Nghiên cứu nhân giống và khảo nghiệm một số dòng keo lai bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào tại viện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 1 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM VĂN HẢI NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG VÀ KHẢO NGHIỆM MỘT SỐ DÒNG KEO LAI BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO TẠI VIỆN NGHIÊN CỨU CÂY NGUYÊN LIÊU GIẤY Chuyên ngành: Lâm học Mã số: 60 62 02 01 LUẬN VĂN THẠC SỸ LÂM HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS. Dƣơng Văn Thảo Thái Nguyên - 2014 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu này là của riêng tôi, các số liệu trong công trình này là hoàn toàn trung thực, chính xác. Tôi xin chịu trách nhiệm hoàn toàn về những kết quả này. Tác giả Phạm Văn Hải Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ ii LỜI CẢM ƠN Để có được kết quả này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc, chân thành - , tạo mọi điều kiện giúp đỡ tôi hoàn thành công trình nghiên cứu này. – trình thực hiện luận văn. giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ của gia đình và các bạn bè đồng nghiệp. Mặc dù có nhiều cố gắng, song không tránh khỏi những sai sót. Tôi rất mong sự đóng góp ý kiến, chỉ bảo của các quý thầy cô và các bạn. Thái Nguyên, ngày tháng năm 2014 Tác giả Phạm Văn Hải Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ iii MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 1 2. Mục tiêu và yêu cầu của đề tài 2 2 2.2. Yêu cầu của đề tài 3 3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 3 3.1. Ý nghĩa khoa học 3 3.2. Ý nghĩa thực tiễn 3 4. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu của đề tài 3 4.1. Đối tượng nghiên cứu 3 4.2. Phạm vi nghiên cứu của đề tài 4 Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 5 1.1.Những nét chung về các dòng keo lai 5 1.2. Tình hình nghiên cứu trên thế giới và ở Việt Nam 6 Chƣơng 2 : NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1. Nội dung nghiên cứu 18 2.1.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ chất khử trùng và thời gian khử trùng đến tỷ lệ nẩy chồi , hệ số nhân chồi và tỷ lệ nẩy chồi hữu hiệu của mẫu thí nghiệm. 18 2.1.2. Nghiên cứu xác định môi trường tái sinh chồi và tạo nguồn vật liệu ban đầu. 18 . 18 2.2 Phương pháp nghiên cứu: 18 2.2.1. Vật liệu nghiên cứu 18 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ iv thời gian khử trùng đến tỷ lệ nẩy chồi , hệ số nhân chồi và tỷ lệ nẩy chồi hữu hiệu của mẫu thí nghiệm 19 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu xác định môi trường tái sinh chồi và tạo nguồn vật liệu ban đầu 21 . 24 Chƣơng 3 : 30 3.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ chất khử trùng và thời gian khử trùng đến tỷ lệ nẩy chồi , hệ số nhân chồi và tỷ lệ nẩy chồi hữu hiệu của mẫu thí nghiệm 30 3.1.1. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của chất khử trùng và thời gian khử trùng đối với dòng keo lai KL2. 30 3.1.2 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của chất khử trùng và thời gian khử trùng đối với dòng KL20. 33 3.1.3. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của chất khử trùng và thời gian khử trùng đối với dòng KLTA3 36 3.2. Nghiên cứu xác định môi trường tái sinh chồi và tạo nguồn vật liệu ban đầu 39 3.2.1.Kết quả nghiên cứu xác định môi trường tái sinh chồi và tạo nguồn vật liệu ban đầu đối với dòng KL2 39 3.2.2. Kết quả nghiên cứu xác định môi trường tái sinh chồi và tạo nguồn vật liệu ban đầu đối với dòng keo lai KL20 41 3.2.3. Kết quả nghiên cứu xác định môi trường tái sinh chồi và tạo nguồn vật liệu ban đầu đối với dòng keo lai KLTA3 42 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ v 3.2.4. So sánh về hệ số nhân chồi và tỷ lệ chồi hữu hiệu giữa các dòng nghiên cứu 46 . 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 53 1. Kết luận 54 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ vi DANH MỤC CÁC CỤM TỪ VIẾT TẮT ĐC : Đối chứng. ĐDSH : Đa dạng sinh học. GPA : Global Plant of Action. MS : Murashige & Skoog. SH : Schenk & Hildebrandt. TNDTTV : Tài nguyên di truyền thực vật. WPM : McCOWN‟s Woody Plant. Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1. Công thức khử trùng mẫu cấy 20 Bảng 2.2. Thành phần các môi trường cơ bản đề tài đã thử nghiệm. 21 Bảng 2.3. Công thức thí nghiệm xác định môi trường tái sinh chồi. 22 Bảng 3.1. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của chất khử trùng và thời gian khử trùng đối với dòng keo lai KL2. 31 Bảng 3.2. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của chất khử trùng và thời gian khử trùng đối với dòng KL20. 34 Bảng 3.3. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của chất khử trùng và thời gian khử trùng đối với dòng KLTA3 37 Bảng 3.4. Ảnh hưởng của môi trường cơ bản đến hiệu quả nhân chồi dòng KL2 40 Bảng 3.5. Ảnh hưởng của môi trường cơ bản đến hiệu quả nhân chồi dòng keo lai KL20 41 Bảng 3.6. Ảnh hưởng của môi trường cơ bản đến hiệu quả nhân chồi dòng keo lai KLTA3 43 47 6 tháng tuổi. 49 thời điểm 6 tháng tuổi. 50 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ viii DANH MỤC CÁC HÌNH 2 33 3.2: H 20 36 3 39 3.4: Một số hình ảnh kết quả thử nghiệm môi trường cơ bản 46 51 51 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 1 MỞ ĐẦU 1. : Hiện nay, gỗ là nguồn nguyên liệu chính phục vụ cho sản xuất của Tổng công ty giấy Việt Nam. Nhu cầu nguyên liệu hàng năm của Tổng công ty là khoảng 500.000m 3 , trong khi đó các công ty lâm nghiệp mới chỉ cung cấp được khoảng 60% nhu cầu trên. Thêm vào đó diện tích đất trồng các loài cây nguyên liệu giấy ngày càng bị thu hẹp do nhu cầu trồng các loài cây công nghiệp và nông nghiệp khác. Vì vậy việc nghiên cứu nâng cao năng suất và chất lượng rừng ngày càng cấp thiết. Trong khi đó nhiều diện tích rừng trồng trong Tổng công ty giấy còn thấp và không đạt yêu cầu, một trong những nguyên nhân chính là giống đưa vào trồng rừng sản xuất có chất lượng không cao. Do đó việc tăng năng suất rừng trồng bằng sử dụng nguồn giống có chất lượng là việc làm cần thiết. Phú Thọ là tỉnh miền núi, trung du, tổng diện tích tự nhiên của Phú Thọ là 3.519,56 km 2 , đất đai của Phú Thọ được chia theo các nhóm sau: đất feralít đỏ vàng phát triển trên phiến thạch sét, diện tích 116.266,27 ha chiếm tới 66,79% (diện tích điều tra). Đất thường có độ cao trên 100 m, độ dốc lớn, tầng đất khá dày, thành phần cơ giới nặng, mùn khá. Loại đất này thường sử dụng trồng rừng, một số nơi độ dốc dưới 25 o có thể sử dụng trồng cây công nghiệp. Hiện nay, Phú Thọ mới sử dụng được khoảng 54,8% tiềm năng đất nông – lâm nghiệp; đất chưa sử dụng còn 81,2 nghìn ha, trong đó đồi núi có 57,86 nghìn ha. Diện tích rừng hiện nay của Phú Thọ có độ che phủ rừng lớn (42% diện tích tự nhiên). Với diện tích rừng hiện có 144.256 ha, trong đó có 69.547 ha rừng tự nhiên, 74.704 ha rừng trồng, cung cấp hàng vạn tấn gỗ cho công nghiệp chế biến hàng năm. Các loại cây chủ yếu như bạch đàn, mỡ, keo, bồ đề và một số loài cây bản địa đang trong phát triển (đáng chú ý nhất vẫn là những cây phục vụ cho ngành công nghiệp sản xuất giấy).Tỉnh phú Thọ là [...]... sản xuất giấy Đóng trên địa bàn tỉnh gồm có Tổng Công ty giấy Việt nam , 5 công ty lâm nghiệp, 2 nhà máy giấy và bột giấy, 1 Viện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy Trong những năm gần đây, bộ Nông nghiệp và phát triển Nông thôn đã công nhận ba giống keo lai KL2, KL20 và KLTA3 do tập thể cán bộ Trung tâm nghiên cứu cứu cây nguyên liệu giấy nay là Viện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy chọn tạo là giống tiến... hệ số nhân chồi và tỷ lệ nẩy chồi hữu hiệu của mẫu thí nghiệm 2.1.2 Nghiên cứu xác định môi trường tái sinh chồi và tạo nguồn vật liệu ban đầu 2.1 lai 20 nghiên 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu: 2.2.1 Vật liệu nghiên cứu (KL2, KLTA3 (ĐC) KL20) nghiên cứu 1 Tên loài Tên dòng ( Keo) Keo lai (AM) AM 1 (ĐC) 2 Keo lai( AM) KL2 2 3 Keo lai( AM) AM 6(ĐC) 3 4 Keo lai( AM) AM 7(ĐC) 4 5 Keo lai( AM) AM 8(ĐC) 5 6 Keo. .. cung cấp nguồn nguyên liệu giấy và đem lại hiệu quả kinh tế cho người trồng rừng Đồng thời nguồn c , trong khuôn khổ của đề tài, chúng tôi thực hiện nghiên cứu keo lai KL2, KL20 và KLTA3 hiện có tại Viện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy - Các môi trường nuôi cây; một số hóa chất 4.2 Phạm vi nghiên cứu của đề tài Nội dung nghiên cứu của đề tài chỉ giới hạn nghiên cứu KL2, KL20 và KLTA3 kh Số hóa bởi Trung... công nghệ nuôi cấy mô ba : Nghiên dòng keo lai KL2, KL20 và KLT cứu nhân gi ” là cần thiết 2 Mục tiêu và yêu cầu của đề tài Ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy mô invitro để nhân nhanh và tạo thành công cây mầm mô 3 dòng keo lai KL2, KL20 và KLTA3 góp phần bảo tồn và phát triển nguồn gen cây nguyên liệu giấy Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 3 * Mục tiêu cụ thể: - Xác định môi trường... nhiên, hiện nay mới chỉ sản xuất được cây giống 3 dòng keo lai nói trên bằng phương pháp giâm hom, vẫn còn chưa có các nghiên cứu nuôi cấy mô cho 3 dòng trên Đoàn Thị Thanh Nga và Phạm Thị Kim Thanh (2000)[11], đã nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất điều hòa sinh trưởng lên quá trình nhân chồi cây keo lai Báo cáo cho thấy, chồi mẫu cây keo lai được đưa vào ống nghiệm trong điều kiện xử lý với HgCl2... 5 6 Keo lai( AM) AM 9(ĐC) 6 7 Keo lai( AM) KLTA3 7 8 Keo lai( AM) KL20 8 9 Keo lai( AM) AM 12(ĐC) 9 10 Keo lai( AM) AM 14(ĐC) 10 11 Keo lai( AM) AM 17(ĐC) 11 12 Keo lai( AM) AM 18(ĐC) 12 13 Keo lai( AM) AM 19(ĐC) 13 14 Keo lai( AM) AM 21(ĐC) 14 Stt Số hóa bởi Trung tâm Học liệu Mã hóa dòng trong TN 1 Xuất sứ Nam http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 19 ện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy trồng khảo nghiệm trên... kỹ thuật nhân giống hiện nay ở nước ta thì nhân giống bằng phương pháp nuôi cấy mô cho hiệu qua cao nhất, đặc biệt là chất lượng di truyền của cây giống được đảm bảo và khả năng cung cấp số lượng lớn cây giống ở quy mô công nghiệp Tuy nhiên, ba giống keo lai nêu trên chưa được tiến hành nghiên cứu bằng kỹ thuật nuôi cấy mô Xuất phát từ những đặc điểm nêu trên, để góp phần nâng cao năng suất và duy trì... nhiều dòng keo lai đã được công nhận giống quốc gia là BV10, BV16, BV32, các dòng được công nhận giống tiến bộ kỹ thuật là BV5, BV29, BV33, TB6, TB12, KL2, KL20 và KLTA3 Trong đó, có 3 dòng KL2, KL20 và KLTA3 là 3 dòng được Viện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy tuyển chọn và nhân giống đưa vào sản xuất phục vụ trồng rừng Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 12 Các dòng keo lai KL2,... nhiều dòng keo lai đã được công nhận giống quốc gia là BV10, BV16, BV32, các dòng được công nhận giống tiến bộ kỹ thuật là BV5, BV29, BV33, TB6, TB12, KL2, KL20 và KLTA3 Trong đó, có 3 dòng KL2, KL20 và KLTA3 là 3 dòng được Viện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy tuyển chọn và nhân giống đưa vào sản xuất phục vụ trồng rừng Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 6 Các dòng keo lai KL2,... để thực hiện quá trình nuôi cấy mô do bộ phận nghiện cứu thuộc dự án phát triển năng lực nghiên cứu khoa học công nghệ - phòng nghiên cứu ứng dụng sản xuất giống cây trồng lâm nghiệp – Viện nghiện cứu cây nguyên liệu cung cấp Dụng cụ: - Phòng nuôi cấy mô - Máy cấy - Nồi hấp vô trùng - Cân tiểu ly điện tử - máy do độ PH - Panh, kéo nuôi cấy mô - Hóa chất sử dụng trong nuôi cấy mô và các trang thiết bị . nuôi cấy mô invitro để nhân nhanh và tạo thành công cây mầm mô 3 dòng keo lai KL2, KL20 và KLTA3 góp phần bảo tồn và phát triển nguồn gen cây nguyên liệu giấy. Số hóa bởi Trung tâm Học liệu. Viện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy. - Các môi trường nuôi cây; một số hóa chất. 4.2. Phạm vi nghiên cứu của đề tài Nội dung nghiên cứu của đề tài chỉ giới hạn nghiên cứu KL2, KL20 và. tâm nghiên cứu cứu cây nguyên liệu giấy nay là Viện nghiên cứu cây nguyên liệu giấy chọn tạo là giống tiến bộ kỹ thuật. Đây là những giống rất thích hợp cho trồng rừng vùng Trung tâm Bắc Bộ và