải lên :
02/07/2016, 13:56
... di protein gel polyacrymide (PAGE) 23 2.2.2.2 Xác định nồng độ protein 24 2.2.2.3 Tinh protein tái tổ hợp 25 2.2.2.4 Phương pháp loại đuôi his-tag khỏi protein tái tổ hợp ... tái tổ hợp Sau có chủng E coli BL21 tái tổ hợp mang gene thrombin với biểu protein dạng tiền chất prethombin-2 Được nuôi 37oC, môi trường lý tưởng E coli phát triển khiến cho protein tái tổ hợp ... văn thạc sĩ (2010), biểu hiện, tinh protein staphylokinase với hàm lượng protein biểu đạt 3042% protein tổng số [3] 3.2 Tinh thrombin tái tổ hợp Thrombin tái tổ hợp sản phẩm mà có gắn duôi His-6...
- 58
- 514
- 0
Sản xuất protein tái tổ hợp có dược tính sinh học (phần I) pps
Ngày tải lên :
05/07/2014, 00:21
... kết hợp nhiều bước kỹ thuật bao gồm bước ly tâm lọc Một làm sạch, protein mục tiêu tập trung vào bước siêu lọc lọc gel hai pha sau tinh với phương pháp khác kết hợp, thường sử dụng phương pháp ... cho phép tái chế làm cột nên hỗ trợ số lần sử dụng Trong trường hợp ký kết hợp đồng, nhà sản xuất không đảm bảo sản xuất sản phẩm vài năm Khi hấp thu cột mở rộng, với kỹ thuật tinh sạch, thách ... suất, độ tinh tính ổn định Việc tinh protein trở ngại qúa trình phát triển quy trình, cải thiện chất phương pháp sắc ký để đáp ứng cho quy trình tinh hiệu Việc bổ sung thêm giai đoạn trình tinh công...
- 11
- 697
- 6
Sản xuất protein tái tổ hợp có dược tính sinh học (phần II) pot
Ngày tải lên :
05/07/2014, 00:21
... loại protein, quy trình đựơc thiết kế tốt giai đoạn Điều phụ thuộc nhiều vào bước tinh Trong quy trình hiệu quả, chất cột gắn nhiều protein (10-20% nhiều hay số lượng mong đợi) Tốc độ dòng chảy cột ... khả chứa nhiều suốt trình chạy cột độ trình phân tách Các bước kiểm tra cần thực để tính toán khoảng thời gian hiệu cột sản phẩm tinh để xác định điều kiện mà protein có khả hoạt động Cuối cùng, ... định trứơc giai đoạn I sản phẩm thực chuyên gia Phương pháp chung cho nhà sản xuất sử dùng dòng tế bào chuột lang (rodent cell lines) để giám sát bước tinh virus để loại bỏ hay bất hoạt virus gây...
- 15
- 631
- 3
CHIẾN lược TINH CHẾ PROTEIN, các PHƯƠNG PHÁP TINH SẠCH ví dụ TINH CHẾ một PROTEIN tự NHIÊN
Ngày tải lên :
24/04/2015, 07:12
... protein trị liệu chẩn đoán đặc hiệu, phương pháp sắc ký phương pháp sử dụng rộng rãi Sắc ký phương pháp, với khả chọn lọc yêu cầu, để tinh protein riêng rẽ khỏi hỗn hợp phức tạp protein tới tinh ... độ tinh cao xem bước Ví dụ: Ở quy mô lớn, 55% protein không mong muốn loại bỏ bước riêng rẽ cách làm nóng dịch chiết E coli mang protein A Staphylococcus tái tổ hợp 80ºC 10 phút Nếu protein tái ... Nếu protein tái tổ hợp tinh khỏi thể ưa nhiệt kết xử lý nhiệt hiệu nhiều 11 Các phương pháp sắc ký Tinh protein phương pháp sắc ký thực hành chuẩn phòng thí nghiệm nhiều năm Để tinh sản phẩm tích...
- 28
- 1.4K
- 5
Phương pháp giải tích Fourier trong tổ hợp cộng tính
Ngày tải lên :
23/07/2015, 14:25
... ∞ tổ hợp cộng tính 24 Phương pháp giải tích Fourier tổ hợp cộng tính 28 2.1 Độ lệch tuyến tính 28 2.2 Tập hợp Bohr 34 2.3 Các Λ(p)- số, Bh - tập hợp ... Bước đầu tìm hiểu Giải tích tổ hợp, định hướng thầy TS Trần Văn Vuông, em chọn đề tài Phương pháp giải tích Fourier tổ hợp cộng tính” Đây ba công cụ để nghiên cứu Tổ hợp cộng tính trình bày sách ... nghiên cứu Nghiên cứu số vấn đề tổ hợp cộng tính phương pháp giải tích Fourier Nhiệm vụ nghiên cứu • Nghiên cứu số khái niệm tổ hợp cộng tính • Nghiên cứu số khái niệm giải tích Fourier • Vận...
- 69
- 479
- 0
Hoàn thiện trình tự và phương pháp lập báo cáo tài chính hợp nhất tại công ty TNHH nhà nước MTV sách hà nội
Ngày tải lên :
02/08/2015, 15:21
... hỡnh th c, gúp ph n ph bi n ch tr phỏp lu t c a Nh n c, nõng cao ng, chớnh sỏch c a i s ng v n hoỏ tinh th n cho nhõn dõn i ng cỏn b , cụng nhõn viờn c a Cụng ty cú 360 ng trỡnh i h c v trờn ng,...
- 119
- 200
- 1
Tình hình nghiên cứu, phát triển và ứng dụng các loại thuốc protein tái tổ hợp trong y học
Ngày tải lên :
09/08/2016, 18:57
... nhiều protein tái tổ hợp Trong tế bào chủ, đoạn gene tái tổ hợp biểu thành protein tái tổ hợp mong muốn Việc sản xuất protein tái tổ hợp thường bắt đầu việc lựa chọn “nhà máy sản xuất protein , ... tế bào nhận có khả sản xuất nhiều protein tái tổ hợp Trong tế bào chủ, đoạn gene tái tổ hợp biểu thành protein tái tổ hợp mong muốn Hiện nay, protein tái tổ hợp sử dụng nhiều y học, mở hướng ... ĐỊNH HƯỚNG PHÁT TRIỂN PROTEIN TÁI TỔ HỢP 2.1 Quy trình sản xuất thuốc protein tái tổ hợp công nghệ sinh học 2.1.1 Giai đoạn nghiên cứu Về nguyên tắc, kỹ thuật protein tái tổ hợp hay tạo dòng (cloning)...
- 31
- 1.7K
- 2
Phương pháp giải tích Fourier trong tổ hợp cộng tính
Ngày tải lên :
05/11/2016, 22:34
... ∞ tổ hợp cộng tính 24 Phương pháp giải tích Fourier tổ hợp cộng tính 28 2.1 Độ lệch tuyến tính 28 2.2 Tập hợp Bohr 34 2.3 Các Λ(p)- số, Bh - tập hợp ... Bước đầu tìm hiểu Giải tích tổ hợp, định hướng thầy TS Trần Văn Vuông, em chọn đề tài Phương pháp giải tích Fourier tổ hợp cộng tính” Đây ba công cụ để nghiên cứu Tổ hợp cộng tính trình bày sách ... nghiên cứu Nghiên cứu số vấn đề tổ hợp cộng tính phương pháp giải tích Fourier Nhiệm vụ nghiên cứu • Nghiên cứu số khái niệm tổ hợp cộng tính • Nghiên cứu số khái niệm giải tích Fourier • Vận...
- 69
- 324
- 0
Đánh giá khả năng đáp ứng miễn dịch đối với protein tái tổ hợp MBP-VT2eB trên heo
Ngày tải lên :
29/10/2012, 14:13
... vật tạo nên dòng vi sinh vật tái tổ hợp Những vi sinh vật tái tổ hợp đƣợc nuôi cấy bình lên men lớn để thu đƣợc lƣợng lớn protein tái tổ hợp mà sau đƣợc tinh dễ dàng Bằng kỹ thuật ngƣời ta sản ... g protein tái tổ hợp/ ml Lô 3: tiêm lần vào lúc 14 ngày tuổi 24 ngày tuổi với liều 50 g protein tái tổ hợp/ ml Lô 4: tiến hành tiêm lần vào lúc 14 ngày tuổi với liều 75 g protein tái tổ hợp/ ml ... cao maltose amylose, tinh đƣợc protein tái tổ hợp dạng dung hợp với MPB thông qua sắc ký lực Ngoài ra, protein tái tổ hợp mang vị trí nhận biết đặc hiệu protease, phân cắt protein mục tiêu dễ...
- 52
- 808
- 1
Khấu hao và các phương pháp tính khấu hao tài sản cố định
Ngày tải lên :
29/10/2012, 16:11
... thứ thứ người ta chuyển sang phương pháp khấu hao tuyến tính với mức khấu hao năm là: 43,2 triệu : = 21,6 triệu * Phương pháp khấu hao theo tổng số: Theo phương pháp này, mức khấu hao năm xác ... ( i = 1, n) Theo phương pháp số dư giảm dần, kỹ thuật tính toán nên đến hết thời gian sử dụng, TSCĐ chưa khấu hao hết Để khắc phục vấn đề này, người ta thường kết hợp phương pháp khấu hao tuyến ... = 26,667 200 x 1/15 = 13,334 Cộng 15 200 Ưu điểm phương pháp khấu hao nhanh: - Thu hồi vốn nhanh, giảm bớt tổn thất hao mòn vô hình - Đây biện pháp “hoãn thuế” năm đầu doanh nghiệp Nhược điểm:...
- 3
- 3.1K
- 29
Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch đối với protein tái tổ hợp MBP-VT2eB trên thỏ
Ngày tải lên :
31/10/2012, 08:48
... mó hoỏ cho protein tỏi t hp MBP-VT2eB v tinh sch c protein ny T thc t ú, chỳng tụi thc hin ti: Nghiờn cu ỏp ng dch i vi protein tỏi t hp MBP-VT2eB trờn th nhm xỏc nh kh nng ng dng protein ny ... 2.5 PROTEIN TI T HP MBP-VT2eB[4] Protein tỏi t hp MBP-VT2eB l mt protein gm hai thnh phn: MBP (maltose binding protein) v VT2eB (tiu phn B ca c t vero), cú trng lng phõn t vo khong 47 kDa Protein ... lng cỏc phõn t nc kt hp vi protein s gim xung Cui cựng, khụng cũn nc kt hp vi protein to thnh dung dch ho tan v protein bt u kt ta õy cũn c gi l tin trỡnh mt nc ca protein Sau nh t t ht ammonium...
- 80
- 499
- 0