Nghiên cứu thành phần hóa học hướng tác dụng chống oxy hóa của lá cây trứng cá (muntingia calabura l )

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC TP HỒ CHÍ MINH - LÊ THỊ THU HỒNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC HƢỚNG TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA CỦA LÁ CÂY TRỨNG CÁ (Muntingia calabura L.) LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh - 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC TP HỒ CHÍ MINH - LÊ THỊ THU HỒNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC HƢỚNG TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA CỦA LÁ CÂY TRỨNG CÁ (Muntingia calabura L.) Ngành: Dược học cổ truyền Mã số: 8720206 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS VÕ VĂN LẸO Thành phố Hồ Chí Minh - 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu Luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan thơng tin trích dẫn Luận văn rõ nguồn gốc Lê Thị Thu Hồng TÓM TẮT Luận văn thạc sĩ – Khóa 2016-2018 Ngành: Dược liệu- Dược cổ Truyền – Mã số: 8720206 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC HƢỚNG TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA CỦA LÁ CÂY TRỨNG CÁ (MUNTINGIA CALABURA L ) Lê Thị Thu Hồng Thầy hướng dẫn: TS Võ Văn Lẹo Mở đầu đặt vấn đề: Trứng c Mungtingia calabura L t c y c nguồn gốc nhiệt ới ch u M Ở Việt Nam Trứng c ược trồng r ng rãi, phổ biến nhiều n i Thành phần hóa học Trứng cá flavonoid, methyl gallat, β –sitosterol, stigmasterol[1] acid hữu c Trong y học cổ truyền Việt Nam, trứng c ược sắc uống ể lợi kinh trị bệnh gan[2] Tuy nhi n cho ến Việt Na chưa c công bố h a thực vật c y Do ề tài ược thực với mục tiêu chiết xuất, phân lập x c ịnh cấu trúc hóa học m t số thành phần c t c dụng chống oxy h a ạnh từ Trứng cá (Muntingia calabura L.) Đối tƣợng: Lá Trứng cá thu hái thành phố Biên Hòa, tỉnh Đồng Nai vào tháng 06/2017 Phƣơng pháp nghiên cứu: Sàng lọc hoạt tính chống oxy hóa cao phận oạn Trứng c theo phư ng ph p DPPH Sử dụng phư ng ph p chiết ngấm kiệt với cồn 80%, phân bố lỏng – lỏng, sắc ký c t pha thuận, sắc ký rây phân tử c c phư ng ph p tinh chế kh c ể phân lập hợp chất tinh khiết từ ph n oạn có hoạt tính chống oxy hóa mạnh X c ịnh cấu trúc chất ã phân lập phư ng ph p phổ học (UV, MS, NMR) Kết bàn luận Ở nồng 20 µg/ml, cao có hoạt tính chống oxy hóa giảm dần từ cao ethyl acetat (92,09%) > cao nước (79,93 %) > cao cồn 80 (73,85%) > cao cloroform (49,17%) > cao nhexan (28,32%) Từ 10 kg b t dược liệu chiết ngấm kiệt, loại chlorophyll, lắc phân bố lỏng-lỏng, loại dung ôi thu ược cao n-hexan (8,02 g), cao cloroform (49,06 g), cao ethyl acetat (261,26 g) Từ 60 g cao ethyl acetat qua trình phân lập thu ược flavonoid hợp chất phenol lần ượt là: kaempferol (42 mg), acid trans-p-coumaric (35 mg), ethyl gallat (75 mg), quercetin (232 mg), acid gallic (870 mg), tilirosid (91 mg), 6”-O-galloyl astragalin (42 mg), davidiin (90 mg), chrysin 7-O-β-D-glucosid (4 mg) isoquercitrin (25 mg) Trong hợp chất 6”-O-galloyl astragalin, davidiin lần ầu ti n ược phân lập từ lồi M calabura L Acid trans-p-coumaric, tilirosid có hoạt tính chống oxy hóa yếu IC50 kaempferol (27,41 mol/l), ethyl gallat (8,79 mol/l), quercetin (9,04 mol/l), acid gallic (9,35 mol/l), 6”-O-galloyl astragalin (9,5 mol/l), davidiin (4,03 mol/l), isoquercitrin (10,04 mol/l) so với chất ối chiếu acid ascorbic 24 43 mol/l) Đặc biệt davidiin có hoạt tính chống oxy hóa mạnh h n acid ascorbic gấp lần Kết luận Từ cao phận oạn ethyl acetat có hoạt tính chống oxy hóa mạnh ã ph n ập ược 10 hợp chất lần ượt là: kaempferol, acid trans-p-coumaric , ethyl gallat, quercetin, acid gallic, tilirosid, 6”-O-galloyl astragalin, davidiin, chrysin 7-O-β-D-g ucosid isoquercitrin Trong c hợp chất lần ầu ược phân lập từ Trứng c 6”-O-galloyl astragalin davidiin Các hợp chất ethy ga at quercetin acid ga ic 6”-O-galloyl astragalin, davidiin, isoquercitrin có hoạt tính chống oxy hóa mạnh h n acid ascorbic ABSTRACT Master’s thesis – Academic course: 2016 – 2018 Speciality: Pharmacognosy – Traditional Pharmacy Speciality code: 8720206 BIOACTIVITY-GUIDED ISOLATION OF ANTIOXIDANT CONSTITUENTS FROM THE LEAVES OF MUNTINGIA CALABURA L LE THI THU HONG Supervisors: Dr VO VAN LEO Introduction: Muntingia calabura L is a native plant of Tropical America In Vietnam, this plant is grew everywhere The main components of leaves are flavonoids, methyl gallat, β –sitosterol, stigmasterol and organic acids In Traditional Vietnamese Medicine, Muntingia calabura L has been used for it’s ana gesic and hepatoprotective effects However unti now in Vietnam there are few reports on this plant So the thesis was carried out to isolate the components from leaves of M calabura which have antioxidant activities on DPPH assay Materials: Leaves of Muntingia calabura were collected in Bien Hoa in June, 2017 Methods: The antioxidant activities of extracts, fractions and isolated compounds is tested by in-vitro DPPH assay Percolation, liquid-liquid distribution, column chromatography and other purification methods are used for extracting and separating Structure determination was based on UV, MS and NMR spectrometric methods Results and Discussion: Screening to choose the highest antioxidant fraction: at the concentration of 20 μg/ the antioxidant activities of extracts decrease in order: ethyl acetate (92.09%), water (79.93%), 80% ethanol (73.85%), chloroform (49.17%) and n-hexane extract (28.32%) Dried leaves of M calabura (10 kg) were extracted with 80% ethanol (70 L) Solvent was removed to get the ethanol extract The extract was diluted and successively partioned with solvents to obtain n-hexan extract (8.02 g), chloroform (49.06) and ethyl acetate extract (261.26 g) From ethyl acetate extract, flavonoids and other phenolic compounds were isolated: kaempferol, trans-p-coumaric acid, ethyl gallate, quercetin, gallic acid, tiliroside, 6”-Ogalloyl astragalin, davidiin, chrysin 7-O-β-D-g ucoside isoquercitrin Among them, for the first time, 6”-O-galloyl astragalin and davidiin were reported to be constituents of Muntingia calabura The IC50 values of isolated compounds in comparison with ascorbic acid were as follows: kaempferol (27,41 mol/l), ascorbic (24,43 mol/l), isoquercitrin (10,04  o / 6”-O-galloyl astragalin (9,5 mol/l), gallic acid (9,35 mol/l), quercetin (9,04 mol/l), ethyl gallate (8,79 mol/l) and davidiin (4,03 mol/l) The antioxidant activity of davidiin is times higher than ascorbic acid Conclutions: 10 compounds: kaempferol, trans-p-coumaric acid, ethyl gallate, quercetin, gallic acid, tiliroside, 6”-O-galloyl astragalin, davidiin, chrysin 7-O-β-D-glucoside and isoquercitrin were isolated from the ethyl acetate extract The compound 6”-O-galloyl astragalin and davidiin were isolated for the first time from M calabura L The antioxidant activites of ethy ga ate quercetin ga ic acid 6”-O-galloyl astragalin, davidiin and isoquercitrin are higher than ascorbic acid i MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH vii Chư ng 1.1 Đặc iể T NG QU N TÀI LIỆU thực vật .2 1.1.1 Vị tr ph n oại .2 1.1.2 Ph n bố 1.1.3 Đặc iể thực vật họ Muntingiaceae 1.1.4 Đặc iể thực vật chi Muntingia 1.1.5 Đặc iể thực vật oài Muntingia calabura L 1.2 Thành phần h a học Muntingia calabura L 1.3 T c dụng dược 12 1.3.1 Hoạt t nh chống oxy h a 12 1.3.2 Hoạt t nh g y 1.3.3 Hoạt t nh kh ng khu n 14 1.3.4 Hoạt t nh kh ng vi 1.3.5 Tác dụng chống loét, bảo vệ dày 16 1.3.6 Tác dụng hạ ường huyết bệnh tiểu ường 17 1.3.7 T c dụng hạ huyết p 17 1.3.8 Tác dụng bảo vệ tim 19 1.3.9 Tác dụng giả c tế bào 13 15 au 19 1.3.10 Tác dụng bảo vệ gan 20 1.4 Công dụng 21 1.5 Tổng quan phư ng ph p x c ịnh hà nh gi hoạt tính chống oxy hóa 21 ượng MDA 22 1.5.1 Thử nghiệ 1.5.2 Thử nghiệ nh gi khả oại gốc tự DPPH 22 1.5.3 Thử nghiệ nh gi khả chống oxy hóa với hệ thống β-caroten/acid linoleic 23 1.5.4 Thử nghiệ activity) 23 nh gi khả kết hợp với ion sắt II (Iron chelating ii 1.5.5 Thử nghiệ nh gi khả oại gốc superoxyl O2•- (Superoxide anion scavenging activity assay) 24 1.5.6 Thử nghiệ nh gi khả khử ion sắt III Phư ng ph p FR P – Ferric ion Reducing Antioxydant Power) 24 1.5.7 Thử nghiệ o ường chất chống oxy hóa bẫy hồn tồn gốc TRAP (Total Radical-Trapping Antioxydant Paramether) 24 1.5.8 Thử nghiệ o khả hấp thụ gốc oxy ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity) .25 Chư ng ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .26 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 26 2.1.1 Nguyên liệu 26 2.1.2 Dung mơi hóa chất 26 2.1.3 Dụng cụ, trang thiết bị 26 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.2.1 Nghiên cứu thực vật học 28 2.2.2 Thử tinh khiết 28 2.2.3 X c ịnh chất chiết ược dược liệu 28 2.2.4 Ph n t ch s b thành phần hóa thực vật .29 2.2.5 Sàng lọc hoạt tính chống oxy hóa cao Trứng cá phư ng pháp DPPH 29 2.2.6 Chiết cao toàn phần t ch cao ph n oạn chiết phân bố lỏng - lỏng .31 2.2.7 Phân lập tinh chế chất từ cao có tác dụng chống oxy hóa 32 2.2.8 X c ịnh cấu trúc hợp chất phân lập ược .33 2.2.9 X c ịnh khả chống oxy hóa chất tinh khiết 34 Chư ng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 36 3.1 NGHIÊN CỨU THỰC VẬT HỌC 36 3.1.1 Đặc iểm hình thái Trứng cá 36 3.1.2 Đặc iểm vi phẫu Trứng cá .36 3.1.3 Soi b t Trứng Cá .39 3.2 THỬ TINH KHIẾT 40 3.2.1 X c ịnh m 40 iii 3.2.2 X c ịnh tro 40 3.3 HÀM LƯỢNG CHẤT CHIẾT ĐƯỢC TRONG LÁ TRỨNG CÁ 41 3.4 NGHIÊN CỨU HÓA HỌC 41 3.4.1 Ph n t ch s b thành phần hóa thực vật .41 3.4.2 Sàng lọc hoạt tính chống oxy hóa cao chiết ph n oạn Trứng cá phư ng ph p DPPH 43 3.4.3 Chiết xuất thử hoạt tính chống oxy hóa cao 45 3.4.4 Phân lập chất từ cao EA 47 3.4.5 Kiể tra tinh khiết chất phân lập ược SKLM .58 3.4.6 Kiể tra tinh khiết chất phân lập ược UPLC 61 3.4.7 X c ịnh cấu trúc hợp chất phân lập ược 66 3.5 KẾT QUẢ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA CỦA CHẤT TINH KHIẾT BẰNG PHƯƠNG PHÁP DPPH .90 3.5.1 Định tính SKLM 90 3.5.2 Thử HTCO in vitro chất phân lập phư ng ph p DPPH 90 Chư ng BÀN LUẬN 92 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .94 TÀI LIỆU THAM KHẢO 96 PHỤ LỤC 101 iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ nguyên Ý nghĩa C-Nuclear Magnetic Resonance C ng hưởng từ hạt nhân 13C Chữ tắt 13 br broad Đỉnh r ng d doublet Đỉnh ôi DĐVN Dược iển Việt Nam DEPT Distortionless Enhancement Polarization Transfer DMSO-d6 Dimethyl sulfoxxide DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl GAE Gallic acid equivalent 10 EA Ethyl acetat 11 ED50 Effective dose 50% 12 HMBC Heteronuclear Correlation 13 HSQC Heteronuclear Correlation 14 HTCO Hoạt tính chống oxy hóa 15 IC50 Inhibitor concentration 50% Nồng 16 IR Infrared Spectroscopy Phổ hồng ngoại 17 J Coupling constant Hằng số ghép 18 m multiplet Đỉnh phức tạp 19 MBC Minimum inhibitory concentration 20 MDA Malonyl dialdehyde 21 MeOH Methanol 22 MHz Mega Hertz 23 MS Phổ khối 24 MIC Mass Spectroscopy Minimum inhibitory concentration 25 NMR Nuclear Magnetic Resonance C ng hưởng từ hạt nhân C-NMR H-NMR 13 C ng hưởng từ hạt nhân proton H-Nuclear Magnetic Resonance Liều hiệu 50% Multiple Single by Bond Quantum ức chế 50% v STT Chữ tắt Ý nghĩa Chữ nguyên 26 ppm parts per million Phần triệu 27 PDA Photodiode Array Dãy diod quang 28 s singlet Đỉnh 29 SKC Sắc ký c t 30 SKĐ Sắc k 31 SKLM Sắc ký lớp mỏng 32 t triplet 33 TLTK Tài liệu tham khảo 34 TT Thuốc thử 35 UPLC Ultra Performance Chromatography 36 UV-Vis Ultraviolet and Visible Tử ngoại khả kiến 37 VLC Vacuum liquid chromatography Sắc ký (c t) chân không 38 VS Vanilline- sulfuric acid n Đỉnh ba Liquid Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-58 Phụ lục 116 Phổ HMBC c a Mun-9 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δC 50 – 105, δH 3,1 – 5,6) Phụ lục 117 Phổ COSY c a Mun-9 (DMSO-d6, 500 MHz) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-59 Phụ lục 118 Phổ COSY c a Mun-9 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δH 3,0 - 5,4) Phụ lục 119 Phổ COSY c a Mun-9 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δH 6,4 - 8,2) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-60 Phụ lục 120 Phổ H-NMR c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) Phụ lục 121 Phổ H-NMR c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δH 5,4 – 7,7) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-61 13 Phụ lục 122 Phổ C-NMR c a Mun-10 (DMSO-d6, 125 MHz) 13 Phụ lục 123 Phổ C-NMR c a Mun-10 (DMSO-d6, 125 MHz) (vùng δC 60 - 180) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-62 Phụ lục 124 Phổ DEPT c a Mun-10 (DMSO-d6, 125 MHz) Phụ lục 125 Phổ HSQC c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-63 Phụ lục 126 Phổ HSQC c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δC 90 – 125, δH 5,3 – 7,7) Phụ lục 127 Phổ HSQC c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δC 59 – 80, δH 2,75 – 3,75) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-64 Phụ lục 128 Phổ HMBC c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) Phụ lục 129 Phổ HMBC c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δC 80 – 180, δH 6,0 – 7,7) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-65 Phụ lục 130 Phổ HMBC c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δC 140 - 180, δH 6,2 - 7,6) Phụ lục 131 Phổ HMBC c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δC 90 – 125, δH 5,9 – 7,8) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-66 Phụ lục 132 Phổ HMBC c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δC 65 – 105, δH 2,80 – 3,75) Phụ lục 133 Phổ COSY c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-67 Phụ lục 134 Phổ COSY c a Mun-10 (DMSO-d6, 500 MHz) (vùng δH 6,0 – 7,8) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-68 KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA THEO PP DPPH CỦA CAO EA VÀ CÁC CHẤT PHÂN L P ĐƢỢC Kết thử HTCO cao EA Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Abs trung bình HTCO (%) Lần Lần Lần 1,250 1,251 1,251 1,251 - 25 6,25 0,227 0,226 0,226 0,226 81,93 20 0,416 0,416 0,416 0,416 66,75 15 3,75 0,438 0,438 0,538 0,471 62,35 10 2,5 0,674 0,675 0,675 0,675 46,04 5 1,25 0,859 0,858 0,858 0,858 31,41 0,5 0,992 0,985 0,984 0,987 21,1 Kết thử HTCO acid ascorbic Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Abs trung bình Lần Lần Lần 1,258 1,26 1,259 1,259 HTCO (%) 30 7,5 0,142 0,141 0,141 0,141 88,80 25 6,25 0,323 0,323 0,323 0,323 74,34 20 0,513 0,513 0,512 0,513 59,33 15 3,75 0,705 0,705 0,705 0,705 44,00 10 2,5 0,95 0,949 0,949 0,949 24,62 1,25 1,09 1,09 1,09 1,09 13,42 2,5 0,625 1,187 1,186 1,184 1,186 5,96 Abs trung bình HTCO (%) Kết thử HTCO MUN-1 (Kaempferol) Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Lần Lần Lần 1,232 1,231 1,232 1,232 - 50 12,5 0,214 0,214 0,214 0,214 82,63 40 10 0,407 0,407 0,408 0,407 66,96 30 7,5 0,659 0,660 0,660 0,660 46,43 20 0,869 0,870 0,870 0,870 29,38 10 2,5 1,081 1,080 1,080 1,080 12,34 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-69 Kết thử HTCO MUN-3 (ethyl gallat) Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Abs trung bình HTCO (%) Lần Lần Lần 1,151 1,150 1,151 1,151 - 12 0,175 0,174 0,175 0,175 84,80 10 2,5 0,316 0,317 0,317 0,317 72,46 0,466 0,465 0,465 0,465 59,60 1,5 0,678 0,679 0,679 0,679 41,01 0,847 0,848 0,847 0,847 26,41 Abs trung bình HTCO (%) Kết thử HTCO MUN-4 (Quercetin) Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Lần Lần Lần 1,25 1,251 1,251 1,=,251 - 14 3,5 0,456 0,456 0,456 0,456 63,55 12 0,604 0,604 0,604 0,604 51,72 10 2,5 0,671 0,671 0,671 0,671 46,36 1,5 0,855 0,855 0,854 0,855 31,65 0,5 1,034 1,033 1,034 1,034 17,35 Abs trung bình HTCO (%) Kết thử HTCO MUN-5 (Acid gallic) Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Lần Lần Lần 1,151 1,150 1,151 1,151 - 10 2,5 0,281 0,282 0,282 0,282 75,5 0,439 0,438 0,438 0,438 61,95 1,5 0,567 0,568 0,567 0,567 50,74 4 0,791 0,791 0,791 0,791 31,28 0,5 0,942 0,943 0,943 0,943 18,07 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-70 Kết thử HTCO MUN-7 [6”-O-galloyl astragalin] Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Abs trung bình Lần Lần Lần 1,116 1,117 1,118 1,117 HTCO (%) 40 10 0,126 0,126 0,126 0,126 88,72 30 7,5 0,375 0,375 0,375 0,375 66,43 20 0,679 0,679 0,679 0,679 39,21 10 2,5 0,861 0,862 0,861 0,861 22,92 5 1,25 0,969 0,97 0,97 0,97 13,16 Abs trung bình HTCO (%) Kết thử HTCO MUN-8 (Davidiin) Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Lần Lần Lần 1,151 1,150 1,151 1,151 - 25 6,25 0,251 0,250 0,252 0,251 79,94 20 0,377 0,378 0,377 0,377 69,86 15 3,75 0,622 0,624 0,623 0,623 50,2 10 2,5 0,854 0,855 0,855 0,855 31,65 5 1,25 1,049 1,049 1,05 1,049 16,15 HTCO (%) Kết thử HTCO MUN-10 (Isoquercitrin) Ống Nồ đ pha (µg/ml) đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Lần Lần Lần Abs trung bình 1,250 1,251 1,251 1,251 40 10 0,134 0,134 0,133 0,134 89,29 30 7,5 0,326 0,327 0,326 0,326 73,94 20 0,546 0,547 0,547 0,547 56,27 10 2,5 0,874 0,875 0,875 0,875 30,06 5 1,25 0,959 0,959 0,959 0,959 23,34 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-71 Kết thử HTCO (MUN-2, Mun-6) Nồ đ pha (µg/ml) Mẫu đ đ (µg/ml) Nồ Ch ng Abs mẫu Lần Lần Lần Abs trung bình 1,250 1,250 1,251 1,251 HTCO (%) Mun-2 2000 500 0,759 0,760 0,760 0,760 39,20 Mun-6 2000 500 1,039 1,040 1,040 1,040 16,80 đ Phụ lục 135 Ho t tính ch ng oxy hóa c chất phâp l đ c theo pp DPPH Acid ascorbic 100 80 HTCO HTCO CAO EA 90 80 70 60 50 40 30 20 10 y = 10.142x + 18.207 R² = 0.9938 60 40 y = 12.243x - 2.6516 R² = 0.9976 20 0 10 Kaempferol y = 7.1264x - 5.9 R² = 0.9986 đ µg/ 10 Nồng Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 10 Ethyl gallat 15 HTCO 90 80 70 60 50 40 30 20 10 Nồng đ µg/ Nồng đ µg/ HTCO n 80 70 60 50 40 30 20 10 y = 29.298x - 0.889 R² = 0.9926 Nồng đ µg/ Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL-72 Quercetin 70 Acid gallic 100 60 80 HTCO HTCO 50 40 30 20 y = 14.871x + 9.4109 R² = 0.9923 10 60 40 y = 29.106x + 3.849 R² = 0.9931 20 0 Nơng độ µg/ml Nồng đ µg/ MUN-7 Davidiin 80 80 60 y = 8.683x + 0.549 R² = 0.992 20 HTCO 100 HTCO 100 40 60 40 y = 13.263x - 0.177 R² = 0.9914 20 0 Nồng đ µg/ 10 15 Nồng đ µg/ml Isoquercitrin 100 HTCO 80 60 40 y = 7.8127x + 13.563 R² = 0.9901 20 0 10 15 Nồng đ µg/ Phụ lục 136 c th EA, Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ồi quy ho t tính ch ng oxy hóa chất phân l đ c 10 ... kaempferol (27,41 mol /l) , ethyl gallat (8,79 mol /l) , quercetin (9,04 mol /l) , acid gallic (9,35 mol /l) , 6”-O-galloyl astragalin (9,5 mol /l) , davidiin (4,03 mol /l) , isoquercitrin (10,04 mol /l) ... (27,41 mol /l) , ascorbic (24,43 mol /l) , isoquercitrin (10,04  o / 6”-O-galloyl astragalin (9,5 mol /l) , gallic acid (9,35 mol /l) , quercetin (9,04 mol /l) , ethyl gallate (8,79 mol /l) and davidiin... BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC TP HỒ CHÍ MINH - L? ? THỊ THU HỒNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC HƢỚNG TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA CỦA L? ? CÂY TRỨNG CÁ (Muntingia calabura L. ) Ngành: Dược học cổ truyền