Kỹ thuật Real time PCR chẩn đóan sớm HIV trên trẻ em

Trang 1

Kỹ thuật Real time PCR chẩn đóan sớm HIV trêntrẻ em

Eric NerrienetHIV/Hepatitis LaboratoryIP Cambodia, Phnom Penh

Agence Nationale de recherches sur le Sida et les hépatites virales

Tình nhiễm HIV ở Campuchia

• Tần suất nhiễm HIV:

Trang 2

-Nested-DNA PCR (gen: Gag, Pol và/hoặc Env)-Đắt, kỹ thuật phức tạp

-Nuôi cấy và phân lập virus

-Đắt, kỹ thuật phức tạp, mất nhiều thời gian-Cần labo an tòan mức độ 3

Mục tiêu

Xây dựngChuẩn hóa

Đánh giáKỹ thuật real time PCR

Để chẩn đoán sớm, giá thành thấp ở trẻ sinh ra từ mẹ nhiễm HIV

Trang 3

2 1042000

200

Trang 4

• Xây dựng và chuẩn hóa kỹ thuật

• Nhóm nghiên cứu ANRS(AC11/AC12)trong việc định lượng HIV ở các nước phía Nam bán cầu

• Trên 10 phòng thí nghiệm virus ở Pháp

• Châu Phi: Cote d’Ivoire, Cameroon, Senegal, Burkina Faso, Central African Republic

• Đông Nam Á: Việt Nam và Cambodia (bắt đầu từ tháng 1-7/2005)

Kết quả

• Ứng dụng đầu tiên ở Campuchia

•từ 3/2005: Chẩn đoán HIV-1 sớm ở trẻ sinh từ mẹ nhiễm HIV• Đánh giá tại Campuchia

•9/2005: Kiểm định của ANRS•11/2005: Kiểm định của NIH

• So sánh phương pháp chẩn đoán HIV ở trẻ em

•Phương pháp kinh điển nested DNA PCR

•So sánh với kỹ thuật real time RT PCR thực hiện trên gene LTR (theo ANRSprotocol)

Trang 5

RNA +

RNA-Real RT PCR

Kết quả 2

264 trẻ sinh ra từ mẹ nhiễm HIV ở Cambodia và Việt Nam

Kết quả nồng độ HIV định lượng

Trang 6

RT PCR và kỹ thuật bDNA)

Kết luận 1

•Việc theo dõi chỉ số virus học (nồng độ HIV) bắt đầu thực hiện được ởCampuchia

Nhằm chẩn đoán sớm nhiễm HIV ở trẻ em sinh ra từ mẹ nhiễm HIV

và cũng để

đánh giá hiệu quả điều trị kháng virus

Đánh giá biến chứng/tuân thủ điều trị bằng HAART của bệnh nhân

Phát hiện sớm thất baị điều trị do xuất hiện đột biến kháng thuốc

Hỗ trợ cho nghiên cứu và trong áp dụng thường quy

Trang 7

Định hướng

Phát triển kỹ thuật lấy mẫu trên giấy thấm trong việc xác định nồng độ virus và tìm đột biến kháng thuốc một cách dễ dàng hơn và phổ

biến ở vùng quê Campuchia

Xác định qui trình chẩn đoán, đóng góp cho việc phát hiện sớm trẻnhiễm HIV

Cám ơn sự quan tâm của quí vị.