VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT, TRỰC KHUẨN mủ XANH, KHÁNG SINH đồ (THỰC HÀNH VI SINH)

Buổi VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT TRỰC KHUẨN MỦ XANH KHÁNG SINH ĐỒ Chẩn đoán trực khuẩn gram (-) đường ruột Một số tính chất chung trực khuẩn Gram (-) đường ruột - Không bào tử - Di động hay khơng di động - Hiếu khí hay kỵ khí tùy ý - Mọc dễ môi trường thông thường Chẩn đoán trực khuẩn gram (-) đường ruột Một số tính chất chung trực khuẩn Gram (-) đường ruột -Lên men đường glucose - Có sinh hay không sinh - Khử nitrate thành nitrite - Oxidase âm Chẩn đốn trực khuẩn gram (-) đường ruột • Triple Sugar Iron agar (TSI) • Sinh (Durham/glucose) • • • • Di động Indol Methyl Red Simmons Citrate agar • Lysine Iron agar (LIA) • Decarboxylase Broth (Moeller) • Voges-Proskauer • Christensen Urea agar • Phenylalanine • Malonate Broth • Phenyl Red Carbohydrate Brot h Chẩn đốn trực khuẩn gram (-) đường ruột Chẩn đoán trực khuẩn gram (-) đường ruột MƠI TRƯỜNG ĐẶC Chẩn đốn trực khuẩn gram (-) đường ruột KIA Glucose Lactose acid phenol red->vàng Hơi TSI Natri sulfit→H2S Ferric ammonium sulfat →FeS Chẩn đoán trực khuẩn gram (-) đường ruột E. coli Salmonella TSI Shigella P. aeruginosa Mannitol di động Simmon’s Citrate Agar Citrate(bromothymol blue) Citrase/VK > oxaloacetic acid + acetic acid Oxaloacetic acid > Pyruvic acid + Carbon dioxide Carbon dioxide + Sodium ions > Sodium Carbonate(↑pH: 7,6; đổi màu Brom) Chẩn đoán trực khuẩn gram (-) đường ruột MÔI TRƯỜNG LỎNG KHÁNG SINH ĐỒ Phương pháp: Phương pháp đĩa giấy (Kirby – Bauer) Trải VK cần làm Phương pháp Phương pháp pha loãng liên tiếp (MIC) mặt Đánh số thứ tự ống nghiệm:1-10 Lấy 0,5 ml môi trường dinh dưỡng thạch Mueller hay NA lỏng (5ml): ống nghiệm 2-10 Để thạch khô, đặt loại đĩa Lấy 1ml KS pha loãng (1ml): 0,5 ml cho ống 1, 2→ trộn ống KS cách bờ hộp thạch: 1cm hút 0,5 ml cho vào ống Ủ ấm: 37°C/24 → VK nhạy, Làm tương tự đến ống 9, hút 0,5 ml/ống bỏ kháng : đường kính vịng vơ Ống 10 khơng có KS pha lỗng Hút 5ml canh cấy VK(5ml) cho 0,5ml khuẩn/ đường kính chuẩn ống 1-10 Lắc đều, ủ 37°C/24 → ống cuối cùng: MIC Đĩa giấy KHÁNG SINH ĐỒ E-test -E – test độ dốc kháng sinh 15 mức nồng độ kháng sinh ổn định xác định trước dải nhựa - Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC): nồng độ nhỏ để thuốc tập trung vào mô để tiêu diệt vi khuẩn, vi nấm, - Hơn 100 kháng sinh có sẵn thử nghiệm vi khuẩn hiếu khí sinh vật khó tính: Streptococcus pneumonia, Haemophilus influenza, H pylori, N meningitidis, N gonorrhoeae, vi khuẩn yếm khí, nấm Mycobacteria E-test E-test Penicillin G (PG) Cefotaxime(TX) E-test MIC is the lowest concentration of drug capable of preventing microbial growth; MIC can be estimated using the E test   A plastic coated strip contains a gradient of antibiotic concentrations and the minimal inhibitory concentration is read from a scale printed on the strip MTDD(ml) 0,5 0,5 KSPL 0,5 (ml) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 10 ống chứng ống chứng Chúc em học tốố t ... aerogenes KHÁNG SINH ĐỒ Mục đích: o Xác định độ nhạy cảm/hiện tượng đề kháng vi khuẩn một/nhiều loại kháng sinh o Kiểm tra thuốc kháng sinh tác dụng với vi khuẩn gây bệnh o Tìm tính kháng sinh dược... đốn trực khuẩn gram (-) đường ruột Một số tính chất chung trực khuẩn Gram (-) đường ruột -Lên men đường glucose - Có sinh hay khơng sinh - Khử nitrate thành nitrite - Oxidase âm Chẩn đoán trực khuẩn. .. tính kháng sinh dược liệu→điều trị KHÁNG SINH ĐỒ Nguyên tắc: vi khuẩn( VK) ↓ tiếp xúc [ kháng sinh] định (+) Mọc Đề kháng/ VK (-) Không mọc Nhạy/VK KHÁNG SINH ĐỒ Phương pháp: Phương pháp đĩa giấy