... lên.1.4.2. Kỹthuật Real- time PCR 1.4.2.1. Nguyên lý Real- timePCR là PCR tại thời điểm thực, nghĩa là quá trình khuếch đại DNA đang diển ra theo từng chu kỳ nhiệt được theo dõi trực tiếp. Real- timePCR ... nguyên Cyfra 21-1 bằng kỹthuật phage display.- Đã xây dựng được phương pháp định lượng kháng nguyên bằng kỹthuật Real- timePCR và kỹthuật phage display.- Đã ứng dụng kỹthuật định lượng kháng ... này.2.2.6. Phương pháp Real- time PCR Tạo Template cho Rea-ltimePCRViện Đại học Mở Hà Nội Khoa CNSH26Đinh Thị Thu Hằng Lớp KSCNSH 06_01Mẫu CpNồng độ DNA theo Real- time PCR Nồng độ kháng nguyên...
... virales611•Độ đặc hiệu và độ nhạy tốt so vơ kỹthuật kinh điển: kỹthuật nested DNA PCR, RT PCR và kỹthuật bDNA)•Nguỡng phát hiện : 400 cp/mL*, kỹthuật thực hiện trên 200 µl huyết thanh•Không ... virales Kỹ thuật kinh điển trong chẩn đóan nhiễm HIV ở trẻ-RT PCR/ b-DNA-Giá thành đắt-Nested-DNA PCR (gen: Gag, Pol và/hoặcEnv)-Đắt, kỹthuật phức tạp-Nuôi cấy và phân lập virus-Đắt, kỹthuật ... sánh phương pháp chẩn đoán HIV ở trẻ em•Phương pháp kinh điển nested DNA PCR •So sánh với kỹthuậtrealtime RT PCR thực hiện trên gene LTR (theo ANRSprotocol)•Mẫu bệnh phẩm:•Huyết thanh...
... pháp Real - time PCR là một trong những cải tiến mới nhất của kỹthuật PCR. Phương pháp Real - timePCR rút ngắn thời gian phân tích kết quả. Khả năng định lượng trong kỹthuậtReal - timePCR ... pháp Real - time PCR. - Khảo sát tính định lượng của phương pháp Real - time PCR. - Khảo sát độ nhạy giữa phương pháp Real – timePCR và Non Stop Nested PCR. - Ứng dụng phương pháp Real - time ... hợp 48 µl Real - timePCR và hỗn hợp 48 µl Non Stop Nested PCR. Đối với chuẩn, hút 2 µl mỗi chuẩn cho vào 48 µl hỗn hợp Real - time PCR. Tiến hành thực hiện phản ứng Real - timePCR và Non...
... THƯ VIỆN Hình 2.2: Nguyên tắc real- timePCR sử dụng TaqMan probe 2.3.6 Phương pháp tối ưu hóa phản ứng real- timePCR [17,21] Phản ứng real- timePCR thường chịu nhiều ảnh hưởng của các ... điểm lớn nhất là độ nhạy không cao bằng real- time PCR. Với ưu điểm trên và có thể phát hiện chính xác nồng độ virus đột biến trong quần thể, real- timePCR được xem là công cụ hữu hiệu nhất với ... biến tại rt180 và rt204 kháng LAM của HBV sử dụng kỹthuật PCR- RFLP có đề tài nghiên cứu của Nguyễn Chí Vinh [22]; sử dụng phương pháp real- timePCR có công trình nghiên cứu của Nguyễn Sử Minh...
... Nguyên tắc 17 2.4.3.4. Hệ thống Real - timePCR 172.4.3.5. Phương pháp phát hiện tín hiệu Real - timePCR 18 2.4.3.6. Nguyên lý định lượng của kỹthuậtReal - timePCR 222.4.3.7. Ưu và nhược điểm ... WSSV quantification of Real - timePCR with highly repeated results.• Comparision the sensitivity of Real - timePCR with Non Stop Nested PCR. • Application of Real - timePCR to detect and quantify ... 293.4.3. Tiến hành thực hiện Real - timePCR 303.4.3.1. Chuẩn bị hỗn hợp để thực hiện phản ứng Real - timePCR 30 3.4.3.2. Thiết lập chương trình thực hiện Real - timePCR trên phần mềm máy iCycler...
... phương pháp Real- time Kĩ thuật tách chiết ARN Kĩ thuật tổng hợp cDNA với mồi ngẫu nhiên Kỹ thuậtReal - timePCR sử dụng Taqman Probe phát hiện và đinh lượng HCV-RNA. Kĩ thuật Real- timePCR sử ... áp dụng rộng rãi. Ở Việt Nam phổ biến hai kỹthuật xác định genotypes HCV: Real- timePCR (RT -PCR) và kỹthuật giải trình tự gen (sequencing). Kỹthuật Sequencing trong chuẩn đoán có nhiều ... ra chủng virut mới) 1.3. Các kỹthuật xét nghiệm xác định kiểu gen HCV Hiện nay kỹthuật được ứng dụng trong xác định kiểu HCV ở Việt Nam là kỹthuật Real- time PCR và giải trình tự gen ( InoLIPA...
... pháp sàng lọc sản phẩm biến đổi gen bằng Real- TimePCR với phương pháp PCR truyền thống. - Xác định phương pháp định lượng bằng kĩ thuật Real- TimePCR với hóa chất là thuốc nhuộm SYBR Green ... 8.4.Nguyên tắc định lượng bằng kĩ thuật Real- timePCR 28 8.4.1. Quan hệ định lượng 28 8.4.2. Thiết kế thí nghiệm 29 8.4.3. Phân tích dữ liệu Real- timePCR 30 8.4.4. Tính toán hàm lượng GMO ... khuếch đại nucleotide (PCR- based method) - Quantitative competitive PCR (QC -PCR) - Real- timePCR Nhóm 2: Phương pháp dựa trên protein (Protein-based method) - Kĩ thuật ELISA ...
... pháp Real- TimePCR Phản ứng Real- TimePCR sử dụng TaqMan probe được thiết lập với 5 µl DNA-CMV với 20 µl master mix pha từ iTaq DNA Polymerase (Bio-Rad), phản ứng Real- TimePCR sử dụng PCR Amp/Cycle ... probe 1.10.5. Một số thuật ngữ khác 1.10.5.1. Chu kỳ ngưỡng (threshold cycle-Ct) [2] Là khái niệm trung tâm của kỹthuậtRealTime PCR. Nguyên tắc định lượng của kỹthuật này là dựa vào một ... tiềm ẩn. Real- TimePCR là một cải biên của phương pháp PCR dùng để định lượng có thể xác định chính xác số lượng của CMV trong cơ thể, thậm chí ở những vị trí đặc hiệu. KỹthuậtPCR có thể...
... Sorbent Assay) Đây là kỹthuật khá nhạy và đơn giản, cho phép xác định kháng nguyên hoặc kháng thể ở nồng độ rất thấp (0,1 ng / ml). So với với các kỹthuật miễn dịch khác thì kỹ thuật này rẻ tiền ... 3.2 Vật liệu nghiên cứu 14 3.2.1 Vật liệu dùng trong kỹthuật ELISA phát hiện PVX, PVY và PLRV 14 3.2.2 Vật liệu dùng trong kỹthuật RT -PCR để phát hiện PLRV 15 3.2.2.1 Vật liệu dùng trong ... sản xuất thử kháng huyết thanh tại trƣờng Đại học Nông Nghiệp 1 Hà Nội. Kỹthuật ELISA đƣợc sử dụng từ năm 1990, kỹthuậtPCR bắt đầu áp dụng từ năm 1995 để chẩn đóan bệnh. - Tại Trung tâm Nghiên...
... report.Quantitative real- timePCR (qPCR) is generally con-sidered the “gold-standard” assay for measuring geneexpression and is ofte n used to confirm microarr ay data[11]. qPCR is the most sensitive ... microarrayanalysis). YD: Experiments (cell culture and quantitative real- ti me PCR analysis). YF: Experiments (cell culture and quantitative real- time PCR analysis). MI: Experiments (analysis with antibody). ... quantitative RT -PCR reliability. Exp Mol Pathol 2009, 87:146-51.13. Provenzano M, Mocellin S: Complementary techniques: validation of geneexpression data by quantitative realtime PCR. Adv Exp...