biến nạp sản phẩm ghép nối gen vào tế bào khả biến e coli dh 5α bằng phương pháp sốc nhiệt
Hoàn thiện quy trình biến nạp đoạn dna vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5
... sinh vi khuẩn E. coli DH5 α môi trƣờng LB 27 3.4.4 Chuẩn bị tế bào khả nạp 27 3.4.5 Biến nạp plasmid pBluescript vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5 α phƣơng pháp sốc nhiệt (theo quy trình ... Site OD Optical Density PCR Polymerase Chain Reaction RE Restriction Enzyme RNA Ribonucleic acid RFLP Restriction fragment length polymorphism SDS Sodium dodecyl sulfate TAE Tris Acetate EDTA ... blunt-end cho sản phẩm PCR 35 3.4.9 Thiết lập phản ứng nối plasmid đoạn DNA đầu (phản ứng nối blunt-end) 36 3.4.10 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5 α khả nạp (theo quy...
- 23
- 1,336
- 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coli DH5α
... (catabolyte gen activator protein) hay CRP (cAMP recepter protein) phức hợp cAMPCAP cố định promoter làm tăng khả lyên kết RNA polymerase với promoter Nhằm trì tồn vector bacteriophage tế bào chủ, ... polymerase (tổng hợp) 5’ exonuclease 5’ 3’, exonuclease (thủy giải) 3’ 5’ 3’ Enzym DNA fragment Klenow enzym DNA polymerase I bị cắt bỏ tiểu đơn vị nhỏ (nhờ protease), phần chịu trách nhiệm exonuclease ... pháp Calcium chloride Sambrook cộng (1989), đƣa phƣơng pháp chuẩn bị tế bào E. coly khả nạp, biến nạp plasmid vào tế bào theo phƣơng pháp hóa chất sốc nhiệt, sau ông đƣa công thức tính hệ số biến...
- 74
- 3,299
- 15
Tài liệu HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α pot
... sinh vi khuẩn E. coli DH5 α môi trƣờng LB 27 3.4.4 Chuẩn bị tế bào khả nạp 27 3.4.5 Biến nạp plasmid pBluescript vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5 α phƣơng pháp sốc nhiệt (theo quy trình ... Site OD Optical Density PCR Polymerase Chain Reaction RE Restriction Enzyme RNA Ribonucleic acid RFLP Restriction fragment length polymorphism SDS Sodium dodecyl sulfate TAE Tris Acetate EDTA ... blunt-end cho sản phẩm PCR 35 3.4.9 Thiết lập phản ứng nối plasmid đoạn DNA đầu (phản ứng nối blunt-end) 36 3.4.10 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5 α khả nạp (theo quy...
- 68
- 449
- 1
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 3 pptx
... tế bào khả nạp phƣơng pháp hóa học, tế bào khả nạp tế bào khả nạp giữ -70oC với glycerol thời gian tháng - Hoàn thiện đƣợc quy trình biến nạp plasmid pBluescript SK(+/-) vào vi khuẩn E coli DH5 α ... Genetic Engineering Techniques Các website http://www.protocol-online.org/prot/Mmolecular_Biology/ http://brahms.chem.uic.edu/~cgpage/protocol/cloning.html A 51 http://core.eai.edu/biol/foruvellm/farwelebpage/Biotech3100/pvector.200.pfd ... plasmid enzyme cắt giới hạn EcoRV DC1 EcoRV DC2EcoRV Hình 4.6 Kết điện di sản phẩm cắt plasmid EcoRV gel 1% (lần 1) (DC1) sản phẩm li trích plasmid kit; (EcoRV 1) sản phẩm cắt đươc enzyme EcoRV;...
- 22
- 492
- 0
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 2 doc
... Calcium chloride Sambrook cộng (1989), đƣa phƣơng pháp chuẩn bị tế bào E coli khả nạp, biến nạp plasmid vào tế bào theo phƣơng pháp hóa chất sốc nhiệt, sau ông đƣa công thức tính hệ số biến nạp N = ... polymerase (tổng hợp) 5’ 3’ 5’ exonuclease 5’ 3’, exonuclease (thủy giải), 3’ Enzym DNA fragment Klenow enzym DNA polymerase I bị cắt bỏ tiểu đơn vị nhỏ (nhờ protease), phần chịu trách nhiệm exonuclease ... plasmid số tế bào không tiếp nhận DNA plasmid 26 3.4.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E coli DH5 α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn E coli DH5 α Khả nạp Plasmid Bluescript II SK (+/-) Sốc nhiệt...
- 23
- 492
- 0
xác định nội lực thực tế trong cáp xiên của cầu dây văng bằng phương pháp tạo xung dao động
Công trình giao thông, thủy lợi
... tham khảo [1] Chatterjee P K., Datta T K., Surana C S Vibration of Cable - Stayed Bridges under moving vehicle SEI, Vol.4 - No 2, May, 1994 [2] Ray W Clough, Joseph Penzien Dynamic of Structures ... Structures Mc Graw - Hill Book Co Singapore, 1993 [3] John C Wilson and Wayne Gravrlle Modelling of a Cable - stayed Bridges for Dynamic Analysis Earthquake Engineering and Structural Dynamics Vol 20, ... 11/2005 CT .v n om au du on go nl in e c w w w c CT Cầu Kiền Hình Biểu đồ dao động dây văng cầu Bính cầu Kiền hệ thống Cable - stayed and Deck Vibration Measuring ghi tr ờng Tạp chí Khoa học...
- 11
- 1,360
- 5
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.Coly DH5α
... (catabolyte gen activator protein) hay CRP (cAMP recepter protein) phức hợp cAMPCAP cố định promoter làm tăng khả lyên kết RNA polymerase với promoter Nhằm trì tồn vector bacteriophage tế bào chủ, ... polymerase (tổng hợp) 5’ exonuclease 5’ 3’, exonuclease (thủy giải) 3’ 5’ 3’ Enzym DNA fragment Klenow enzym DNA polymerase I bị cắt bỏ tiểu đơn vị nhỏ (nhờ protease), phần chịu trách nhiệm exonuclease ... pháp Calcium chloride Sambrook cộng (1989), đƣa phƣơng pháp chuẩn bị tế bào E. coly khả nạp, biến nạp plasmid vào tế bào theo phƣơng pháp hóa chất sốc nhiệt, sau ông đƣa công thức tính hệ số biến...
- 74
- 2,483
- 5
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9 pptx
... tƣợng biến nạp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo 2.3.2 Sự điều hoà gen operon Lac E. coly .5 2.3.3 Chuẩn bị tế bào khả nạp ... đoạn DNA đầu (phản ứng nối blunt-end) .36 3.3.11 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5 α khả nạp 37 3.3.12 Kiểm tra kết chiết tách plasmid sử dụng enzym BamHI Hind III, ... khuẩn biến nạp sốc nhiệt 90 giây 43 Hình 4.4 Kết cấy vi khuẩn biến nạp sốc nhiệt 60 giây .44 Hình 4.5 Kết cấy vi khuẩn biến nạp đối chứng 45 Hình 4.6 Kết cấy vi khuẩn biến nạp tỉ...
- 8
- 295
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 8 pptx
... Wolgang Schumann, 1995, Genetic Enginereering Techniques Các website http://faculty.plattsbuggh.edu/donald-slysh/transformation.html 12.http://www.mun.ca/Biochem/course/4103/topic/transrormation.html ... tan phần kết tủa Thêm 20μl glycerol 98% vào trữ -700C Biến nạp plasmid vào khả nạp Bƣớc 1: Hút 3µl dịch huyền phù tế bào competen cell đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, thêm 0.5µl DNA plasmid ... vào tế bào chủ DH5 α Quy trình sử dụng cho thí nghiệm tạo dòng áp dụng trực tiếp phòng thí nghiêm Các bƣớc quy trình Chuẩn bị khả nạp Dịch tế bào chuẩn bị để làm khả nạp phải có mật độ tế bào...
- 8
- 284
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 7 pdf
... plasmid enzym cắt giới hạn EcoRV EcoRV DC1 DC2 DC3 DNA plasmid 3.0kb Hình 4.12 Kết điện di sản phẩm cắt plasmid EcoRV gel agarose 0.8% (EcoRV) sản phẩm cắt enzym EcoRV plasmid tách chiết từ tỉ lệ biến ... phản ứng nối 4.6 Kết biến nạp plasmid tái tổ hợp Thực phản ứng blunt-end sản phẩm PCR, tinh sản phẩm phản ứng blunt-end, nối đoạn sản phẩm PCR vào plasmid ta đƣợc plasmid tái tổ hợp Biến nạp plasmid ... E. coly DH5 α khả nạp, thu đƣợc kết nhƣ sau 52 a b Hình 4.16 Kết cấy vi khuẩn biến nạp plasmid tái tổ hợp với đoạn DNA 629 bp môi trƣờng LB/amp(100μg/ml)/ X-gal/IPTG (a) Biến nạp với tỉ lệ tế bào...
- 8
- 333
- 2
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 6 doc
... lọc thể biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml 4.2.2 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml Hình 4.5 Kết cấy vi khuẩn biến nạp đối chứng Biến nạp có tế bào khả nạp plasmid ... IPTG, ủ qua đêm 37oC 43 a b c DC Hình 4.4 Kết cấy vi khuẩn biến nạp sốc nhiệt 60 giây (a) biến nạp với tỉ lệ tế bào khả nạp plasmid theo thể tích(μl) 30 :3 phục hồi 800μl môi trường LB lỏng, cấy ... độ kháng sinh 60µg/ ml a b c DC Hình 4.3 Kết cấy vi khuẩn biến nạp sốc nhiệt 90 giây (a) biến nạp với tỉ lệ tế bào khả nạp plasmid theo thể tích (μl) 30 :3 phục hồi 800μl môi trường LB lỏng,...
- 8
- 339
- 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 5 pot
... tinh GFX thu lại 3μl elution buffer 3.3.11 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5 α khả nạp (theo quy trình Sambrook cộng sự, 1989 có chỉnh sửa) Thực biến nạp theo quy trình sau Hút ... (0.5mM), (Ferretti Sgaramella 1981), nồng độ enzym lygase cao (50unit/ml), lƣợng DNA insert vector cao, tỉ lệ số mol vector đoạn DNA insert khoảng 1: 3-10 Trong phản ứng nối blunt-end thêm vào ... 3: Cho capture buffer vào eppendorf chứa gel với tỷ lệ 10 mg gel ≈ 10µl capture buffer Bƣớc 4: Đậy nắp lại ủ 60oC agarose tan hết (5 – 15 phút) Bƣớc 5: Chuẩn bị cột GFX, đặt vào eppendorf tƣơng...
- 8
- 308
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 4 pps
... trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5 α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5 α Khả nạp Plasmid Bluescript II SK (+/-) Sốc nhiệt ... tích khả nạp đủ cho lần sử dụng 3.3.5 Biến nạp plasmid pBluescript vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5 α phƣơng pháp sốc nhiệt (theo quy trình Sambrook cộng sự, 1989 có sửa đổi) Chúng tiến hành biến nạp ... 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Nhiễm sắc thể + CaCl2 + DNA plasmid Màng tế bào trở nên khả nạp sốc nhiệt ổn định tế bào Màng tế bào hồi phục...
- 8
- 369
- 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 3 ppt
... pháp Calcium chloride Sambrook cộng (1989), đƣa phƣơng pháp chuẩn bị tế bào E. coly khả nạp, biến nạp plasmid vào tế bào theo phƣơng pháp hóa chất sốc nhiệt, sau ông đƣa công thức tính hệ số biến ... axit nucleic cần cho vào môi trƣờng phản ứng mồi axit nucleic DNA polymerase I(từ E. coly) chuỗi polypeptide với ba hoạt động enzym: DNA polymerase (tổng hợp) 5’ exonuclease 5’ 3’, exonuclease (thủy ... hợp DNA polymerase 5’ 3’ hoạt động thủy giải exonuclease 3’ 5’ 2.5.2.2 Terminal transferase Enzym đƣợc ly trích từ tuyến ức bê Terminal transferase xúc tác phản ứng gắn deoxynucleotide vào đầu 3’OH...
- 8
- 308
- 0
Tìm thêm: hệ việt nam nhật bản và sức hấp dẫn của tiếng nhật tại việt nam xác định các nguyên tắc biên soạn khảo sát các chuẩn giảng dạy tiếng nhật từ góc độ lí thuyết và thực tiễn khảo sát chương trình đào tạo của các đơn vị đào tạo tại nhật bản khảo sát chương trình đào tạo gắn với các giáo trình cụ thể xác định thời lượng học về mặt lí thuyết và thực tế điều tra với đối tượng sinh viên học tiếng nhật không chuyên ngữ1 khảo sát thực tế giảng dạy tiếng nhật không chuyên ngữ tại việt nam xác định mức độ đáp ứng về văn hoá và chuyên môn trong ct phát huy những thành tựu công nghệ mới nhất được áp dụng vào công tác dạy và học ngoại ngữ mở máy động cơ lồng sóc mở máy động cơ rôto dây quấn hệ số công suất cosp fi p2 đặc tuyến hiệu suất h fi p2 đặc tuyến tốc độ rôto n fi p2 đặc tuyến dòng điện stato i1 fi p2 động cơ điện không đồng bộ một pha sự cần thiết phải đầu tư xây dựng nhà máy từ bảng 3 1 ta thấy ngoài hai thành phần chủ yếu và chiếm tỷ lệ cao nhất là tinh bột và cacbonhydrat trong hạt gạo tẻ còn chứa đường cellulose hemicellulose chỉ tiêu chất lượng theo chất lượng phẩm chất sản phẩm khô từ gạo của bộ y tế năm 2008