Nghiên cứu khả năng nhân nhanh và ra rễ chồi chuối tiêu từ nguồn nhập nội bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VI THỊ NHUNG Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH VÀ RA RỄ CHỒI CHUỐI TIÊU TỪ NGUỒN NHẬP NỘI BẰNG PHƯƠNG PHÁP NI CẤY MƠ TẾ BÀO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Khoa: Công nghệ Sinh học Cơng nghệ Thực phẩm Khóa học: 2010-2014 Thái Nguyên, 2014 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VI THỊ NHUNG Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH VÀ RA RỄ CHỒI CHUỐI TIÊU TỪ NGUỒN NHẬP NỘI BẰNG PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chun ngành: Cơng nghệ Sinh học Khoa: Cơng nghệ Sinh học Cơng nghệ Thực phẩm Khóa học: 2010-2014 Giảng viên hướng dẫn: PGS.TS Ngơ Xn Bình Khoa CNSH – CNTP, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên ThS Lê Thị Hảo Bộ môn Công nghệ tế bào, Viện Khoa học Sự Sống Thái Nguyên, 2014 LỜI CẢM ƠN Trong thời gian vừa qua trí nhà trường q thầy khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm, em hoàn thành đề tài tốt nghiệp: “Nghiên cứu khả nhân nhanh rễ chồi chuối tiêu từ nguồn nhập nội phương pháp nuôi cấy mô tế bào” Để đạt kết ngày hôm em xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa thầy cô giáo môn thầy cô Bộ môn Công nghệ tế bào tạo điều kiện giúp đỡ em suốt thời gian qua Em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TS Ngơ Xuân Bình Th.S Lê Thị Hảo tận tình bảo, hướng dẫn em thời gian thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, đến người thân ln động viên giúp đỡ tạo điều kiện cho em vật chất lẫn tinh thần thời gian qua Cảm ơn tập thể 42 CNSH, người bạn học em bước qua khoảng thời gian khó khăn Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày tháng năm 2014 Sinh viên Vi Thị Nhung DANH MỤC CÁC BẢNG TRONG KHÓA LUẬN Trang Bảng 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BAP đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 23 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 25 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp BAP với IAA đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 26 Bảng 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi chuối tiêu nhập nội 28 Bảng 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi chuối tiêu nhập nội 29 DANH MỤC CÁC HÌNH TRONG KHĨA LUẬN Trang Hình 2.1 Q trình phân hóa tế bào Hình 2.2 Q trình phản phân hóa tế bào Hình 3.1 Sơ đồ nghiên cứu 17 Hình 4.1 Biểu đồ thể ảnh hưởng BAP đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 24 Hình 4.2 Biểu đồ thể ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 25 Hình 4.3 Biểu đồ thể ảnh hưởng kết hợp BAP IAA đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 26 Hình 4.4 Biểu đồ thể ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi chuối tiêu nhập nội 28 Hình 4.5 Biểu đồ thể ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi chuối tiêu nhập nội 30 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT BAP ĐC CT CS TB Kinetin IAA MS NAA IBA GA3 : 6-benzylaminopurine : Đối chứng : Cơng thức : Cộng : Trung bình : Furfurylaminopurine : Indole-3-acetic acid : Murachinge and Skoog : Naphthaleneacetic acid : Indole-3-butyric acid : Gibberellin MỤC LỤC Trang PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung chuối 2.1.1 Nguồn gốc 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Đặc điểm hình thái 2.1.4 Giá trị chuối 2.2 Khái quát nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.2.1 Khái niệm 2.2.2 Cơ sở nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.2.3 Các nhân tố ảnh hưởng tới trình nhân giống chuối tiêu nhập nội PHẦN 3: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 16 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 16 3.3 Nội dung nghiên cứu 16 3.4 Phương pháp nghiên cứu 17 3.4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 17 3.4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng đến khả rễ chồi chuối tiêu nhập nội 19 3.4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể đến đến sinh trưởng, phát triển chuối tiêu nhập nội giai đoạn sau nuôi cấy mơ ngồi vườn ươm 20 3.5 Các tiêu theo dõi sau nuôi cấy 21 3.6 Điều kiện thí nghiệm 22 3.7 Phương pháp xử lý số liệu 22 PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 23 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả rễ giống chuối tiêu nhập nội 27 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng giá thể đến tỷ lệ sống chuối tiêu nhập nội ni cấy mơ ngồi vườn ươm 30 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 32 5.1 Kết luận 32 5.2 Kiến nghị 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 I Tài liệu tiếng Việt 33 II Tài liệu tiếng Anh 35 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Cây chuối có tên khoa học Musa Paradisiaca L., thuộc họ chuối Musacae [5] Chúng gồm thân thảo lớn có rễ, sống lâu năm, mọc xoắn ốc có bẹ ơm lấy tạo thành thân giả, phiến lớn [31], ăn ngắn ngày, loại bổ dưỡng giá trị nên có quy mơ sản xuất lớn nước ta Tại định phê duyệt quy hoạch phát triển rau hoa cảnh đến năm 2010, tầm nhìn 2020 Bộ Nơng nghiệp Phát triển nơng thôn, chuối xác định loại ăn xuất chủ lực nước ta Theo quy hoạch, đến năm 2020, tổng sản phẩm chuối xuất tương đương dứa đạt 100 nghìn kim ngạch xuất đứng sau dứa long đạt 35 triệu USD [1] Nằm trung tâm phát sinh chuối nên Việt Nam có tập đồn giống chuối đa dạng Trong đó, có nhiều giống chuối tiêu triển vọng có khả đáp ứng tiêu chuẩn xuất [9] Năm 2010, Viện Khoa học Sự Sống, Trường Đại học Nông lâm tiếp nhận từ Trung tâm phát triển Vùng, Bộ Khoa học Công Nghệ giống chuối tiêu từ nguồn nhập nội Đặc điểm giống chuối có nhiều triển vọng to, màu sắc đẹp, buồng nhiều nải, chất lượng thơm ngon, bị sâu bệnh Hiện nay, cơng tác sản xuất giống chuối, phần lớn chuối thường trồng giống tách chồi Chúng có độ đồng chất lượng không cao nên chưa đáp ứng yêu cầu thị trường Trong đó, chuối sản xuất công nghệ nuôi cấy mô tế bào cho hệ số nhân giống cao, bệnh, đồng sinh trưởng khỏe Việc ứng dụng phương pháp để nhân nhanh giống chuối tiêu từ nguồn nhập nội phương pháp có ý nghĩa quan trọng cho công tác giống trồng, mang lại hiệu kinh tế cao Nhằm đáp ứng nhu cầu thực tiễn trên, tiến hành đề tài:“Nghiên cứu khả nhân nhanh rễ chồi chuối tiêu từ nguồn nhập nội phương pháp nuôi cấy mơ tế bào” 1.2 Mục đích đề tài Nghiên cứu khả nhân nhanh rễ chồi chuối tiêu từ nguồn nhập nội phương pháp nuôi cấy mô tế bào 1.3 Yêu cầu đề tài Xác định ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu từ nguồn nhập nội Xác định ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng đến khả rễ chồi chuối tiêu từ nguồn nhập nội Xác định ảnh hưởng số giá thể đến sinh trưởng, phát triển chuối tiêu nhập nội giai đoạn sau ni cấy mơ ngồi vườn ươm 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài - Ý nghĩa khoa học + Sử dụng phương pháp ni cấy mơ tế bào tìm mơi trường điều kiện thích hợp cho phát triển giống chuối + Kết nghiên cứu đưa số kỹ thuật vi nhân giống chuối tiêu nhập nội phương pháp in vitro Từ đó, đánh giá tác động số chất kích thích sinh trưởng nhân giống chuối tiêu + Bổ sung nguồn tài liệu tham khảo phục vụ nghiên cứu, giảng dạy sản xuất giống chuối tiêu thương phẩm có suất cao - Ý nghĩa thực tiễn Kết nghiên cứu góp phần hồn thiện quy trình kỹ thuật nhân giống chuối tiêu nhập nội nhằm cung cấp giống với số lượng lớn, chất lượng đảm bảo, đồng thời giữ đặc tính di truyền chọn lọc 29 Qua bảng 4.4 hình 4.4 chúng tơi nhận thấy: Sau 20 ngày ni cấy, cơng thức thí nghiệm rễ hình thành Số rễ dao động từ 2,84 đến 5,10 rễ/chồi, chiều dài trung bình rễ tăng từ 2,8cm đến 3,9cm Trong đó, mơi trường có bổ sung NAA 0,3mg/l cho trung bình số rễ/chồi cao đạt 5,10 rễ chiều dài rễ trung bình 3,5cm, rễ màu trắng, khỏe, nhiều lông hút Quan sát sinh trưởng nhận thấy phát triển tốt, xanh, thân mập Theo Nguyễn Quang Thạch cs (1995) [17] môi trường rễ tốt MS + than hoạt tính 0,2g/l Kết Lê Vũ Ngọc Hoa cs (2005) [8] môi trường vươn chồi, tạo rễ MS có bổ sung Thianin 0,4mg/l, BAP 2mg/l, AC 0,10-0,15% Cịn Nguyễn Văn Uyển cs (1993) [23] mơi trường tạo rễ MS bổ sung NAA 0,1%; nước dừa 5% Nghiên cứu cho thấy môi trường tốt rễ chuối tiêu nhập nội MS bổ sung 0,3mg/l NAA cho trung bình số rễ đạt 5,10 rễ chiều dài trung bình rễ 3,50cm Sự khác biệt thành phần môi trường nồng độ chất môi trường tạo rễ tác giả khác Bảng 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi chuối tiêu nhập nội Công thức Nồng độ Tỷ lệ rễ TB số rễ/cây Chiều dài Màu sắc rễ IBA (mg/l) (%) (rễ) TB rễ (cm) (đ/c) 0,0 100,00 5,30 2,67 Trắng nâu 0,1 100,00 5,56* 2,86ns Trắng 0,2 100,00 5,68* 4,03* Trắng 0,3 100,00 5,28ns 2,06ns Trắng 0,4 100,00 5,34ns 5,34* Trắng nâu 0,5 100,00 6,43* 3,37* Trắng LSD0,5 0,25 0,28 CV% 2,5 4,7 (Ghi chú: ns: sai khác ý nghĩa; *: sai khác có ý nghĩa) 30 Hình 4.5 Biểu đồ thể ảnh hưởng IBA đến khảả rễ chồi chuối tiêu nhập nội Kết nghiên cứu c bảng 4.5 hình 4.5 cho thấy, y, bổ b sung IBA vào môi trường ng nuôi cấy c với nồng độ tăng dần từ 0,2mg/l lên 0,5mg/l trung bình số rễ/chồồi tăng dần từ 5,56 rễ lên 6,43 rễ, chiềều dài trung bình rễ dao động từ 2,86cm cm đến đ 3,37cm Công thức tốt nhấtt phạm vi nghiên cứu thí nghiệm m cơng thức th 6, bổ sung nồng độ IBA 0,5mg/l, trung bình số s rễ/chồi cao đạtt 6,43 rễ r chiều dài trung bình rễ đạạt 3,37cm, sai khác có ý nghĩa với đốii chứng ch Tuy nhiên thí nghiệm cho rễ màu trắng, lơng hút, đầu rễ bị đen 4.3 Kết nghiên cứu c ảnh hưởng giá thể đến tỷỷ lệ sống chuối tiêu nhập nộii nuôi cấy mơ ngồi vườn ươm Trồng ng vào giá thể th giai đoạn cuối củaa trình nhân giống, gi việc đưa từ môi trường ng nhân tạo t sang môi trường tự nhiên lựa l chọn giá thể thích hợp cho sinh trưởng tr phát triển rấtt quan trọng, tr đánh giá kết cuối quy trình nghiên cứu Mỗi giá thểể có đặc tính khác Mỗi loạii trồng tr có yêu cầu khác đối vớii điều đ kiện ngoại cảnh Cây chuốii tiêu nhập nh nội dễ sinh trưởng phát triểnn phù hợp với loạii giá thể th định Do chúng tơi tiếnn hành thử th nghiệm số giá thể khác để đ tìm loại giá thể tốt cho chuốii tiêu nhập nh nội giai đoạn vườn ươm Kết thu đượcc nh sau: 31 Bảng 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể đến tỷ lệ sống chuối tiêu nhập nội Công thức (đ/c) Giá thể Đất màu (Đ/C) Đất màu+ trấu hun (7:3) Đất màu+ bã nấm (7:3) Đất màu+ trấu hun + nấm (5:3:2) Đất màu+ trấu hun + Tribat (6:3:1) 30 30 30 84,44 95,56* 90,00* Chiều cao TB (cm) 4,85 7,09* 5,67* 30 88,89ns 5,46* 30 78,89ns 5,15ns Số Tỷ lệ (cây) sống (%) LSD0,5 4,51 0,41 CV% 2,7 3,8 Qua bảng 4.6 cho thấy: Các giá thể lựa chọn đưa vào thí nghiệm thích hợp cho phát triển in vitro giai đoạn luyện Khi trồng loại giá thể khác tỷ lệ sống dao động từ 84,44% đến 95,56% chiều cao trung bình dao động từ 4,85cm đến 7,09cm Giá thể tốt thí nghiệm cơng thức 2, đất + trấu hun (7:3) cho tỷ lệ sống cao đạt 95,56%, chiều cao trung bình 7,09cm Nhận thấy công thức phù hợp giai đoạn vườn ươm chuối tiêu nhập nội Theo Nguyễn Quang Thạch cs (1995) [17] việc đưa chuối in vitro vườn ươm vụ hè thu hoàn toàn thuận lợi, tỷ lệ sống đạt 100% giá thể nghiên cứu là: Cát, đất thịt nhẹ, đất + cát + phân chuồng Nguyễn Văn Uyển cs (1993) [23] cho bầu chuối đóng đất màu trộn với phân hoai tỷ lệ 5:1 xử lý furadan (trừ tuyến trùng) giá thể thích hợp Năm 2009, Vũ Ngọc Phượng cs nhân thành công giống chuối Cavendish SP tìm giá thể thích hợp cho giống chuối bột mùn dừa (Vũ Ngọc Phượng cs, 2009) [16] Theo kết nghiên cứu giá thể tốt đất + trấu hun (7:3) cho tỷ lệ sống cao đạt 95,56% giá thể thích hợp cho chuối tiêu nhập nội vườn ươm 32 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Môi trường MS có bổ sung sucrose 30g/l; myo inositol 100mg/l; agar 5,7g/l; BAP 4mg/l IAA 0,3mg/l; pH = 5,8 thích hợp cho nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội in vitro cho hệ số nhân chồi đạt 5,03 lần chiều cao trung bình chồi đạt 2,34cm Mơi trường MS có bổ sung sucrose 30g/l; myo inositol 100 mg/l; agar 5,7g/l NAA 0,3mg/l; pH= 5,8 thích hợp cho tạo hoàn chỉnh chồi chuối tiêu nhập nội in vitro cho trung bình số rễ/cây đạt 5,10 rễ chiều dài trung bình rễ đạt 3,5cm Giá thể: Đất màu + trấu hun (7:3) giá thể thích hợp cho chuối tiêu nhập nội ni cấy mơ sinh trưởng phát triển ngồi vườn ươm cho tỷ lệ sống đạt 95,56% chiều cao trung bình chồi đạt 7,09cm 5.2 Kiến nghị Cần tiến hành thí nghiệm khảo sát thời vụ trồng, sinh trưởng, phát triển suất để kiểm tra chất lượng chuối tiêu nhập nội làm sở đề xuất công nhận giống chuối tiêu nhập nội giống chuối tiêu trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Áp dụng công nghệ sản xuất chuối tiêu nhập nội giống kỹ thuật nuôi cấy mô quy mô công nghiệp nhằm cung cấp giống phục vụ sản xuất thương phẩm 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn (2007) Quyết định phê duyệt quy hoạch phát triển rau hoa cảnh đến năm 2010, tầm nhìn 2020, Hà Nội Ngơ Xn Bình, Bùi Bảo Hồn, Nguyễn Thúy Hà (2003), Giáo trình cơng nghệ sinh học, Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thị Muội (1997), Công nghệ sinh học thực vật cải tiến giống trồng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Champion Jean ( 1963) Cây chuối ( Đỗ Ngọc An, Nguyễn Định, Trần văn Phú, Nguyễn Văn Trung Trần Thanh Vân dịch) Nxb Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 25-42 Võ Văn Chi, Dương Đức Tiếu (1978), Phân loại thực vật bậc cao, Nxb ĐH &THCN, Hà Nội Trịnh Thị Nhất Chung CS (2010) Kết nghiên cứu ứng dụng quy trình công nghệ nhân giống chuối nuôi cấy mô để nhân nhanh giống chuối tiêu đạt tiêu chuẩn xuất tuyển chọn Báo cáo khoa học Viện nghiên cứu Rau quả, Hà Nội Phạm Văn Duệ (2005), Giáo trình kỹ thuật trồng ăn quả, Nxb Hà Nội Lê Vũ Ngọc Hoa, Nguyễn Thị Diệu Hiền, Bùi Thị Ngọc Lan, Nguyễn Thanh Bình Lê Thị Thu Hồng (2005) “Kết nghiên cứu quy trình nhân nhanh chuối già bệnh phương pháp nuôi cấy mô” Kết nghiên cứu khoa học công nghệ Viện nghiên cứu ăn miền Nam2003-2004 NXB Nơng nghiệp, Tp Hồ Chí Minh, tr 17-30 Nguyễn Đăng Khôi, Hỗ Hữu Nhị , Phạm Thị Sến ( 1997), “Cây chuối nguồn tài nguyên di truyền” Nxb nông nghiệp 1997, tr 2-3 10 Nguyễn Hoàng Lộc (2007) Nhập môn công nghệ sinh học, Nxb Đại học Huế 11 Đỗ Tất Lợi (1981), Cây thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Khoa học kỹ thuật, Hà Nội 34 12 Nguyễn Trọng Lực (2009) Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống chuối (Musa spp.) phương pháp nuôi cấy mô, Trung tâm ứng dụng chuyển giao công nghệ Phú Yên, tháng 12 năm 2009 13 Trần Văn Minh, Nguyễn Văn Uyển ( 1993) “Công nghệ sinh học Những bước tiến cải thiện giống chuối” Tạp chí Khoa học cơng nghệ (32), 4/1993 tr 35-37 14 Trần Văn Minh (1997), Công nghệ tế bào thực vật, trường Đại học quốc gia TP.HCM, Nxb ĐHQG TP.HCM.) 15 Hoàng Nghĩa Nhạc, Nghiên cứu tượng biến dị nuôi cấy in vitro chuối phục vụ công tác giống địa bàn tỉnh Nghệ An, luận văn thạc sỹ Nông nghiệp, trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội - 2004 16 Vũ Ngọc Phượng, Hoàng Thị Phòng, Thái Xuân Du, Trịnh Mạnh Dũng (2009), Nhân giống in vitro chuối (CAVENDISH SP.) quy mô công nghiệp, Báo cáo khoa học - Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc năm 2009, Thái Nguyên, ngày 26 - 27 năm 2009, tr 319 - 322 17 Nguyễn Quang Thạch, (1995), Công nghệ sinh học thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 18 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật, nghiên cứu ứng dụng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 19 Nguyễn Văn Tố, Phan Thị Lài (2005), Trồng trang trại, Nxb Lao động 20 Trần Thế Tục, Cao Anh Long, Phạm Văn Cơn, Hồng Ngọc Thuận, Đồn Thế Lư (1998), Giáo trình ăn quả, Nxb Nơng nghiệp Hà Nội 21 Vũ Văn Vụ (1999), Sinh lý thực vật ứng dụng, Nhà xuất Giáo Dục, Hà Nội 22 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2006), Công nghệ sinh học tập hai (Công nghệ sinh học tế bào), NXB Giáo Dục, Hà Nội 23 Nguyễn Văn Uyển cs (1993), Nuôi mô thực vật phục vụ công tác giống trồng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 35 II Tài liệu tiếng Anh 24 Agustin B.Molina (2002) Tissue culture in the banana industry Paper presented during the International Training Course on Biotechnology for Seed and Seedling Production, 2-6 December 2002, PCARRD Headquarters, Los Bađos, Laguna, Philipines Unpublished 25 Cohen J.I., Chambers J.A (1990), Biotecnology and Biosafety: Perspective of an International Donor agency, In: Rish Assessment in Genetic Engineering: Envitromental Release of Organisms, New York, USA, pp 378-394 26 Hwang SC and Chao CP ( 2010) Current banana R & D activities in Taiwan Country report of the 7th BAPNET Steering Committee meeting in Hanoi, Vietnam 02-05 November 2010 27 Masoud Sheidai, Heywa Aminpoor1, Zahra Noormohammadi, Farah Farahani (2009), “Genetic variation induced by tissue culture in Banana (Musa acuminate L.) cultivar Cavandish Dwarf”, Geneconserve, vol.9:110 (2010) - 5pp 28 Murashige T and Skoog F (1962), “A resied medium for rapid growth and bioassays wirh tobacco tissue cultures”, Physiol Plant 29 R.V.Valmayor., R.R.C Espino and O.C Pascua ( 2002 The wild cultivated bananas of the Philipines Philippin Agriculture and Resources Research Foundation Incorporated and Bureau of Agricultural Research, Los Bađos, Laguna, Philipines 242 pp 30 Said M Khalil and A.A.M Elbanna (2003), “Highly efficient somatic embryogenesis and plant regeneration via suspension cultures of banana”, Arab J Biotech, vol 7, No (1) Jan (2004): 99-110 31 Simmond NW and K.Shepherd ( 1955) The taxonomy and orrigin of the cultivated bananas J.Linn, Soc (Bot) 1955, pp 302-312 32 S Mohan Jain, Rony Swennen (2001), Banana Improvement: Cellular, Molecular Biology, and Induced Mutations, cience Publishers, Inc 33 Stover, R.H and N.W.Simmonds ( 1987) Banana Tropical Agricultural Series, Longman Group Ltd., UK 468 pp PHỤ LỤC HÌNH ẢNH Hình ảnh 1: Chuối tiêu nhập nội CT Đ/C thí nghiệm Hình ảnh 2: Chuối tiêu nhập nội nồng độ BAP tốt Hình ảnh 3: Chuối tiêu nhập nội nồng độ kinetin 0,0mg/l Hình ảnh 4: Chuối tiêu nhập nội nồng độ kinetin tốt Hình ảnh nh 5: Công thức th BAP 4mg/l + IAA 0,0mg/l Hình ảnh 7: Chuốii tiêu nhập nh nội rễ bổ sung NAA 0,0mg/l Hình ảnh nh 6: Cơng thức th BAP 4mg/l + IAA 0,3mg/l Hình ảnh 8: Chuốii tiêu nhập nh nội rễ bổ sung NAA tốt t Hình ảnh 9: Chuốii tiêu nhập nh nội rễ bổ sung IBA 0,0mg/l Hình ảnh 11: Chuốii tiêu nhập nh nội giai đoạnn giá thể th đất Hình ảnh nh 10: Chuối Chu tiêu nhập nội rễ bổ sung IBA tốt t Hình ảnh nh 12: Chuối Chu tiêu nhập nội giai đoạnn giá thể th đất + trấấu hun (7:3) PHỤ LỤC MƠI TRƯỜNG MS (1lít) Nhóm Đa lượng Vi lượng Thành phần NH4NO3 33 KNO3 38 MgSO4 7H2O 7,4 KH2PO4 3,4 CaCl2 2H2O 8,8 CuSO4 5H2O 0,0025 KI 0,0083 CoCl2 6H2O 0,0025 MgSO4 4H2O 2,23 ZnSO4.4H20 0,86 Na2M0O4 2H2O Sắt Khối lượng (g) Nồng độ (ml/l) 50 0,0025 H3BO3 0,62 FeSO4 7H2O 1,79 Na2EDTA 1,865 Nicotinic acid 0,05 Glycine 0,2 Thiamine HCl 0,05 Pyridoxine HCl 0,05 10 Vitamins Trường Đại học Nông Lâm Khoa: Cộng hòa xã hội chủ nghĩa Việt Nam Độc lập- Tự do- Hạnh phúc Phiếu nhận xét khóa luận (Dành cho giảng viên hướng dẫn) Họ tên người nhận xét: Bộ môn giảng dạy: Tên sinh viên: .lớp: Tên đề tài khóa luận: Thuộc chuyên ngành: Ý kiến nhận xét Về ý thức sinh viên thời gian TTTN Bố cục, nội dung hình thức khóa luận Phương pháp nghiên cứu Kết đạt 4.1 Kết công tác phục vụ sản xuất (với đề tài có phục vụ sản xuất) 4.2 Kết thực chuyên đề Đánh giá chung: Khoá luận yêu cầu khoá luận tốt nghiệp Đại học Điểm: , Xếp loại: Xuất sắc; Giỏi; Khá; Trung bình; Yếu Thái Nguyên, ngày tháng năm Người nhận xét Trường Đại học Nông Lâm Cộng hòa xã hội chủ nghĩa Việt Nam Khoa: Độc lập- Tự do- Hạnh phúc Phiếu nhận xét khóa luận (Dành cho giảng viên chấm phản biện) Họ tên người nhận xét: Bộ môn giảng dạy: Tên sinh viên: .lớp: Tên đề tài khóa luận: Thuộc chuyên ngành: Ý kiến nhận xét Về hình thức, bố cục khoá luận: Về nội dung 2.1 Độ tin cậy số liệu thô: 2.1 Công tác phục vụ sản xuất: 2.2 Chuyên đề nghiên cứu khoa học: 2.2.1 Phương pháp nghiên cứu: 2.2.2 Tổng quan tài liệu tiêu nghiên cứu: 2.2.3 Kết phân tích kết quả: Đánh giá chung: Khoá luận yêu cầu khoá luận tốt nghiệp Đại học Điểm: , Xếp loại: Xuất sắc; Giỏi; Khá; Trung bình; Yếu Thái Nguyên, ngày .tháng năm Người nhận xét ... tài:? ?Nghiên cứu khả nhân nhanh rễ chồi chuối tiêu từ nguồn nhập nội phương pháp nuôi cấy mô tế bào? ?? 2 1.2 Mục đích đề tài Nghiên cứu khả nhân nhanh rễ chồi chuối tiêu từ nguồn nhập nội phương pháp. .. TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VI THỊ NHUNG Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH VÀ RA RỄ CHỒI CHUỐI TIÊU TỪ NGUỒN NHẬP NỘI BẰNG PHƯƠNG PHÁP NI CẤY MƠ TẾ BÀO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo:... LUẬN Trang Bảng 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BAP đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội 23 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội