VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT TRỰC KHUẨN MỦ XANH KHÁNG SINH ĐỒ

VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT TRỰC KHUẨN MỦ XANHKHÁNG SINH ĐỒ BS.. Chẩn đoán trực khuẩn gram - đường ruột Một số tính chất chung của trực khuẩn Gram - đường ruột - Không bào tử - Di động hay không

Trang 1

VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT TRỰC KHUẨN MỦ XANH

KHÁNG SINH ĐỒ

BS Trần Minh Anh Đào

BM Vi sinh

Buổi 6

Trang 2

Chẩn đoán trực khuẩn gram (-) đường ruột

Một số tính chất chung của trực khuẩn Gram (-) đường ruột

- Không bào tử

- Di động hay không di động

- Hiếu khí hay kỵ khí tùy ý

- Mọc dễ trên các môi trường thông thường

Trang 3

Một số tính chất chung của trực khuẩn Gram (-) đường ruột

-Lên men đường glucose

- Có sinh hơi hay không sinh hơi

- Khử nitrate thành nitrite

- Oxidase âm

Trang 4

 Triple Sugar Iron agar (TSI)

 Sinh hơi (Durham/glucose)

 Di động

 Indol

 Methyl Red

 Simmons Citrate agar

 Lysine Iron agar (LIA)

 Decarboxylase Broth (Moeller)

Trang 5

Trang 6

MÔI TRƯỜNG ĐẶC

Trang 8

Trang 9

Simmon’s Citrate Agar

Mannitol

di động

Citrate(bromothymol blue)

-Citrase/VK -> oxaloacetic acid + acetic acid

Oxaloacetic acid -> Pyruvic acid

+ Carbon dioxide

Carbon dioxide + Sodium ions ->

Sodium Carbonate(↑pH: 7,6; đổi màu Brom)

Trang 10

MÔI TRƯỜNG LỎNG

Trang 11

I ndol/pepton

Tryptophan/pepton Tryptophanase/vk  Indole + Pyruvic Acid + Ammonia

Indole + thuốc thử Kovac’s(aldehyde) = màu đỏ

Indole + thuốc thử Kovac’s(aldehyde) =

màu đỏ

Trang 12

TK Gr(-)->Glucose -được c/hóa > Pyruvic acid

MR(+): Pyruvic acid -Mixed Acid Pathways-

-> lactic, acetic, and formic acids

Many acids (pH 4.2) + methyl red = red

MR(-): Pyruvic acid -Butylene Glycol

Pathway > neutral end-products

Neutral end-products (pH 6.0) + methyl red = yellow

Trang 13

men lysin

(+) (-) khử CO2 / A amin

Kiềm hóa Tím, đục vàng Tím, trong

Trang 15

Chẩn đoán trực khuẩn gram (-) không lên men

Trang 16

có enzyme cytochrome oxidase/vk?

Enterobacteriaceae Pseudomadaceae

Chẩn đoán trực khuẩn gram (-) không lên men đường

Trang 17

Pseudomonas aeruginosa

Nhuộm gram

Trang 18

Oxidase (+)

Trang 19

Sinh sắc tố

Trang 20

Khả năng tiêu huyết

Trang 21

Không lên men đường glucose

Môi trường TSI

Trang 23

Escherichia coli ( E.coli )

Trang 24

Enterobacter aerogenes

Trang 26

KHÁNG SINH ĐỒ

vi khuẩn(VK)

↓ tiếp xúc [ kháng sinh] nhất định

Trang 27

KHÁNG SINH ĐỒ

Phương pháp đĩa giấy

Nguyên

tắc

[Kháng sinh] thích hợpđược tẩm trong

đĩa giấy→xác định độ nhạy : vòng

Môi trường Mueller – Hinton /NA

Đĩa giấy tẩm KS với nồng độ thích hợp

Chuẩn độ đục của VK cần làm:

108 VK/ml, ủ 37°C/2-5 giờ

Tampon, kẹp

Môi trường lỏng Nutrient Broth (NB)

Kháng sinh pha loãng : 200 μg/ml

Canh cấy VK trẻ 2-6 giờ ủ

10 ống nghiệm vô trùng

Pipette: 1ml, 5ml

Trang 28

KHÁNG SINH ĐỒ

Phương pháp đĩa giấy

Đánh số thứ tự ống nghiệm:1-10

Lấy 0,5 ml môi trường dinh dưỡng lỏng (5ml): ống nghiệm 2-10

Lấy 1ml KS pha loãng (1ml): mỗi 0,5

ml cho ống 1, 2→ trộn đều ống 2 rồi hút 0,5 ml cho vào ống 3

Làm tương tự đến ống 9, hút 0,5 ml/ống 9 bỏ

Ống 10 không có KS pha loãng

Hút 5ml canh cấy VK(5ml) cho 0,5ml mỗi ống 1-10

Lắc đều, ủ 37°C/24 giờ → ống trong cuối cùng: MIC

Trang 30

Đĩa giấy

Trang 32

KHÁNG SINH ĐỒ

Trang 33

-E – test độ dốc kháng sinh của 15 mức nồng độ kháng

sinh ổn định được xác định trước trên một dải nhựa

- Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC): là nồng độ nhỏ nhất để thuốc tập trung vào trong mô để tiêu diệt vi khuẩn,

vi nấm,

- Hơn 100 kháng sinh đang có sẵn thử nghiệm các vi

khuẩn hiếu khí và các sinh vật khó tính: Streptococcus

pneumonia, Haemophilus influenza, H pylori, N meningitidis, N gonorrhoeae, các vi khuẩn yếm khí, nấm

và Mycobacteria.

E-test

Trang 35

Penicillin G (PG) Cefotaxime(TX)

Trang 41

ống

chứng

ống chứng

Trang 42

Chúc các em học tốố t

Định dạng
Số trang	42
Dung lượng	5,53 MB