... kỳ n là 2n.[6]Vd: Sau 20 chu kỳ có tới trên 30 triệu bản của 1 đoạn DNA được nhân lên.1.4.2. Kỹthuật Real- time PCR 1.4.2.1. Nguyên lý Real- timePCRlàPCR tại thời điểm thực, nghĩa là quá ... nguyên Cyfra 21-1 bằng kỹthuật phage display.- Đã xây dựng được phương pháp định lượng kháng nguyên bằng kỹthuật Real- timePCR và kỹthuật phage display.- Đã ứng dụng kỹthuật định lượng kháng ... chậm lại và bước vào giai đoạn bão hoà.[6]1.4.2.3. Ưu điểm của Real- time PCR Ưu điểm chính của Real- timePCR so với PCR truyền thống là cho phép xác định số lượng bản sao khuôn mẫu ban đầu với...
... virales611•Độ đặc hiệu và độ nhạy tốt so vơ kỹthuật kinh điển: kỹthuật nested DNA PCR, RT PCR và kỹthuật bDNA)•Nguỡng phát hiện : 400 cp/mL*, kỹthuật thực hiện trên 200 µl huyết thanh•Không ... virales Kỹ thuật kinh điển trong chẩn đóan nhiễm HIV ở trẻ-RT PCR/ b-DNA-Giá thành đắt-Nested-DNA PCR (gen: Gag, Pol và/hoặcEnv)-Đắt, kỹthuật phức tạp-Nuôi cấy và phân lập virus-Đắt, kỹthuật ... sánh phương pháp chẩn đoán HIV ở trẻ em•Phương pháp kinh điển nested DNA PCR •So sánh với kỹthuậtrealtime RT PCR thực hiện trên gene LTR (theo ANRSprotocol)•Mẫu bệnh phẩm:•Huyết thanh...
... pháp Real - time PCR là một trong những cải tiến mới nhất của kỹthuật PCR. Phương pháp Real - timePCR rút ngắn thời gian phân tích kết quả. Khả năng định lượng trong kỹthuậtReal - timePCR ... pháp Real - time PCR. - Khảo sát tính định lượng của phương pháp Real - time PCR. - Khảo sát độ nhạy giữa phương pháp Real – timePCR và Non Stop Nested PCR. - Ứng dụng phương pháp Real - time ... hợp 48 µl Real - timePCR và hỗn hợp 48 µl Non Stop Nested PCR. Đối với chuẩn, hút 2 µl mỗi chuẩn cho vào 48 µl hỗn hợp Real - time PCR. Tiến hành thực hiện phản ứng Real - timePCR và Non...
... THƯ VIỆN Hình 2.2: Nguyên tắc real- timePCR sử dụng TaqMan probe 2.3.6 Phương pháp tối ưu hóa phản ứng real- timePCR [17,21] Phản ứng real- timePCR thường chịu nhiều ảnh hưởng của các ... hơn là áp dụng vào thực tiễn và nhược điểm lớn nhất là độ nhạy không cao bằng real- time PCR. Với ưu điểm trên và có thể phát hiện chính xác nồng độ virus đột biến trong quần thể, real- timePCR ... nghiệm, để đảm bảo các cặp mồi và probe được sử dụng trong phản ứng real- time PCR là đặc hiệu cho HBV, các phản ứng real- timePCR giữa các cặp mồi và probe cùng với DNA tách chiết của một số...
... Nguyên tắc 17 2.4.3.4. Hệ thống Real - timePCR 172.4.3.5. Phương pháp phát hiện tín hiệu Real - timePCR 18 2.4.3.6. Nguyên lý định lượng của kỹthuậtReal - timePCR 222.4.3.7. Ưu và nhược điểm ... WSSV quantification of Real - timePCR with highly repeated results.• Comparision the sensitivity of Real - timePCR with Non Stop Nested PCR. • Application of Real - timePCR to detect and quantify ... 293.4.3. Tiến hành thực hiện Real - timePCR 303.4.3.1. Chuẩn bị hỗn hợp để thực hiện phản ứng Real - timePCR 30 3.4.3.2. Thiết lập chương trình thực hiện Real - timePCR trên phần mềm máy iCycler...
... kỳ n là 2n.[6]Vd: Sau 20 chu kỳ có tới trên 30 triệu bản của 1 đoạn DNA được nhân lên.1.4.2. Kỹthuật Real- time PCR 1.4.2.1. Nguyên lý Real- timePCRlàPCR tại thời điểm thực, nghĩa là quá ... trực tiếp. Real- timePCR gồmhai quá trình diễn ra đồng thời:- Quá trình khuếch đại DNA bằng PCR - Đo độ phát quang tỷ lệ thuận với số lượng phân đoạn DNA tạo thành.Hệ thống Real- timePCR bao ... dòng người1.3.3.3. Phương pháp sản xuất kháng thể đơn dòng- Kỹthuật hybridoma- Tạo mảnh kháng thể đơn dòng bằng kỹthuật gene- Kỹthuật phage display (được dùng để tạo kháng thể đơn dòng dạng...
... Sorbent Assay) Đây làkỹthuật khá nhạy và đơn giản, cho phép xác định kháng nguyên hoặc kháng thể ở nồng độ rất thấp (0,1 ng / ml). So với với các kỹthuật miễn dịch khác thì kỹ thuật này rẻ tiền ... phát hiện. Hai kỹthuật ELISA đƣợc dùng nhiều làkỹthuật ELISA trực tiếp (direct Double Antibody Sandwich - ELISA) và ELISA gián tiếp (Indirect ELISA). Các enzyme thƣờng dùng là β-galactosidaze, ... tây tại Đà Lạt là 856 ha với năng suất 98 tạ / ha đạt sản lƣợng 8425 tấn (năm 2004). Đà Lạt đƣợc xem là địa phƣơng có kỹthuật canh tác rất cao, ngƣời dân đã biết áp dụng các kỹthuật hiện đại,...
... chế. Vào những năm cuối thế kỷ 20, kỹthuật sinh học phân tử ra đời và có tốc độ phát triển nhanh chóng, đặc biệt là kĩ thuậtPCR mà điển hình là Real- timePCR đã mở ra một kỷ nguyên mới về ... nghĩa: RealTimePCR (RT PCR) là một kĩ thuật dùng để định lượng sự tích lũy DNA ngay khi phản ứng khuếch đại đang xảy ra. I.2.2 Nguyên lí hoạt động: RT PCR có khả năng định lượng là nhờ ... tương tự như trên. II.2.2.3 Sử dụng Real- timePCR để xác định hiện tượng kháng thuốc: Sau bước khuếch đại mẫu ta tiếp tục quá trình chạy Real- time PCR để xác định mầm bệnh. Từ mẫu đã khuếch...