3. NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2.4Dụng cụ và hoá chất thắ nghiệm
3.2.4.1 Dụng cụ thiết bị
- Panh, kéo, kẹp, hộp lồng, ống nghiệm, seringer các loại 1 và 5ml, dùi tiêm trứng, ống Eppendoft, pipet, găng tay...
- Tủ ấm 37oC, tủ sấy khô, nồi hấp cao áp. Tủ lạnh các loại: 0 - 4oC, -
VP1(714 bp) 3ỖUTR AAAn DHVR 5ỖUTR DHVF DHV-1 VPg (2106-2819) (~ 0.8kb) Mồi ngược DH4R (2810-2830) Mồi xuôi DH3F (2064-2084)
20oC, -86oC. Buồng cấy vô trùng. đèn soi trứng, khay ựựng trứng. - Máy ly tâm, máy PCR, máy ựiện di, máy chụp ảnh gel...
- Máy nuôi lắc tế bào, máy ổn nhiệt, máy giải trình tự tự ựộng ABI Avant Genetic Analyzer 3100, máy tắnh và các phần mềm sinh Ờ tin học.
3.2.4.2 Hoá chất và môi trường cần thiết
- Nước sinh lý 0,9%, cồn 70o, cồn Iod 5%; Kháng sinh: Penicillin, Streptomycin... Streptomycin...
- Hóa chất sử dụng cho phản ứng RT Ờ PCR: Nuclease free water, dNTP, enzyme, primers, TBE, agarose...
- Bộ kit tách chiết RNA tổng số, QIAmp Viral Mini kit (QIA GEN Inc, USA) và hóa chất do hãng QIAGEN cung cấp.
- Bộ kit dùng cho phản ứng RT-PCR do hãng Invitrogen cung cấp.
- Bộ kit dùng ựể tinh sạch sản phẩm PCR/RT-PCR do hãng QIAGEN và BIOONER cung cấp.
- Bộ kit tách dòng ỢTA-cloning kitỢ do hãng Invitrogen cung cấp.
- Bộ kit tách DNA plasmid tái tổ hợp, ỢQIAprep Spin Miniprep kitỢ do hãng QIAGEN cung cấp.
- Bộ kit dùng cho phản ứng PCR giải trình tự.
- Bộ kit dùng ựể tinh sạch sản phẩm PCR giải trình tự Kit DyeEx do hãng QIAGEN cung cấp.
- Enzyme giới hạn EcoRI của New England BioLabs.