BÁO cáo (dược PHÂN TÍCH) xác định dư lượng penicillin g và v trong thực phẩm bằng phương pháp HPLC

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NUÔI THÚ Y  CHUYÊN ĐỀ XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG PENICILLIN G VÀ V TRONG THỰC PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO GVHD: Sinh viên thực hiện: TP.Hồ Chí Minh MỤC LỤC I Đặt vấn đề 1.1 Tình hình sử dụng kháng sinh penicillin giới 1.2 Tình hình sử dụng kháng sinh penicillin Việt Nam .3 II Nội dung 2.1 Tổng quan penicillin .4 2.1.1 Penicillin G V 2.1.2 Tính chất tác dụng Penicillin G Penicillin V 2.1.3 Giới hạn cho phép 2.1.4 Tác hại penicillin người .5 2.2 Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.2.2 Hoá chất, dụng cụ dùng nghiên cứu 2.2.3 Chuẩn bị dung dịch chuẩn dung dịch thử .7 2.2.4 Nguyên tắc chung phương pháp HPLC 2.2.5 Xử lý mẫu III KẾT QUẢ 3.1 Các thơng số tối ưu cho q trình chạy sắc ký là: 3.2 Khảo sát khoảng tuyến tính lập đường chuẩn 3.3 Xác định giới hạn phát LOD giới hạn định lượng LOQ .10 3.4 Độ lặp lại 11 3.5 Độ thu hồi 13 3.6 Ứng dụng phân tích mẫu thực tế 14 IV KẾT LUẬN 17 TÀI LIỆU THAM KHẢO 18 I Đặt vấn đề 1.1 Tình hình sử dụng kháng sinh penicillin giới Vấn đề sử dụng kháng sinh thức ăn chăn nuôi, ều tr ị bệnh gia súc, gia cầm phổ biến coi tiến khoa học công ngh ệ áp dụng nông nghiệp, để chữa bệnh làm vật nuôi tăng trưởng nhanh, đáp ứng nhu cầu thịt ngày tăng cho gia tăng dân s ố th ế gi ới Tuy nhiên việc tùy tiện sử dụng thuốc kháng sinh dẫn đến hậu lượng kháng sinh t ồn dư thực phẩm gia súc, gia cầm vượt ngưỡng tối đa cho phép, người sử dụng loại thực phẩm thời gian dài bị biến đổi hệ vi khuẩn thể bị kháng thuốc gây nguy hại cho sức khỏe cộng đồng Ở Mỹ hàng năm khoảng triệu pao (xấp xỉ 2730 tấn) kháng sinh đ ược dùng chăn nuôi Xấp xỉ 80% gia cầm, 70% l ợn; 70% bò s ữa 60% bò th ịt Mỹ ni dưỡng TA có bổ sung kháng sinh USD chi phí cho kháng sinh dùng TA, người chăn nuôi thu l ợi tức 2- USD (Ensminger & ctv , 1990) Theo Jone Richke (2003), Mỹ có 32 loại KS bi ệt dược phép s dụng TA gia cầm, 15 loại thuốc phịng cầu trùng, 11 loại dùng chất KTST loại dùng cho mục đích khác Trong s ố 32 loại KS có loại (bacitracin, chlotetracycline, erythromycin, lincomycin, novobiocin, oxytetracycline penicillin) dùng dân y Theo số liệu viện Thú y Mỹ (AHI), lượng kháng sinh sử dụng chăn nuôi Mỹ năm 1999 khoảng 20,42 tri ệu Pao (9270 tấn), kháng sinh nhóm Lonophore Arsen chiếm nhiều (47,5%) Tetracycline (15,67%), Penicillin (4,26%), loại khác (32,57%) Trong s ố 20,42 triệu Pao, có khoảng 2,8 triệu pao(13,7%) dùng chất kích thích sinh trưởng 1.2 Tình hình sử dụng kháng sinh penicillin Việt Nam Tại Việt Nam, theo kết điều tra sơ Viện khoa học Kỹ thu ật Nông nghiệp Việt Nam cho thấy: có tới 75% số mẫu thịt 66,7% số mẫu gan gia súc, gia cầm bán chợ có mức tồn dư kháng sinh v ượt ngưỡng cho phép Kết khảo sát tình hình sử dụng kháng sinh chăn ni l ợn thịt, gà thịt số trang trại chăn nuôi tập trung địa bàn tỉnh H ưng Yên, Hà Tây 30 trang trại chăn nuôi lợn thịt 30 trang trại chăn nuôi gà th ịt, k ết qu ả cho thấy: 100% trang trại chăn nuôi có sử dụng kháng sinh, v ới mục đích ch ủ yếu để trị bệnh( 63,3% với lợn thịt, 50% với gà thịt); v ới mục đích phịng tr ị bệnh (13,3% với lợn thịt, 46,7% với gà thịt) Kết khảo sát tình hình sử dụng kháng sinh 55 trại chăn nuôi l ợn tỉnh Đồng Nai Bình Dương: loại kháng sinh s d ụng nhi ều nh ất Tylosin (16,39%), Amoxicillin (11,89%), Gentamycin (8,61%), Enrofloxacin (6,56%), Penicillin (6,15%),… Việc sử dụng kháng sinh trang trại chăn nuôi ch ưa h ợp lý: l ựa ch ọn loại kháng sinh, liều sử dụng, liều trình điều trị, chủ yếu dựa vào kinh nghi ệm người chăn nuôi; chưa ý thời gian ngừng sử dụng thuốc trước khai thác sản phẩm (thịt, trứng, sữa) II Nội dung 2.1 Tổng quan penicillin 2.1.1 Penicillin G V Penicillin kháng sinh thể hệ có tính kháng khuẩn r ất mạnh đ ối với nhiều loại vi khuẩn Penicillin chiết từ dịch nuôi cấy n ấm Penicillium chrysogenum Penicillin lần phát có tác dụng ch ống vi khuẩn gram dương Staphylococcus, Diplococcus khơng có tác dụng chống vi khuẩn gram âm nấm men Vài thập niên trở l ại phát nhiều loại pencillin s ố có hiệu qu ả ch ống l ại vi khu ẩn gram âm nấm men Saccharomyces cerevisae đơn bội E.coli Bảng 1: Thông tin chung penicillin G V 2.1.2 Tính chất tác dụng Penicillin G Penicillin V Penicillin G Penicillin V hai penicillin tự nhiên thu t môi trường nuôi cấy nấm penicillium chrysogenum Chúng định bệnh nhiễm khuẩn thông thường: nhiễm khuẩn đường hô hấp, tai mũi họng, nhiễm khuẩn huyết… Penicillin G V có độc tính thấp, gi ống nh penicillin khác dễ gây dị ứng thuốc: mẩn ngứa, mày đay, ngoại ban, hội ch ứng Stevensjohnson Lyell, nguy hiểm shock phản vệ Ngồi gây viêm tĩnh mạch huyết khối, thi ếu máu tan máu, gi ảm bạch cầu 2.1.3 Giới hạn cho phép Bảng 2: Giới hạn cho phép tồn dư penicillin G V thực phẩm: 2.1.4 Tác hại penicillin người Các chất kháng sinh tồn dư sản phẩm chăn nuôi tr ước h ết làm đ ảo lộn cơng nghệ chế biến ví dụ: sữa có kháng sinh làm ch ậm q trình lên men sữa chua hay lên men pho-mat Nhưng nghiêm trọng chất kháng sinh bổ sung vào th ức ăn gây tượng “chọn lọc” vi sinh vật kháng lại chất kháng sinh, đ ặc bi ệt hi ện tượng “kháng thuốc chéo” Bằng thực nghiệm nhận thấy lồi vi khu ẩn A có khả kháng lại penicillin chúng chống lại tetracycline aminoglycoside Đây nguy lớn đe dọa sức khỏe người, lồi vi sinh vật gây bệnh “lờn” kháng sinh, không may m ắc b ệnh nhiễm trùng lấy thuốc để chữa trị tương lai? Theo báo cáo y tế, penicillin kháng sinh th ường gây d ị ứng nh ất Đã có trường hợp người bị mẩn da trầm trọng uống sữa có dư l ượng penicillin (