1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH EG 2000

84 592 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 84
Dung lượng 0,91 MB

Nội dung

luận văn

BỘ GIÁO DỤC ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ---------------------- LÊ VĂN BIÊN KHẢO SÁT ðẶC TÍNH SINH HỌC PHÂN TỬ CỦA MỘT SỐ CHỦNG VIRUS VIÊM GAN VỊT CƯỜNG ðỘC PHÂN LẬP ðƯỢC TRÊN ðÀN VỊT MỘT SỐ ðỊA PHƯƠNG SO SÁNH VỚI CHỦNG VIRUS VACXIN DHEG2000 LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : Thú y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học : TS. NGUYỄN BÁ HIÊN HÀ NỘI – 2011 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan rằng, số liệu kết quả nghiên cứu nêu trong luận văn là trung thực, do chính tôi thực hiện chưa từng ñược công bố hay bảo vệ trong một học vị nào. Tôi xin cam ñoan rằng, mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn này ñã ñược cảm ơn các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñã ñược ghi rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày 8 tháng 9 năm 2011 Tác giả luận vănVăn Biên Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… ii LỜI CẢM ƠN Sau thời gian học tập nghiên cứu, ñến nay tôi ñã hoàn thành khóa học. Nhân dịp hoàn thành luận văn thạc sỹ nông nghiệp chuyên ngành Thú y cho phép tôi ñược bày tỏ lòng biết ơn chân thành, sâu sắc tới các Thầy, Cô giáo. Xin ñược gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất ñến Thầy TS. Nguyễn Bá Hiên, Bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm – Khoa Thú y – Trường ðH Nông Nghiệp Hà Nội, người thầy ñã tận tình hướng dẫn trực tiếp tạo mọi ñiều kiện thuận lợi cho tôi ñược học tập, thực hành thí nghiệm giúp ñỡ tôi hoàn thành ñề tài nghiên cứu này. ðồng thời tôi cũng bày tỏ sự biết ơn ñến các Thầy, Cô trong bộ môn Vi sinh vật - Truyền nhiễm - Khoa Thú y – Trường ðH Nông Nghiệp Hà Nội các anh chị phòng Thí nghiệm trung tâm Khoa Thú y (B213 & B214) ñã nhiệt tình giúp ñỡ tạo mọi ñiều kiện giúp tôi hoàn thành ñề tài một cách tốt nhất. Cuối cùng tôi muốn bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ñến cơ quan, những người thân trong gia ñình, bạn bè ñã luôn ñộng viên, giúp ñỡ tôi trong suốt thời gian học tập thực hiện ñề tài nghiên cứu. Xin trân trọng cảm ơn! Hà nội, ngày 8 tháng 09 năm 2011 Học viên Lê Văn Biên Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Các chữ cái viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii 1. MỞ ðẦU 49 1.1 ðặt vấn ñề 1 1.2 Mục tiêu nghiên cứu của ñề tài 2 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 2.1 Bệnh viêm gan virus vịt 3 2.2. Một số ñặc tính của virus viêm gan vịt 12 2.3 Sinh học phân tử của virus viêm gan vịt 14 2.4 Miễn dịch chống virus viêm gan vịt 19 2.5 Các kỹ thuật sinh học phân tử 20 2.6 Tình hình nghiên cứu bệnh viêm gan vịt trên thế giới việt nam 24 3. NỘI DUNG, VẬT LIỆU PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 3.1 Nội dung nghiên cứu 28 3.2 Vật liệu nghiên cứu 28 3.3. Phương pháp nghiên cứu 31 4. KẾT QUẢ THẢO LUẬN 46 4.1. Kết quả phân lập virus viêm gan vịt cường ñộc 46 4.1.1. Phân lập trên phôi vịt 46 4.1.2 Nghiên cứu biến ñổi bệnh lý của phôi vịt khi phân lập virus. 50 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… iv 4.2 Kết quả tách chiết rna tổng số 52 4.3 Kết quả phản ứng rt-pcr 53 4.4 Kết quả dòng hóa tách dòng sản phẩm 56 4.4.1 Kết quả dòng hóa sản phẩm vào tế bào khả biến E.coli 56 4.4.2 Kết quả kiểm tra DNA plasmid tái tổ hợp 58 4.5 Kết quả giải trình tự nucleotide axit amin của gen kháng nguyên vp1 các chủng virus viêm gan vịt phân lập ñược chủng virus vacxin dh-eg-2000 59 4.6 So sánh sự ñồng nhất nucleotide, sự tương ñồng amino acid của vùng gen vp1 giữa các chủng virus viêm gan vịt cường ñộc nb, dn1, nc chủng virus vacxin dh-eg-2000. 64 5. KẾT LUẬN ðỀ NGHỊ 67 5.1 Kết luận 67 5.2 ðề nghị 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… v CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT DHV Duck Hepartitis Virus DNA Acid Deoxyribonucleic RNA Acid Ribonucleic VP Viral Protein PCR Polymerase Chain Reaction RT-PCR Revese Transcription- Polymerase Chain Reaction EDTA Ethylen Dimine Tetra Acetic Acid dNTP Deoxy Nucleotide Triphosphate ddNTP Dideoxy Nucleotide Triphosphate X-gal 5-Bromo- 4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside Taq Polymerase Thermus aquaticus polymerase LB Luria Bertani-agar UTR Untranslated Region cs Cộng sự tr Trang Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… vi DANH MỤC BẢNG STT Tên hình Trang 3.1 Danh sách các mẫu bệnh phẩm viêm gan vịt sử dụng trong nghiên cứu 29 3.2 Các ñoạn mồi sử dụng trong phản ứng RT-PCR 29 3.3 Thành phần phản ứng RT-PCR 34 3.4 Chu kỳ nhiệt của phản ứng PCR 35 4.1 Kết quả phân lập virus gây bệnh viêm gan vịt trên phôi vịt 48 4.2 Kết quả kiểm tra bệnh tích ñại thể của phôi vịt phân lập virus 50 4.3 Tỷ lệ (%) ñồng nhất về nucleotide (trên ñường chéo) tương ñồng axit amin (dưới ñường chéo) giữa các chủng virus viêm gan vịt cường ñộc NB, DN1, NC chủng virus vacxin DH-EG- 2000. 65 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… vii DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 2.1 thế chết ñiển hình của vịt khi bị nhiễm virus viêm gan vịt (a) Gan vịt xuất huyết (b) 7 2.2 Cấu trúc không gian của picornavirus 15 2.3 ñồ hệ gen chuỗi polypeptide của virus viêm gan vịt 16 2.4 Mô hình các bước của phản ứng PCR 21 2.5 Mô hình nguyên lý của phản ứng RT-PCR 22 3.1 ñồ vị trí bám của mồi ñể thu nhận ñoạn DNA (~0,8kb) chứa gen VP1 (714bp) chiến lược giải mã gen VP1 của virus viêm gan vịt bằng cặp mồi DH3F-DH4R (ảnh minh hoạ) 30 3.2 ñồ qui trình nghiên cứu, lưu giữ giải mã vùng gen VP1 của virus viêm gan vịt. 44 4.1 Kiểm tra RNA tổng số tách chiết từ các mẫu 53 4.2 Kết quả ñiện di sản phẩm RT-PCR (~ 800 bp) của mẫu virus cường ñộc viêm gan vịt DN1, DN2 NB trên thạch agarose 1,2%. 54 4.3 Kết quả ñiện di sản phẩm RT-PCR (~800 bp) của mẫu HY, DH- EG-2000 NC trên thạch agarose 1%. 55 4.4 Kết quả nuôi cấy vi khuẩn tái tổ hợp trên ñĩa thạch (LB-agar 1,5%) có chứa kháng sinh Kanamycin X-gal, bao gồm các khuẩn lạc xanh trắng cần chọn lọc. 56 4.5 Kết quả tách dòng vùng gen VP1 của virus viêm gan vịt ñược ñiện di kiểm tra trên thạch agarose 1,2%, các sản phẩm DNA plasmid ñược kiểm tra bằng cách cắt với enzyme EcoRI. 58 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… viii 4.6 Giản ñồ giải trình tự (chromatogram) thành phần nucleotide của vùng gen VP1 virus viêm gan vịt của các chủng lần lượt là DN2, DN1, NB, HY, DH-EG-2000 NC Các nucleotide tiếp nhận thuốc nhuộm huỳnh quang (fluorescent dye), khi ñọc bằng tia laze cho hiển thị Adenine có màu ñỏ (red), Thymine có màu xanh nước biển (blue), Guanine có màu xanh lá cây (green) Cystosine có màu ñen (black). 60 4.7 Trình tự Nucleotit axit amin tương ứng của vùng gen VP1 của các chủng virus viêm gan vịt lần lượt là DN2, DN1, NB, HY, DH-EG-2000 NC. 64 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 1 1. MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề Việt Nam là một nước ñang phát triển với ngành nông nghiệp luôn giữ vai trò then chốt nhằm cung cấp lương thực - thực phẩm cho người tiêu dùng trong nước từng bước xuất khẩu. Trong ñó ngành chăn nuôi gia cầm, ñặc biệt ngành chăn nuôi vịt trở thành ngành sản xuất hàng hóa quan trọng góp phần vào chương trình xóa ñói giảm nghèo cho bà con nông dân. Xuất phát từ những ñặc ñiểm riêng biệt về ñịa hình tập quán canh tác ñiều kiện thuận lợi cho việc chăn thả tự nhiên nên vịt là loài thủy cầm ñược người nông dân ưa chuộng vì chúng dễ nuôi, qui mô ñàn ña dạng phù hợp với tập quán chăn nuôi nhỏ lẻ. Tuy nhiên song song với việc phát triển của ñàn vịt thì dịch bệnh xảy ra ngày càng nhiều diễn biến rất phức tạp. Một trong những bệnh thường gặp gây thiệt hại kinh tế cho người chăn nuôi phải kể ñến bệnh viêm gan vịt, bệnh chỉ xẩy ra vịt con dưới 6 tuần tuổi nhưng thường thấy vịt con từ 1 – 3 tuần tuổi mà nặng nhất lại vịt con từ 1 – 7 ngày tuổi với tỷ lệ ốm, chết lên tới 95 - 100%. Tuy vậy những nghiên cứu về bệnh viêm gan vịt do virus nước ta chưa nhiều, ñặc biệt là nghiên cứu về hệ gen của các chủng virus thuộc các vùng khác nhau nước ta. Các nghiên cứu chỉ ra rằng hệ gen của virus gây bệnh viêm gan vịt chứa axit ribonucleic (RNA), sợi ñơn dương có ñộ dài khoảng 7600 – 7700 Nucleotide. Trong hệ gen của virus viêm gan vịt thì vùng ñược quan tâm nhiều nhất là vùng gen mã hóa cho protein cấu trúc VP1. Vùng gen này ñã ñược chứng minh là gen kháng nguyên thiết yếu, nó vừa quyết ñịnh tính kháng nguyên, vừa quyết ñịnh tính gây bệnh của virus (Mulder cs 2000). Mặt khác, các nghiên cứu gần ñây về hệ gen sinh học phân tử phân loại virus ñều cho thấy virus viêm gan vịt thuộc về một nhóm mới trong họ

Ngày đăng: 27/11/2013, 22:15

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
1. Nguyễn Văn Cảm, Nguyễn Thị Thu Hà, Nguyễn Khánh Ly (2001), Nghiờn cứu biến ủổi bệnh lý bệnh viờm gan virus vịt. Tạp chớ Khoa học và kỹ thuật Thú y 4: tr 48-51 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tạp chớ Khoa học và kỹ thuật Thú y
Tác giả: Nguyễn Văn Cảm, Nguyễn Thị Thu Hà, Nguyễn Khánh Ly
Năm: 2001
2. Trần Minh Châu, Lê Thu Hồng (1985), Thăm dò tạo chủng vaccine nhược ủộc viờm gan vịt bằng chủng phõn lập tại ủịa phương. Tạp chí Khoa học và kỹ thuật Thú y 4: tr 3-8 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tạp chí Khoa học và kỹ thuật Thú y
Tác giả: Trần Minh Châu, Lê Thu Hồng
Năm: 1985
3. Lê Minh Chắ, Hồ đình Chúc, Bùi Quý Huy (1999), Kết quả ựiều tra dịch bệnh gia súc, gia cầm 5 tỉnh phía Bắc (1995 - 1997). Tạp chí Khoa học và kỹ thuật Thú y 6(3): tr 75-78 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Khoa học và kỹ thuật Thú y
Tác giả: Lê Minh Chắ, Hồ đình Chúc, Bùi Quý Huy
Năm: 1999
4. Bựi Thị Cỳc (2002), Nghiờn cứu biến ủổi bệnh lý ủại thể, vi thể và siờu vi thể bệnh viêm gan siêu vi trùng vịt. Luận văn Thạc sĩ Khoa học Nông nghiệp Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiờn cứu biến ủổi bệnh lý ủại thể, vi thể và siờu vi thể bệnh viêm gan siêu vi trùng vịt
Tác giả: Bựi Thị Cỳc
Năm: 2002
5. Nguyễn ðường, Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Khắc Tuấn, Nguyễn Thị Bớch Lộc, Nguyễn Bỏ Hiờn (1990) Vi sinh vật học ủại cương. Nhà Xuất bản Nông nghiệp, Hà Nội Sách, tạp chí
Tiêu đề: Vi sinh vật học ủại cương
Nhà XB: Nhà Xuất bản Nông nghiệp
6. Nguyễn Bỏ Hiờn, Trần Thị Lan Hương (2004), Một số vấn ủề về miễn dịch thụ ủộng ở gia sỳc, gia cầm non, NXB Nụng nghiệp Hà Nội Sách, tạp chí
Tiêu đề: Một số vấn ủề về miễn dịch thụ ủộng ở gia sỳc, gia cầm non
Tác giả: Nguyễn Bỏ Hiờn, Trần Thị Lan Hương
Nhà XB: NXB Nụng nghiệp Hà Nội
Năm: 2004
7. Lê Thanh Hoà (2002), Sinh học phân tử: nguyên lý và ứng dụng, Viện công nghệ sinh học, Viện Khoa học và công nghệ Việt Nam, (104 trang) Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sinh học phân tử
Tác giả: Lê Thanh Hoà
Năm: 2002
9. Nguyễn Phục Hưng (2004), Tình hình mắc bệnh viêm gan vịt do virus ở một số tỉnh ủồng bằng Bắc bộ, phõn lập virus gõy bệnh, Nghiờn cứu ủặc tớnh sinh học của chủng virus nhược ủộc viờm gan vịt DH-EG-2000 và qui trỡnh sản xuất vaccine. Luận văn thạc sĩ nông nghiệp, Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tình hình mắc bệnh viêm gan vịt do virus ở một số tỉnh ủồng bằng Bắc bộ, phõn lập virus gõy bệnh, Nghiờn cứu ủặc tớnh sinh học của chủng virus nhược ủộc viờm gan vịt DH-EG-2000 và qui trỡnh sản xuất vaccine
Tác giả: Nguyễn Phục Hưng
Năm: 2004
10. Trần Thị Lan Hương (2007), Phân lập virus gây bệnh viêm gan vịt trờn ủàn vịt con nuụi tại một số vựng phụ cận Hà Nội. Tạp chớ Khoa học và kỹ thuật Thú y 5: tr.13-16 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tạp chớ Khoa học và kỹ thuật Thú y
Tác giả: Trần Thị Lan Hương
Năm: 2007
11. ðoàn Thị Thanh Hương (2010), Nghiên cứu giải mã gen và hệ gen virus viờm gan vịt phõn lập tại Việt Nam và xỏc ủịnh vị trớ phõn loại. Luận văn tiến sỹ hoá sinh học. tr. 45-65 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu giải mã gen và hệ gen virus viờm gan vịt phõn lập tại Việt Nam và xỏc ủịnh vị trớ phõn loại
Tác giả: ðoàn Thị Thanh Hương
Năm: 2010
12. Bùi Thanh Khiết (2007), Nghiên cứu quy trình sản xuất vaccine viêm gan vịt từ chủng virus vaccine nhược ủộc DH-EG-2000 và ứng dụng phũng, can thiệp dịch vào thực tế sản xuất, Luận văn thạc sĩ nông nghiệp, Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu quy trình sản xuất vaccine viêm gan vịt từ chủng virus vaccine nhược ủộc DH-EG-2000 và ứng dụng phũng, can thiệp dịch vào thực tế sản xuất
Tác giả: Bùi Thanh Khiết
Năm: 2007
13. Nguyễn ðức Lưu, Vũ Như Quán (2002) Bệnh viêm gan virus vịt. Tạp chí Khoa học và kỹ thuật Thú y 9(1): tr. 87-90 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tạp chí Khoa học và kỹ thuật Thú y
14. Nguyễn Vĩnh Phước, Hồ đình Chúc, Nguyễn Văn Hanh, đặng Thế Huynh (1978), Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc, gia cầm, NXB Nông nghiệp, Hà Nội Sách, tạp chí
Tiêu đề: Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc, gia cầm
Tác giả: Nguyễn Vĩnh Phước, Hồ đình Chúc, Nguyễn Văn Hanh, đặng Thế Huynh
Nhà XB: NXB Nông nghiệp
Năm: 1978
15. Phạm Văn Ty (2007), Virus học. Nhà xuất bản giáo dục. B. TÀI LIỆU NƯỚC NGOÀI Sách, tạp chí
Tiêu đề: Virus học
Tác giả: Phạm Văn Ty
Nhà XB: Nhà xuất bản giáo dục. B. TÀI LIỆU NƯỚC NGOÀI
Năm: 2007
16. Asplin FD (1958), An attenuated strain of duck hepatitis virus. Vet Rec 70: 1226-1230 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Vet Rec
Tác giả: Asplin FD
Năm: 1958
17. Asplin FD (1961), Notes on epidemiology and vaccination for virus hepatitis of ducks. Off Int Epizoot Bull 56: 793-800 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Off Int Epizoot Bull
Tác giả: Asplin FD
Năm: 1961
18. Davis D, Hannant D (1987), Fractionation of neutralizing antibodies in serum of ducklings vaccinated with live duck hepatitis virus vaccine Res Vet Sci 43: 276-277 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Res Vet Sci
Tác giả: Davis D, Hannant D
Năm: 1987
19. Ding C, Zhang D ( 2007), Molecular analysis of duck hepatitis virus type 1. Virol 361: 9-17 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Virol
20. Gough RE, Spackman D (1981), Studies with inactivated duck virus hepatitis vaccines in breeder ducks. Avian Pathol 10: 471-479 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Avian Pathol
Tác giả: Gough RE, Spackman D
Năm: 1981

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

Hình 2.1. Tư thế chết ựiển hình của vịt khi bị nhiễm virus viêm gan vịt (a). Gan vịt xuất huyết (b)  - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 2.1. Tư thế chết ựiển hình của vịt khi bị nhiễm virus viêm gan vịt (a). Gan vịt xuất huyết (b) (Trang 16)
Hỡnh 2.1. Tư thế chết ủiển hỡnh của vịt khi bị nhiễm virus viờm gan vịt  (a). Gan vịt xuất huyết (b) - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
nh 2.1. Tư thế chết ủiển hỡnh của vịt khi bị nhiễm virus viờm gan vịt (a). Gan vịt xuất huyết (b) (Trang 16)
Hình 2.2. Cấu trúc không gian của picornavirus - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 2.2. Cấu trúc không gian của picornavirus (Trang 24)
Hình 2.3. Sơ ựồ hệ gen và chuỗi polypeptide của virus viêm gan vịt (Tseng và cs, 2007)  - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 2.3. Sơ ựồ hệ gen và chuỗi polypeptide của virus viêm gan vịt (Tseng và cs, 2007) (Trang 25)
Hỡnh 2.3. Sơ ủồ hệ gen và chuỗi polypeptide của virus viờm gan vịt  (Tseng và cs, 2007) - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
nh 2.3. Sơ ủồ hệ gen và chuỗi polypeptide của virus viờm gan vịt (Tseng và cs, 2007) (Trang 25)
Hình 2.4. Mô hình các bước của phản ứng PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 2.4. Mô hình các bước của phản ứng PCR (Trang 30)
Hình 2.4. Mô hình các bước của phản ứng PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 2.4. Mô hình các bước của phản ứng PCR (Trang 30)
Hình 2.5. Mô hình nguyên lý của phản ứng RT-PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 2.5. Mô hình nguyên lý của phản ứng RT-PCR (Trang 31)
Hình 2.5. Mô hình nguyên lý của phản ứng RT-PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 2.5. Mô hình nguyên lý của phản ứng RT-PCR (Trang 31)
Bảng 3.1. Danh sách các mẫu bệnh phẩm viêm gan vịt sử dụng trong nghiên cứu  - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 3.1. Danh sách các mẫu bệnh phẩm viêm gan vịt sử dụng trong nghiên cứu (Trang 38)
Hình 3.1 Sơ ựồ vị trắ bám của mồi ựể thu nhận ựoạn DNA (~0,8kb) chứa gen VP1 (714bp) và chiến lược giải mã gen VP1 của virus viêm gan vịt  - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 3.1 Sơ ựồ vị trắ bám của mồi ựể thu nhận ựoạn DNA (~0,8kb) chứa gen VP1 (714bp) và chiến lược giải mã gen VP1 của virus viêm gan vịt (Trang 39)
Hỡnh 3.1 Sơ ủồ vị trớ bỏm của mồi ủể thu nhận ủoạn DNA (~0,8kb) chứa  gen VP1 (714bp) và chiến lược giải mã gen VP1 của virus viêm gan vịt - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
nh 3.1 Sơ ủồ vị trớ bỏm của mồi ủể thu nhận ủoạn DNA (~0,8kb) chứa gen VP1 (714bp) và chiến lược giải mã gen VP1 của virus viêm gan vịt (Trang 39)
3.3.3 Phương pháp tiến hành phản ứng RT-PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
3.3.3 Phương pháp tiến hành phản ứng RT-PCR (Trang 43)
Bảng 3.3: Thành phần phản ứng RT-PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 3.3 Thành phần phản ứng RT-PCR (Trang 43)
Bảng 3.3: Thành phần phản ứng RT-PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 3.3 Thành phần phản ứng RT-PCR (Trang 43)
Bảng 3.4: Chu kỳ nhiệt của phản ứng PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 3.4 Chu kỳ nhiệt của phản ứng PCR (Trang 44)
Bảng 3.4:  Chu kỳ nhiệt của phản ứng PCR - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 3.4 Chu kỳ nhiệt của phản ứng PCR (Trang 44)
Hình 3.2. Sơ ựồ qui trình nghiên cứu, lưu giữ và giải mã vùng gen VP1 của virus viêm gan vịt - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 3.2. Sơ ựồ qui trình nghiên cứu, lưu giữ và giải mã vùng gen VP1 của virus viêm gan vịt (Trang 53)
Hỡnh 3.2. Sơ ủồ qui trỡnh nghiờn cứu, lưu giữ và giải mó vựng gen VP1  của virus viêm gan vịt - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
nh 3.2. Sơ ủồ qui trỡnh nghiờn cứu, lưu giữ và giải mó vựng gen VP1 của virus viêm gan vịt (Trang 53)
Bảng 4.1. Kết quả phân lập virus gây bệnh viêm gan vịt trên phôi vịt - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 4.1. Kết quả phân lập virus gây bệnh viêm gan vịt trên phôi vịt (Trang 57)
Bảng 4.1. Kết quả phân lập virus gây bệnh viêm gan vịt trên phôi vịt - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 4.1. Kết quả phân lập virus gây bệnh viêm gan vịt trên phôi vịt (Trang 57)
Bảng 4.2. Kết quả kiểm tra bệnh tắch ựại thể của phôi vịt phân lập virus - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 4.2. Kết quả kiểm tra bệnh tắch ựại thể của phôi vịt phân lập virus (Trang 59)
Bảng 4.2. Kết quả kiểm tra bệnh tớch ủại thể của phụi vịt phõn lập virus - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 4.2. Kết quả kiểm tra bệnh tớch ủại thể của phụi vịt phõn lập virus (Trang 59)
Hình 4.1. Kiểm tra RNA tổng số tách chiết từ các mẫu - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 4.1. Kiểm tra RNA tổng số tách chiết từ các mẫu (Trang 62)
Hình 4.1. Kiểm tra RNA tổng số tách chiết từ các mẫu - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 4.1. Kiểm tra RNA tổng số tách chiết từ các mẫu (Trang 62)
Hình 4.2: Kết quả ựiện di sản phẩm RT-PCR (~800 bp) của mẫu virus cường ựộc viêm gan vịt DN1, DN2  và NB trên thạch agarose 1,2% - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 4.2 Kết quả ựiện di sản phẩm RT-PCR (~800 bp) của mẫu virus cường ựộc viêm gan vịt DN1, DN2 và NB trên thạch agarose 1,2% (Trang 63)
Hỡnh 4.2: Kết quả ủiện di sản phẩm RT-PCR (~ 800 bp) của mẫu virus  cường ủộc viờm gan vịt DN1, DN2  và NB trờn thạch agarose 1,2% - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
nh 4.2: Kết quả ủiện di sản phẩm RT-PCR (~ 800 bp) của mẫu virus cường ủộc viờm gan vịt DN1, DN2 và NB trờn thạch agarose 1,2% (Trang 63)
Hình 4.3: Kết quả ựiện di sản phẩm RT-PCR (~800 bp) của mẫu HY, DH-EG-2000 và NC trên thạch agarose 1% - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 4.3 Kết quả ựiện di sản phẩm RT-PCR (~800 bp) của mẫu HY, DH-EG-2000 và NC trên thạch agarose 1% (Trang 64)
Hỡnh 4.3: Kết quả ủiện di sản phẩm RT-PCR (~800 bp) của mẫu HY,  DH-EG-2000 và NC trên thạch agarose 1% - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
nh 4.3: Kết quả ủiện di sản phẩm RT-PCR (~800 bp) của mẫu HY, DH-EG-2000 và NC trên thạch agarose 1% (Trang 64)
Qua hình 4.4, chúng tôi nhận thấy ựĩa thạch có những khuẩn lạc màu trắng ngà và những khuẩn lạc màu xanh - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
ua hình 4.4, chúng tôi nhận thấy ựĩa thạch có những khuẩn lạc màu trắng ngà và những khuẩn lạc màu xanh (Trang 65)
Hỡnh 4.4. Kết quả nuụi cấy vi khuẩn tỏi tổ hợp trờn ủĩa thạch (LB-agar  1,5%) có chứa kháng sinh Kanamycin và X-gal, bao gồm các khuẩn lạc - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
nh 4.4. Kết quả nuụi cấy vi khuẩn tỏi tổ hợp trờn ủĩa thạch (LB-agar 1,5%) có chứa kháng sinh Kanamycin và X-gal, bao gồm các khuẩn lạc (Trang 65)
Hình 4.5. Kết quả tách dòng vùng gen VP1 của virus viêm gan vịt ựược ựiện di kiểm tra trên thạch agarose 1,2%, các sản phẩm DNA plasmid  - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 4.5. Kết quả tách dòng vùng gen VP1 của virus viêm gan vịt ựược ựiện di kiểm tra trên thạch agarose 1,2%, các sản phẩm DNA plasmid (Trang 67)
Hình 4.6. Giản ựồ giải trình tự (chromatogram) thành phần nucleotide của vùng gen VP1 virus viêm gan vịt của các chủng lần lượt là: DN2,  - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Hình 4.6. Giản ựồ giải trình tự (chromatogram) thành phần nucleotide của vùng gen VP1 virus viêm gan vịt của các chủng lần lượt là: DN2, (Trang 69)
Hỡnh 4.6. Giản ủồ giải trỡnh tự (chromatogram) thành phần nucleotide  của vùng gen VP1 virus viêm gan vịt của các chủng lần lượt là: DN2, - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
nh 4.6. Giản ủồ giải trỡnh tự (chromatogram) thành phần nucleotide của vùng gen VP1 virus viêm gan vịt của các chủng lần lượt là: DN2, (Trang 69)
Bảng 4.3. Tỷ lệ (%) ựồng nhất về nucleotide (trên ựường chéo) và tương ựồng axit amin (dưới ựường chéo) giữa các chủng virus viêm gan vịt  - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 4.3. Tỷ lệ (%) ựồng nhất về nucleotide (trên ựường chéo) và tương ựồng axit amin (dưới ựường chéo) giữa các chủng virus viêm gan vịt (Trang 74)
Bảng 4.3. Tỷ lệ (%) ủồng nhất về nucleotide (trờn ủường chộo) và tương  ủồng axit amin (dưới ủường chộo) giữa cỏc chủng virus viờm gan vịt - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
Bảng 4.3. Tỷ lệ (%) ủồng nhất về nucleotide (trờn ủường chộo) và tương ủồng axit amin (dưới ủường chộo) giữa cỏc chủng virus viờm gan vịt (Trang 74)
Phụ lục 1: Bảng mã di truyền sử dụng chovirus TTT  TTC  TTA  TTG F Phe F Phe L Leu L Leu   TCT TCC TCA TCG S Ser S Ser S Ser S Ser   TAT TAC TAA TAG  Y Tyr Y Tyr  * STOP * STOP    TGT  TGC TGA  TGG  C Cys C Cys  * STOP W Trp  CTT  CTC  CTA  CTG L Leu L Le - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
h ụ lục 1: Bảng mã di truyền sử dụng chovirus TTT TTC TTA TTG F Phe F Phe L Leu L Leu TCT TCC TCA TCG S Ser S Ser S Ser S Ser TAT TAC TAA TAG Y Tyr Y Tyr * STOP * STOP TGT TGC TGA TGG C Cys C Cys * STOP W Trp CTT CTC CTA CTG L Leu L Le (Trang 82)
Phụ lục 1: Bảng mã di truyền sử dụng cho virus  TTT - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
h ụ lục 1: Bảng mã di truyền sử dụng cho virus TTT (Trang 82)
Phụ lục 2: Bảng kắ hiệu 20 axit amin thông thường - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
h ụ lục 2: Bảng kắ hiệu 20 axit amin thông thường (Trang 83)
Phụ lục 2: Bảng kí hiệu 20 axit amin thông thường - Luận văn khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin DH   EG   2000
h ụ lục 2: Bảng kí hiệu 20 axit amin thông thường (Trang 83)

TRÍCH ĐOẠN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w